液相色谱法测定茶叶中黄曲霉毒素.pptx
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1、液相色谱法测定茶叶中黄液相色谱法测定茶叶中黄曲霉毒素曲霉毒素B1 u1、黄曲霉毒素,黄曲霉毒素,aflatoxin,简简写写AFT。u一、概述一、概述 u为黄曲霉产毒菌株的代谢产物,属超剧毒物质。u尤以AFTB 1 最为重要,毒性最强。u 2、理化性质理化性质uu(1 1)溶解性:难溶于水和乙醚、石油醚、已烷等非极性)溶解性:难溶于水和乙醚、石油醚、已烷等非极性或弱极性溶剂中。易溶于甲醇、氯仿、乙腈等极性溶剂中,或弱极性溶剂中。易溶于甲醇、氯仿、乙腈等极性溶剂中,溶于苯。溶于苯。uu(2 2)定性:对光、热、酸稳定;对碱和氧化剂不稳定。)定性:对光、热、酸稳定;对碱和氧化剂不稳定。uu光:光:
2、AFTB 1 AFTB 1 和和AFTG 1 AFTG 1 溶液,日光照溶液,日光照1d1d,分解仅,分解仅40%40%。得低浓度纯品易为紫外光破坏。故标准品宜用黑纸包裹。得低浓度纯品易为紫外光破坏。故标准品宜用黑纸包裹储存。储存。uu热:开始分解温度热:开始分解温度 B 1 B 1,268268269269 uu酸:弱酸和中性介质中稳定;强酸和碱性条件下分解。酸:弱酸和中性介质中稳定;强酸和碱性条件下分解。uupHpH?时分解;时分解;uupH=9pH=91010时迅速分解成几乎无毒的盐(内酯键打开):时迅速分解成几乎无毒的盐(内酯键打开):uu氧化剂:对氧化剂也不稳定,氧化剂浓度越大,分解
3、速度氧化剂:对氧化剂也不稳定,氧化剂浓度越大,分解速度越快:越快:C NaClO(g/L)破坏AFT所需的时间 uu54.5(g/L)54.5(g/L)立即立即 uu50(g/L)5s 50(g/L)5s uu40(g/L)1min 40(g/L)1min uu30(g/L)2min 30(g/L)2min uu20(g/L)3min 20(g/L)3min uu10(g/L)5min 10(g/L)5min uu5(g/L)30min 5(g/L)30min uu故实践上常可用漂白粉、氯、高锰酸钾、过氧化故实践上常可用漂白粉、氯、高锰酸钾、过氧化氢等消毒。氢等消毒。3、毒性毒性 uu(1 1
4、)为已知的)为已知的100100多种霉菌毒素中毒性最大的,多种霉菌毒素中毒性最大的,属强致癌性物质属强致癌性物质 有报道说,其毒性比氰化钾更大,有报道说,其毒性比氰化钾更大,约大约大100100倍,比倍,比B B(a a)P P大大40004000倍倍,可对动物,可对动物造成急性中毒,也可引起慢性中毒和致癌、致畸、造成急性中毒,也可引起慢性中毒和致癌、致畸、致突变。它在致突变。它在WHOWHO确定的重点研究毒物中被列为确定的重点研究毒物中被列为首位。首位。uu1 1)各种各种 AFTAFT的毒性大小并不相同:的毒性大小并不相同:uu uu顺顺 序序 B1 G1 B2 M1 G2 M2 B1 G
5、1 B2 M1 G2 M2 B2a LD 0.36 0.78 1.7 3.2 3.5 B2a LD 0.36 0.78 1.7 3.2 3.5 12 240 12 240 uu(5050mg/kg)mg/kg)uu注:对鸭雏,注:对鸭雏,LD50LD50小于小于50mg/kg50mg/kg即为剧毒物即为剧毒物 uu美国研究结论,美国研究结论,1g/kgAFTB11g/kgAFTB1可使大白鼠致癌;可使大白鼠致癌;我国研究,我国研究,20g/kg20g/kg可使大白鼠致癌。可使大白鼠致癌。uu uu(2)与人致癌的关系 uu黄曲霉毒素高污染地区,其肝癌发病率明显较高。如江苏的启东,福建的铜安,广
6、东的汕头,广西的抹援,为我国 4个肝癌高发病地区。(2)污染 调查 uu很广泛,各种粮食中均可检出,核桃、乳及其制品、干辣椒中也有检出。但以花生、玉米、棉籽及其制品污染最为严重,稻谷、高粱其次,“三麦”甚微。uu(1)污染特点 uu玉米:胚部污染;uu花生、棉籽:整粒污染但仅限于少数颗粒;uu小麦:皮层污染。(2)污染 调查 uu1976197619781978年,粮食部组织,调查了年,粮食部组织,调查了1818个粮种,取样个粮种,取样1912219122个,检出个,检出72337233个,检出率个,检出率37.7%,37.7%,其中超标率占其中超标率占49.2%49.2%。uu主要粮种情况(
7、主要粮种情况(g/kg g/kg):):uu玉米,平均玉米,平均 400400,最高,最高1000100012001200;(所以不要吃玉米所以不要吃玉米)uu花生,平均花生,平均 200200500500,最高,最高5000050000;(所以不要吃花生所以不要吃花生)uu花生油,平均花生油,平均 400400,最高,最高80008000;(所以不要吃花生油所以不要吃花生油)uu稻谷(洞庭湖)平均稻谷(洞庭湖)平均 5050100100,最高,最高330330。(所以不要吃所以不要吃稻谷稻谷)uu总体分布,广西、福建、江苏污染最严重,山东以北诸省总体分布,广西、福建、江苏污染最严重,山东以北
8、诸省污染少。污染少。5、限制标准(限制标准(g/kg)uu(1 1)GB GB uu花生、玉米、花生油及其制品,花生、玉米、花生油及其制品,2020;uu大米及其它食用油,大米及其它食用油,1010;uu其它粮食、豆类、发酵食品,其它粮食、豆类、发酵食品,5 5;uu婴儿代乳品,不得检出。婴儿代乳品,不得检出。uu(2 2)国外标准()国外标准(g/kgg/kg)uuFAO/WHOFAO/WHO,1515;uu美国,美国,2525;uu加拿大,加拿大,1515;uu日本,日本,1010;uu印度,印度,3030;uu以色列、瑞典,不得检出。以色列、瑞典,不得检出。uu1.适用范围适用范围uu本
9、方法适用于出口茶叶中黄曲霉毒素B1含量的检验。uu2.原理概要原理概要uu样品用三氯甲烷提取,提取液经硅胶柱净化,净化后的提取液用三氟乙酸衍生,用配有荧光检测器的液相色谱仪测定,外标法定量。3.主要试剂和仪器主要试剂和仪器uu3.1.3.1.主要试剂主要试剂uu三氯甲烷;三氯甲烷;uu正己烷;正己烷;uu苯;苯;uu甲醇:紫外光谱级;甲醇:紫外光谱级;uu乙腈:紫外光谱级;乙腈:紫外光谱级;uu三氟乙酸;三氟乙酸;uu乙腈乙腈-水溶液水溶液(1(11)1);uu三氯甲烷三氯甲烷-甲醇溶液甲醇溶液(95(955)5);uu苯苯-乙腈溶液乙腈溶液(98(982)2);uu黄曲霉毒素黄曲霉毒素B1B
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