消毒与灭菌.pptx
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1、第第3 3章章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全 内容内容n第一节第一节 消毒灭菌的常用术语消毒灭菌的常用术语n第二节第二节 消毒灭菌的方法消毒灭菌的方法n第三节第三节 消毒灭菌的运用消毒灭菌的运用n第四节第四节 影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素n第五节第五节 病原微生物实验室生物安全病原微生物实验室生物安全第一节第一节 消毒灭菌的常用术语消毒灭菌的常用术语n灭菌:灭菌:杀灭物体上所有微生物的方法,包括杀灭细菌杀灭物体上所有微生物的方法,包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。
2、生物。n消毒:消毒:杀灭物体上或环境中的病原微生物,并不一定杀灭物体上或环境中的病原微生物,并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。n防腐:防腐:防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。n清洁:清洁:是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。量的过程。n无菌:无菌:不存在活菌的意思。不存在活菌的意思。无菌操作:无菌操作:防止细菌进入防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。人体或其他物品的操作技术。第二节第二节 消毒灭菌的方法消毒灭菌的方法一、物理消毒灭菌法一、物理消毒灭菌法
3、(一)热力灭菌法(一)热力灭菌法(二)辐射杀菌法(二)辐射杀菌法(三)滤过除菌法(三)滤过除菌法(四)干燥与低温抑菌法(四)干燥与低温抑菌法(一)热力灭菌法(一)热力灭菌法湿热湿热8080经经5-10min5-10min可杀死所有细菌繁殖体和真菌可杀死所有细菌繁殖体和真菌原理:原理:多数无芽胞细菌经多数无芽胞细菌经55-6055-60作用作用30-60min30-60min后死亡后死亡分类:分类:干热灭菌法、干热灭菌法、湿热灭菌法湿热灭菌法干干热热灭灭菌菌法法焚烧:焚烧:废弃物品、动物尸体。废弃物品、动物尸体。烧灼:烧灼:接种环、试管口灭菌。接种环、试管口灭菌。干烤:干烤:160-170 2h
4、,160-170 2h,玻璃器皿、瓷器等。玻璃器皿、瓷器等。红外线:红外线:1-101-10m m波长最强,但只在照射波长最强,但只在照射到的物体表面产生热效,医疗器械的灭菌。到的物体表面产生热效,医疗器械的灭菌。脱水干燥,使脱水干燥,使大分子变性大分子变性干烤灭菌器干烤灭菌器 湿热灭菌法(一)湿热灭菌法(一)巴氏消毒法:巴氏消毒法:n杀灭液体中的病原菌或特定微生物,不耐热成杀灭液体中的病原菌或特定微生物,不耐热成分不被破坏分不被破坏n61.1-62.861.1-62.8 30 min 30 min 或或71.171.1 15-30s 15-30sn一般用于酒类、牛乳等的消毒。一般用于酒类、牛
5、乳等的消毒。煮沸法:煮沸法:n101.3 kPa,101.3 kPa,100 5min100 5min杀灭繁殖体,杀灭繁殖体,1-2h1-2h杀灭芽胞杀灭芽胞n加入加入2%2%的碳酸氢钠,促进芽胞的杀灭,防止的碳酸氢钠,促进芽胞的杀灭,防止金属器皿生锈金属器皿生锈n一般用于食具、刀剪、注射器的消毒。一般用于食具、刀剪、注射器的消毒。湿热灭菌法(二)湿热灭菌法(二)n流动蒸汽消毒法:流动蒸汽消毒法:常压蒸汽消毒法,常压蒸汽消毒法,100 15-30min100 15-30min杀灭繁殖体,但芽胞不被全杀灭繁殖体,但芽胞不被全部杀灭。部杀灭。n间歇蒸汽灭菌法:间歇蒸汽灭菌法:100100加热加热1
6、5-30min15-30min,3737过夜,连续三次,用于含糖、牛奶等培过夜,连续三次,用于含糖、牛奶等培养基。养基。高压蒸汽灭菌法:高压蒸汽灭菌法:n103.4103.4kPakPa(1.05kg/cm1.05kg/cm2 2),),121.3121.3,15-2015-20 min minn杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物n常用于一般培养基、生理盐水、手术敷料常用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等物品。等物品。灭菌锅灭菌锅湿热灭菌比干热效果好湿热灭菌比干热效果好n湿热灭菌时,菌体蛋白质较易凝固。湿湿热灭菌时,菌体蛋白质较易凝固。湿热灭菌时,菌体吸收水分,蛋
7、白质含水热灭菌时,菌体吸收水分,蛋白质含水愈多,凝固所需温度降低。愈多,凝固所需温度降低。n湿热穿透力比干热大,可使被灭菌物品湿热穿透力比干热大,可使被灭菌物品内部温度迅速上升。内部温度迅速上升。n湿热蒸气可放出潜热,这种潜热迅速提湿热蒸气可放出潜热,这种潜热迅速提高被灭菌物体的温度高被灭菌物体的温度 。(二)辐射杀菌法(二)辐射杀菌法 紫外线紫外线杀菌机理:杀菌机理:波长波长200-300200-300n nm m的紫外线具有杀菌作用的紫外线具有杀菌作用干扰干扰DNADNA的复制与转录的复制与转录紫外线穿透力较弱紫外线穿透力较弱不耐热物品的表面消毒不耐热物品的表面消毒特特 点:点:应用范围:
8、应用范围:空气消毒空气消毒手术室、传染病房、细菌实验室手术室、传染病房、细菌实验室 杀菌机理:杀菌机理:应用范围:应用范围:电离辐射电离辐射包括高速电子、包括高速电子、X X射线和射线和 射线射线干扰干扰DNADNA合成,破坏细胞合成,破坏细胞膜,产生游离基膜,产生游离基一次性医用塑料制品的消毒一次性医用塑料制品的消毒食品、药品、生物制品的食品、药品、生物制品的消毒不破坏其营养成分消毒不破坏其营养成分 微波微波波长波长1-1000mm1-1000mm的电磁波的电磁波杀菌机理杀菌机理:热效应,但不均匀,灭菌效果不可靠热效应,但不均匀,灭菌效果不可靠应用范围应用范围:食品、非金属器械、检验室用食品
9、、非金属器械、检验室用品、无菌室和病室中食品用具、品、无菌室和病室中食品用具、药杯及其他物品的消毒。药杯及其他物品的消毒。微波干燥杀菌设备微波干燥杀菌设备微波药材灭菌干燥设备微波药材灭菌干燥设备 (三)滤过除菌法(三)滤过除菌法机制机制:利用特殊的滤器以去除液体或空气利用特殊的滤器以去除液体或空气中的细菌,以达到无菌目的。中的细菌,以达到无菌目的。用途用途:主要用于不耐高温灭菌的血清、毒主要用于不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素、药液,以及空气的除菌。素、抗生素、药液,以及空气的除菌。特点特点:仅能除去细菌,不能去除病毒、支仅能除去细菌,不能去除病毒、支原体、衣原体和有些原体、衣原体和有些L L
10、型细菌等。型细菌等。用于滤过除菌的各式滤器用于滤过除菌的各式滤器滤菌过程滤菌过程 层流室层流室(四)干燥与低温抑菌法(四)干燥与低温抑菌法 在低温状态下真空抽去水分在低温状态下真空抽去水分用途:用途:保存菌种的最好方法保存菌种的最好方法冷冻真空干燥法:冷冻真空干燥法:二、二、化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法化学消毒剂的杀菌机制化学消毒剂的杀菌机制n促进菌体蛋白质变性或凝固,如酚类(高促进菌体蛋白质变性或凝固,如酚类(高浓度)、醇类、重金属盐类(高浓度)等;浓度)、醇类、重金属盐类(高浓度)等;n干扰细菌的酶系统和代谢,破坏蛋白与核干扰细菌的酶系统和代谢,破坏蛋白与核酸的基团,如某些氧化剂、重金属盐
11、类酸的基团,如某些氧化剂、重金属盐类(低浓度);(低浓度);n损伤细菌的细胞膜,如酚类(低浓度)、损伤细菌的细胞膜,如酚类(低浓度)、表面活性剂、脂溶剂等。表面活性剂、脂溶剂等。常用化学消毒剂杀菌机理常用化学消毒剂杀菌机理 类别类别作用机制作用机制 常用种类常用种类 酚类酚类蛋白变性,细胞膜损伤蛋白变性,细胞膜损伤 石炭酸石炭酸(苯酚苯酚)醇类醇类蛋白变性蛋白变性 乙醇乙醇 氧化剂氧化剂氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙酸高锰酸钾、过氧乙酸 重金属盐重金属盐氧化、蛋白、酶变性氧化、蛋白、酶变性 红汞、硫柳汞红汞、硫柳汞 烷化剂烷化剂蛋白、核酸烷基化蛋白、核酸烷基化 甲醛甲醛表面活性剂
12、表面活性剂蛋白变性,细胞膜损伤蛋白变性,细胞膜损伤 新洁而灭新洁而灭 染料染料干扰氧化、抑制繁殖干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫龙胆紫 常常用用的的化化学学消消毒毒剂剂及及防防腐腐剂剂对对人人体体组组织织都都有危害,所以只限于有危害,所以只限于外用或环境消毒外用或环境消毒。局限于:局限于:1 1、体表(皮肤、粘膜、伤口的消毒)、体表(皮肤、粘膜、伤口的消毒)2 2、手术器械消毒、手术器械消毒 3 3、排泄物及周围环境的消毒、排泄物及周围环境的消毒 消毒剂的应用消毒剂的应用 种类种类使用浓度使用浓度 用途用途石炭酸石炭酸3-5%3-5%地面、器具表面、皮肤消毒地面、器具表面、皮肤消毒乙醇乙醇70-75
13、%70-75%皮肤、体温计消毒皮肤、体温计消毒高锰酸钾高锰酸钾 0.1%0.1%皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒红汞红汞 2%2%皮肤、粘膜、小创伤消毒皮肤、粘膜、小创伤消毒硫柳汞硫柳汞0.1%0.1%皮肤消毒、手术部位消毒皮肤消毒、手术部位消毒过氧乙酸过氧乙酸0.2-0.3%0.2-0.3%塑料、玻璃器材消毒塑料、玻璃器材消毒碘酒碘酒2-2.5%2-2.5%皮肤消毒皮肤消毒新洁而灭新洁而灭0.05-0.1%0.05-0.1%手术洗手、浸泡手术器械手术洗手、浸泡手术器械龙胆紫龙胆紫2-4%2-4%浅表创伤消毒浅表创伤消毒消毒剂的分类消毒剂的分类按消毒剂杀灭微生物的能力分三级
14、:按消毒剂杀灭微生物的能力分三级:(1)高效消毒剂:高效消毒剂:可杀灭所有种类的微生物。可杀灭所有种类的微生物。(2)中效消毒剂:中效消毒剂:能杀灭除芽胞以外的微生物。能杀灭除芽胞以外的微生物。(3)低效消毒剂:低效消毒剂:可杀死细菌繁殖体和亲脂性病毒。可杀死细菌繁殖体和亲脂性病毒。高高效效消消毒毒剂剂含氯消毒剂含氯消毒剂次氯酸钠、二氯异氰酸尿酸钠、漂次氯酸钠、二氯异氰酸尿酸钠、漂白粉白粉过氧化物消毒剂过氧化物消毒剂过氧化氢、过氧乙酸过氧化氢、过氧乙酸醛类消毒剂醛类消毒剂戊二醛、甲醛戊二醛、甲醛环氧乙烷环氧乙烷中中效效含碘消毒剂含碘消毒剂碘酊、碘伏碘酊、碘伏醇类醇类乙醇、异丙醇乙醇、异丙醇低低
15、效效季铵盐类季铵盐类苯扎溴铵(新洁尔灭)苯扎溴铵(新洁尔灭)氯己定氯己定(洗必泰)(洗必泰)高锰酸钾高锰酸钾第三节第三节 消毒灭菌的运用消毒灭菌的运用n医疗器械物品的消毒灭菌医疗器械物品的消毒灭菌n室内空气消毒灭菌室内空气消毒灭菌n手和皮肤的消毒手和皮肤的消毒n黏膜的消毒黏膜的消毒n病人排泄物与分泌物的消毒灭菌病人排泄物与分泌物的消毒灭菌n病人污染物品的消毒病人污染物品的消毒n饮水的消毒饮水的消毒n环境的消毒环境的消毒(一)(一)医疗器械物品的消毒灭菌医疗器械物品的消毒灭菌高危器械物品高危器械物品需进入无菌组织需进入无菌组织灭菌灭菌中危器械物品中危器械物品不不进进入入无无菌菌组组织织但但接接触
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