猪的常见寄生虫病.pptx
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1、第七章 寄生虫病诊断 第一节病原学诊断方法一、粪便虫卵检查法1.直接涂片法 direct smear method 2.漂浮集卵法 flotation method 3.沉淀集卵法 sedimentation method4.麦氏计数法 MacMaster method5.毛蚴孵化法 是诊断日本血吸虫及 东毕吸虫的方法之一取被检粪便30100g(牛 100g)经沉淀集卵法处理,将沉淀倒入500ml三角烧 瓶内,加温清水(自来水 需脱氯处理)至瓶口,置 2226孵化,第1、3、5h,用肉眼或放大镜观 察并记录一次。如见水面下有白色点状物做直线来往运动,即是毛蚴,但需与水中一些原虫如草履虫、轮虫等
2、相区别。必要时吸出在显微镜下观察。气温高时,毛蚴孵出迅速,因此,在沉淀处理时应严格掌握换水时间,以免换水时倾去毛蚴造成假阴性结果。也可用1.0%1.2%食盐水冲洗粪便,以防止毛蚴过早孵出,但孵化时应用清水6.粪便培养与幼虫分离法圆线虫目所属线虫种类很 多,其虫卵在形态上非常 相似,很难区别。有时为 了区别这些线虫的种类,常将含有虫卵的粪便加以 培养,待其中虫卵发育成 为幼虫时,再检查幼虫,根据幼虫形态上的差异,加以鉴别有些寄生虫(如网尾科线 虫),其虫卵在新排出的 粪便中已变为幼虫;类圆 属线虫的卵随粪便排出后,在外界温度较高时,经5-12小时后,即孵出幼虫。为了提高检出率,常将幼 虫从粪便中
3、分离出来进行 检查常用的方法为漏斗幼虫 分离法 亦称贝尔曼法 (Baermanns technique)最常用的方法是在培养 皿底部加草纸或滤纸一 张,而后将欲培养的粪 便加水调成硬糊状,塑 成半球形,放于皿内的 纸上,并使半球形粪球 的顶部略高出平皿边沿,使加盖时与皿盖相接触。将此皿置25温箱中,注意保持皿内湿度(应使底部的垫纸保持潮湿状态)。经7天后,多数虫卵即可发育成第三期幼虫,并集中于皿盖上的水滴中。将幼虫吸出置载玻片上,放显微镜下检查7.测微技术各种虫卵和幼虫,常有 恒定的大小,测量虫卵 或幼虫的大小,可作为 确定某一虫卵或幼虫的 依据。虫卵和幼虫的测 量需用测微器二、体表虫体检查法
4、寄生于动物体表的寄生虫 主要有蜱、螨、虱等。对 于它们的检查,可采用肉 眼观察和显微镜观察相结 合的方法蜱寄生于动物体表,个体 较大,通过肉眼观察即可 发现螨和虱有些个体较小,常 需刮取皮屑,于微镜下寻 找虫体或卵三、生殖道虫体检查寄生于生殖道的虫体主要 有牛胎儿三毛滴虫和马媾 疫锥虫牛胎儿毛滴虫存在于病 母牛的阴道与子宫的分 泌物、流产胎儿的羊水、羊膜或其第四胃内容物 中,也存在于公牛的包 皮鞘内,应采取以上各 处的病料寻找虫体由于虫体的检定,常以见 到运动活泼的虫体为准,故在采集病料时必需尽可 能地避免污染,以免其它 鞭毛虫混入病料造成误诊。采集用的器皿和冲洗液等 应加热使接近体温,否则
5、虫体骤然遇冷会失去活动 力或死亡。冲洗液应采用以玻璃蒸馏装置制备的蒸馏水配制生理盐水,以保证冲洗液中不含金属离子,减少金属离子对虫体的影响。病料采集后应尽快地进行检查由母畜采集病料,是取阴 道分泌的透明粘液,以直 接自阴道内采取为良好,建议用一根长45厘米,直 径1.0厘米的玻璃管,在 距一端的12厘米处,弯成 150角,而后消毒备用。使用时将管的“短臂”插入受检畜的阴道,另端接一橡皮管并抽吸,少量阴道粘液即可吸入管内。取出玻管,两端塞以棉球,带回实验室检查收集公牛包皮冲洗液,应 先准备100150毫升加温 到3035的生理盐水,用针筒注入包皮腔。用手 指将包皮口捏紧,用另一 手按摩包皮后部,
6、而后放 松手指,将液体收集于广 口瓶中待查流产胎儿,可取其第四 胃内容物,胸水或腹水 检查检查时应将收集到的病料,立即放于载玻片上,并防 止材料干燥。对浓稠的阴 道粘液,检查前最好以生 理盐水稀释2-3倍,羊水或 包皮洗涤物最好先以每分 钟2000转的速度离心沉淀 5分钟,而后以沉淀物制片 检查。未染色的标本主要检查活动的虫体,在显微镜下可见其长度略大于一般的白细胞,能清楚地见到波动膜,有时尚可见到鞭毛,在虫体内部可见含有一个圆形或椭圆形的有强折光性的核。波动膜的发现,常作为本虫与其它一些非致病性鞭毛虫和纤毛虫在形态上相区别的依据。也可将标本固定,用姬氏染液或苏木素染色后检查马媾疫锥虫在末梢血
7、液中 很少出现,因此血液学检 查在马媾疫诊断上的用处 不大。检查材料主要应采 取浮肿部皮肤或丘疹的抽 出液,尿道及阴道的粘膜 刮取物,特别在粘膜刮取 物中最易发现虫体采取病料时,浮肿液和皮 肤丘疹液用消毒的注射器 抽取,为了防止吸入血液 发生凝固,可于注射器内 先吸入适量的 2%柠檬酸 钠生理盐水。马阴道粘膜刮取物的采取,先用阴道扩张器扩张阴道,再用长柄锐匙在其粘膜有炎症的部位刮取,刮时应稍用力,使刮取物微带血液,则其中容易检到锥虫。采取公马尿道刮取物时,应先将马保定,左手伸入包皮内,以食指插入龟头窝中,徐徐用力以牵出阴茎,用消毒的长柄锐匙插入尿道内,刮取病料以上所采的病料,均可加 适当量的生
8、理盐水,置载 玻片上,覆以盖玻片,制 成压滴标本检查;也可制 成抹片,用姬氏液染色后 检查也可用灭菌纱布,以生理 盐水浸湿,用敷料钳夹持,插入公马尿道或母马阴道,擦洗后,取出纱布,洗入 无菌生理盐水中,将盐水 离心沉淀,取沉淀物检查,方法同上四、血液和组织内虫体 检查法1.鲜血压滴标本检查2.涂片染色标本检查 3.虫体浓集法涂片法虽然可以查到血液 中的原虫,但血液中的虫 体较少时,则不易查出虫 体。为此,常先进行集虫,再制片检查。其操作过程 是采病畜抗凝血6-7毫升,以每分钟500转的速度,离 心5分钟,使其中大部分红 细胞沉降;而后将含有少量红细胞,白细胞和虫体的上层血浆移入另一离心管中,补
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