绵羊养殖农民田间学校辅导员指导手册 — 可持续绵羊生产和食品营养价值链的发展与应用.pdf
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中国农业出版社联合国粮食及农业组织2023北京FAO中文出版计划项目丛书粮食和农业植物遗传资源种质库标准 实施实用指南种质库正常型种子保存编著张金梅 尹广鹍 辛 霞 等 译联合国粮食及农业组织iiiFAO中文出版计划项目丛书指 导 委 员 会主 任 隋鹏飞副主任 倪洪兴 彭廷军 顾卫兵 童玉娥 李 波 苑 荣 刘爱芳委 员 徐 明 王 静 曹海军 董茉莉 郭 粟 傅永东ivFAO中文出版计划项目丛书译 审 委 员 会本 书 译 审 名 单主 任 顾卫兵副主任 苑 荣 刘爱芳 徐 明 王 静 曹海军编委 宋雨星 魏 梁 张夕珺 李巧巧 宋 莉 闫保荣 刘海涛 赵 文 黄 波 赵 颖 郑 君 杨晓妍 穆 洁 张 曦 孔双阳 曾子心 徐璐铭 王宏磊翻 译 张金梅尹广鹍辛霞李洋陈晓玲审 校 钱钰v国际组织和各国政府正在努力实现到2030年消除饥饿等可持续发展目标(SDGs)。为了实现可持续发展目标,需制定和推广有利于农民的解决方案,这正是联合国粮食及农业组织(简称粮农组织)制定20222031年战略框架的背景。该战略框架旨在改进目前不尽合理的农业和粮食体系,使其更高效、更包容、更有韧性和更可持续,以实现其四个愿景:更好生产、更好营养、更好环境和更好生活。大约80%的粮食是植物性的,因此,即使气候不断恶化,如果作物生产体系能够实现可持续,即用更少的外部投入生产更多的粮食,国际社会也将大受裨益。体系的关键因素之一是不断改良作物品种,使其具有养分利用高效、营养丰富、适应目标农业生态环境以及适应生物和非生物胁迫等多样化特性。植物育种者需要获得尽可能广泛的遗传变异种质来培育新品种。粮食和农业植物遗传资源(PGRFA),包括改良作物品种、农家品种/地方品种和作物野生近缘种,是以上遗传变异的主要来源。维持种质库中已鉴定和编目的粮食和农业植物遗传资源安全,能够保障其可供当代和后代使用,或直接利用或用于科学研究和品种培育。粮农组织及其合作伙伴认识到种质库的有效运行对可持续作物生产体系至关重要。此外,因认识到全球对粮食和农业植物遗传资源是相互依赖的,粮农组织一直将协调统一世界各种质库流程作为粮食和农业植物遗传资源保护和可持续利用工作的重中之重,而种质资源交换实践也反过来促进了这项工作。正因如下,粮农组织通过其粮食和农业遗传资源委员会在2014年发布了粮食和农业植物遗传资源种质库标准(简称种质库标准)。种质库标准为种质库、种质圃、试管苗库和超低温库等异地保存粮食和农业植物遗传资源提供了国际标准。种质库标准发布后,种质库工作人员反馈指出,为提高种质库标准的实用性,应当按照种质库操作流程分步骤编写配套丛书,为种质资源保存过程中的复杂步骤和决策提供指导,将成为具有深远意义的参考资料。鉴于此,粮农组织编写了 粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南种质库正常型种子保存。此外,还编写了 粮食和农业植物遗传资源PREFACE|序|序vi粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 种质库标准实施实用指南种质圃保存和 粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南试管苗和超低温保存。本配套丛书简单易懂,可作为种质库技术人员的操作手册、种质库管理人员的简化指导教材,亦可作为对种质库运行感兴趣人员的简易参考资料。粮农组织植物生产与保护司司长viiACKNOWLEDGEMENTS|致 谢|粮农组织植物生产与保护司在Chikelu Mba的指导下编写了 粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南种质库正常型种子保存,并在2021年9月27日至10月1日期间召开的粮农组织粮食和农业遗传资源委员会第十八届例会上通过。郑重感谢粮食和农业遗传资源委员会给予的指导以及委员会成员提供的宝贵建议。参与编写的人员有粮农组织的Bonnie Furman、Stefano Diulgheroff、Arshiya Noorani和Chikelu Mba。特别感谢Catherine Gold、Mary Bridget Taylor、Andreas Wilhelm Ebert和全球作物多样性基金对编制本手册的巨大贡献。粮食和农业遗传资源委员会、CGIAR种质库平台以及Adriana Alercia、Joelle Braidy、Nora Castaneda-Alvarez、Paula Cecilia Calvo、Mirta Culek、Axel Diederichsen、Lucia de La Rosa Fernandez、Lianne Fernandez Granda、Luigi Guarino、Jean Hanson、Fiona Hay、Remmie Hilukwa、Visitacin Huelgas、Yalem Tesfay Kahssay、Simon Linington、Charlotte Lusty、Medini Maher、Matlou Jermina Moeaha、Mina Nath Paudel、William Solano、Mohd Shukri Bin Mat Ali、Janny van Beem以及Ines Van den Houwe等个人均有贡献。特别感谢Alessandro Mannocchi为本手册所做的设计和排版。同时感谢Mirko Montuori、Dafydd Pilling和Suzanne Redfern提供了发行支持。还有很多人为本手册的编写和出版做出了贡献,粮农组织诚挚地感谢他们付出的时间、敬业和专业。viii粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南|前言|FOREWORD种质库对粮食和农业植物遗传资源进行异地保存,旨在确保其可供当代和后代使用,或直接利用或用于研究与植物育种。因此,种质库有助于可持续作物生产体系,有助于实现粮食安全和营养安全。然而,必须对种质库进行有效管理,使种质资源在最佳条件下保存并可供利用。种质库通过种质交流,包括跨国交流,在促进全球粮食和农业植物遗传资源合作方面发挥了重要作用。2014年发布的粮食和农业植物遗传资源种质库标准旨在统一种质库操作,即统一各种质库和各国的种质资源保存、鉴定、评价和信息汇编。种质库标准设置了当前最佳的科学和技术基准。为满足分步骤明确种质库常规操作流程的需要,特编制 粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南种质库正常型种子保存。粮农组织粮食和农业遗传资源委员会在2021年第十八届例会上批准了这份实用指南,按种质库工作流程提供了每个流程所需的信息。基于种质库管理的基本原则,提出了一系列关键且相互关联的操作环节,即:种质的身份,生活力维持,保存和更新过程中遗传完整性的维持,种质健康维持,保藏种质的物理安全管理,种质的可用性、分发和利用,信息的可用性,以及种质库的管理。本手册包括种质获取、干燥和保藏、种子生活力监测、更新、鉴定、评价、信息汇编、分发和交换、安全备份、安全和人员。每一个环节都配有操作流程图。此外,还有一节提出了种质库设施设计或修建所需的基础设施和设备建议。最后一节提供了关于种子种质库运行管理的指导和技术背景的参考资料。附录部分提供了与种质库各项操作相关的潜在风险及其预防措施。本手册旨在促进种质库标准更为广泛的应用,是其配套系列出版物之一。种质库管理人员可以将本手册作为制定操作标准程序、质量管理体系的基础。ix序 v致谢vii前言 viii1导论 22种质获取 63干燥和保藏 144种子生活力监测 195更新 236鉴定 277评价 318信息汇编 359分发 3910安全备份 4311人员和安全 4712基础设施和设备 51CONTENTS|目 录|x粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 13参考文献 5414更多信息和文献 58附录风险及其应对措施 671国际热带农业研究中心/Neil Palmer豆类多样性,国际热带农业研究中心粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 2大多数植物物种,包括许多最重要的粮食作物,都能产生正常型种子,可以通过干燥降低其含水量并在低温条件下保存。降低含水量和低温保存可以延长正常型种子的保存寿命。谷物、豆类、牧草、大多数蔬菜和部分水果物种能产生正常型种子,因而能保存于种子种质库。这些作物的大多数野生近缘植物也能产生正常型种子,虽然这类种子往往需要特殊处理。像马铃薯等无性繁殖类作物,也能产生正常型种子。种子种质库与其他类型种质库的原则是通用的,包括种质的身份,生活力维持,保存和更新过程中遗传完整性的维持,种质健康维持,保藏种质的物理安全管理,种质的可用性、分发和利用,信息的可用性,以及种质库的管理(粮农组织,2014)。1导论分发和 安全备份信息汇编干燥和保藏种子生活力 监测与更新种质库正常型 种子保存种质获取 鉴定和评价图1种子种质库正常型种子保存的主要操作环节 1导论3种子种质库中正常型种子保存,可分解为一系列相互关联的操作(图1)。本手册介绍了种质库每个操作环节的关键实践活动(表1)a。它概述了正常型种子种质库常规操作流程(图2),并支持种质库标准的应用(粮农组织,2014)b。本手册按种质库工作流程的顺序详细介绍了种质库标准的内容,以促进种质库标准更广泛地应用。各种质库可以在本手册描述的操作基础上,编制和开发种质资源保存,明确每项活动细节的标准操作程序(SOPs)(国际热带农业研究所,2012)和质量管理系统(QMS)(CGIAR种质库平台,2021)。表1 种子种质库的基本原则及相关操作环节种质库原则种质库操作汇总种质的身份收集和登记护照信息确定植物学分类编制永久且唯一的种质编号,并在所有记录中使用仔细处理种质,避免混杂,且在入库和保存过程中要对所有样品进行标记和追踪生活力的维持收集、更新、种子处理和运输过程中遵循最佳做法和时间最优的保存条件定期生活力监测必要时进行更新遗传完整性的维持确保收集和保存的样品能尽可能代表原始群体在包装、更新和扩繁过程中采取最佳做法种质健康的维持必要时采取检疫措施收集、包装、更新和扩繁过程中遵循最佳做法污染监测和管理种质的物理安全制定和实施风险策略在适宜的地方建设和维护种质库基础设施种质安全备份和复份保存种质的可用性及其利用根据法律和植物检疫要求获取和分发种质充足的数量和高效的分发提供种质相关资料信息的可用性建立种质库信息管理系统定期备份种质的护照信息和管理数据尽可能地向外部用户提供种质护照信息和其他相关数据种质库的主动管理制定并向工作人员提供标准操作程序种质库操作过程中产生的数据和信息可供管理人员和工作人员使用雇用受过良好培训、受职业安全保护和健康的工作人员通过必要的培训,不断提高种质库工作人员的能力a 实践活动应遵循种质库标准中的最佳做法。b 文中提及的所有标准均出自粮农组织种质库标准。粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 4本手册仅就种质库运行的复杂步骤和决策提供了一般性指导。每个种质库都有自己的特殊情况,对特殊收集品的有效管理需要在经验基础上认真考虑和调整程序。对于本手册中所述工作环节的详细技术规范,种质库工作人员可能需要查阅更多信息,参见本手册的参考文献。种质健康/检疫收集获取捐赠获取干燥和清选生活力检测负责人决定接收样品-样品编号-登记护照信息和确定植物学分类基础收集品标本样品生活力监测和保存更新备份保存分发活动收集品鉴定评价黑箱方式存于 长期保存条件其他种质库的活动/基础收集品种子保藏图2种子种质库正常型种子保存操作流程注:每个步骤都需要准确的信息记录。1导论5全球作物多样性信托基金作物野生近缘植物资源收集,尼泊尔粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 6建议种质库制定关于种质获取的书面政策或程序,包括遵守法律、植物检疫以及其他规章和要求(图3)。3 依据机构的种质获取政策决定是否将种质资源纳入种质库收集品中。制定获取政策能够确保收集品可管理,并满足用户的需求(Guarino等,1995)。种质库管理者在决定获取新种质前,可以与育种家、植物学家以及其他科学家进行交流讨论。研究机构也可以设立一个专门的或一般性的作物咨询委员会。在做决策的过程中,应考虑收集品或受赠样品的健康和生活力状况、护照数据信息的可用性(分类学信息、种质来源等)以及样品的“独特性”(以避免非必要的重复)。3 种质获取要通过合法途径,并随附所有相关文件a。种质的获取过程要遵守国家和国际法规,如植物检疫法、粮食和农业植物遗传资源国际条约(简称条约)或生物多样性公约(CBD)对遗传资源获取的规定(粮农组织,2014)。种质库应就种质资源获取问题与条约缔约方的国家协调中心或其他主管部门进行沟通。3 种质库对每一份新样品赋予一个永久且唯一的种质编号。一旦管理者决定接收样品入种质库,该样品将会被赋予一个唯一的种质编号。也可以向条约秘书处申请数字对象唯一标识符(DOI)(粮农组织,2021a)。在种质库处理全过程中,种质编号和数字对象标识符都将与该种质的其他所有处理信息资料一起被保留。如果受赠种质已被捐赠组织赋予了一个种质编号和数字对象唯一标识符,a 种质库标准4.4.1。2种 质 获 取 2种 质 获 取7种质获取种质获取应合法,并遵守国家、地区和国际植物检疫法及其他进口法规和要求-遵守法律法规要求:国家法规、国际植物遗传资源条约(“标准材料转让协议”)、生物多样性公约(优先知情同意书和双方同意的条款)-遵守植物检疫要求:进口许可证、植物检疫证书从收集任务中获取种质资源-根据单位任务,制定明确的种质收集任务策略从本国或其他国家收集种质资源-提出收集建议-获得收集许可-根据繁育系统收集种质-从外观健康的植株上收集-避免耗尽自然种群-每个样品给予收集编号-使用粮农组织/生物多样性的多作物护照数据描述符-获取任何额外可用信息(农民、社区居民)-收集植物标本凭证或图像-仔细标记并避免样品混杂-确保缩短从收集到移交种质库之间的时间间隔种质包装并运输至种质库-可根据需要,在包装前使用杀虫剂-使用坚硬、绝缘的包装材料-确保及时进行信息汇编-检查进口许可要求-使用空运或快递运输-如果通过快递发送,要追踪包裹情况通过捐赠获取种质-核实最核心的护照数据-确保每个样品的识别号码正确-遵守国家、地区和国际植物检疫法以及其他有关部门关于进口的所有法规和要求种质库收到样品并接收-咨询本单位的种质获取政策,决定是否接受种质-检查样品并按流程处理,包括植物检疫-对新植物种质进行生活力检测-必要时扩繁种子-为样品分配一个唯一的种质登记号记录、验证和上传有关种质获取的所有数据及其元数据图3种质获取环节各项活动工作流程概要图粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 8那么在护照数据中要保留这些作为替代标识符。这是确保信息数据能与种质一一对应的一个重要手段。3 加入种质库的种质资源都附有粮农组织/生物多样性中心在多作物护照数据描述符中概述的相关数据a。无论是从收集任务获取还是其他机构捐赠,建议所有样品都应附有粮农组织/生物多样性中心多作物护照数据描述符(Alercia等,2015)中详细说明的相关数据。数据必须要与每份种质明确关联,比如可以通过使用种质编号和数字对象标识符。3 有关种质获取的所有数据及其元数据,都应进行记录、验证并上传到种质库信息管理系统。考虑应使用电子设备以避免抄写错误,且便于上传。或者须使用不褪色墨水或铅笔记录数据,字迹必须清晰可辨。使用条形码标签和条形码阅读器有助于种质管理,并且可以减少人为错误。2.1 通过收集任务获取种质资源 3 根据机构的任务制定明确的种质资源收集任务策略。必须在收集任务之前设定收集的优先级别。建议拟订收集方案,明确说明收集任务的目的、目标地点和方法。对已收集资源和未收集资源进行盘点分析以防止重复,同时对已入全国统编目录资源和未收集资源进行盘点分析,并在此基础上制定明确的收集任务策略。与收集地区的研究机构或专家开展合作,遵守该地区关于收集方面的法规。提前做好任务计划,确保最佳做法并符合有关法规和要求。3 种质收集要通过合法途径获取,并附有所有相关文件b。种质获取过程要遵守国家和国际法规。下列信息可以协助确保遵守这些法规:当涉及种质获取相关问题时,种质库应与相关指定机构沟通。在其他国家进行种质收集时,可能需要联系条约缔约方的国家协调中心或其他指定的种质获取机构。对于在种质库所在国进行种质收集时,可能有必要与国家主管部门联a 种质库标准4.1.4。b 种质库标准4.1.1。2种 质 获 取9系,确保了解并遵守国家和地方法规。从原生境自然居群收集作物野生近缘种或半驯化种质,必要时需获得国家、地区或地方主管部门的许可批示。当从农田、农民仓库或社区,包括一些自然生境,收集种质资源时,必要时需根据相关国家、地区或国际法律法规确定的事先知情同意书(PIC)和双方同意条款(MAT)(生物多样性中心,2018)。3 种质库应遵守国家、地区、国际植物检疫法以及有关当局的其他进口法规和要求a。当种质资源被转移时,存在随宿主植物样本意外引入植物病虫害的风险。下列步骤可能有助于降低此类风险,并确保符合法规和要求:在别国收集的种质,应获得提供国的植物检疫证书以及种质库所在国家有关政府部门的进口许可证(国际植物保护公约,2021)。将收集样品转移到种质库之前,要通过相关的检疫程序。根据国家植物检疫部门的建议,将种子数量不足的收集种质在封闭或隔离区域进行扩繁。3 将收集任务安排在成熟的最佳时期,从看起来健康、没有病虫害或其他损害的植株上收集种子、穗、果荚等。种质库工作人员应该根据收集的目标物种,查阅具体的信息来源。为了防止潜在的植物检疫污染,尽可能地避免收集土地上散落的种子,埋入土壤中的种子,以及感染腐生菌、致病真菌、细菌或昆虫侵袭的种子。这对于野生近缘种可能很难实现,因为他们的种子很容易落粒。3 从适当数量的单株植物上收集种子、穗、果荚等样本,同时避免因收集导致自然种群的枯竭。可以考虑根据目标物种的繁育系统,确定在一个种群中要采样的植物株数和种子粒数国际农业研究磋商组织全系统遗传资源项目(SGRP-CGIAR),2011。为了达到合理的代表性,建议在可能的情况下,异花授粉的物种至少需从30个亲本植株收获种子,自花授粉的物种至少需从60个亲本植株收获种子b。如果源种群规模足够,建议收集足够的种子以避免需要进行初始扩繁c。a 种质库标准4.1.1。b 种质库标准4.1.5。c 根据作物种质库知识库建议,遗传同质样本种子保存数量最少为3 000 4 000粒,遗传异质样本种子保存数量最少为4 000 12 000粒。粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 10 通常,为了给种群自然更新留下足够的种子,样品收集数量不应超过该野生种群种子量的20%(Way,2003)。3 收集的样品要贴上标签,在处理过程中不能混杂。如可能,在收集容器上使用不褪色墨水或机打标签(最好有条形码)来标记样品。一个很好的做法是在种子包装袋内外都放置标签。如果种子或样本不干燥,需要保护内部标签不变质,例如可以将标签放在密封的塑料袋中或使用防潮标签。建议记录每个样品的所有收集编号和其他必要信息。3 收集的种质应附有粮农组织/生物多样性中心在多作物护照数据描述符中概述的相关数据a。标准化的收集表,有助于收集每个样品的相关数据。给每个样品一个收集编号,以便将样品与收集信息相关联。可考虑收集以下信息:收集种质在种间和种内水平分类鉴定信息,如有可能,收集植物种群类型、生境和生态环境、收集地的土壤状况、GPS坐标和照片图像,以便种质管理者和使用者了解其原始背景情况。将每个样品按照粮农组织/生物多样性中心多作物护照数据相关描述符,详细描述每个样品的相关数据(Alercia等,2015;见插文1)。如果是从农田或农民仓库收集的种质,则要收集种质的来源、传统知识、文化习俗等方面信息。对于从种群(例如野生物种)获得的任何植物标本,需使用与所收集样品相同的收集号,并将其与数据库中的种质登记号相关联。插文1最基本的护照数据收集表中至少应包括以下信息:收集号 收集机构名称/代码 分类学名称,尽可能的详细/特异 常用作物名称 收集地点位置 收集地点纬度 收集地点经度 收集地点海拔 收集日期 生物学状态(野生、杂草、地方品种等)3 尽可能缩短从收集到处理再到移交至种质库之间的时间,以防止种质的损失a 种质库标准4.1.4。2种 质 获 取11和变质a。种子的初始生活力是影响种子样品寿命的主要因素,并且它在采集或收集时处于最高值;随着种子的老化,种子生活力下降。新收获的种子样品越早放置在可控的干燥条件下,就越有可能获得较高的初始生活力(见“种子生活力监测”章节)。3 选择包装材质和运输方式,确保种质能够安全和及时地交付。为确保种质以良好状态到达种质库,通常要考虑信息汇编处理所需时间、装运或转运时间和环境条件(温度和湿度)。以下因素可以降低种质收集后的丧失风险:包装 采取预防措施,避免运输过程中出现真菌感染或昆虫入侵风险。如果已观察到并能准确鉴定害虫,可在包装前使用杀虫剂。需避免任何不必要的化学处理,因为这可能对收集的样品有害。如果进行了处理,则需在每个种子包装和随附文件中进行声明。建议使用通风良好的布袋。使用坚硬防震信封或绝缘包装以防止样品被机械邮件分拣机压碎和 变质。运输 对于长时间的公路运输,如果种子或样本潮湿,则需要定期进行通风处理,以防潜在的生活力丧失。尽可能使用最快的运输方式,如空运或快递,避免种子或样本暴露在不利的环境条件下使其质量劣变。持续跟踪包裹,以确保种质库工作人员做好收到种质后就可以处理样品的准备。3 所有准备入库的种质都需在指定的接收区(如种子健康检测间)检查是否有损坏、污染,并且采取不会改变种质生理状态的方式进行种质处理。低质量或受污染的种子不能直接在田间种植。必要时采取检疫措施。2.2通过转让/捐赠获取种质资源 3 捐赠的种质是合法获取的,并附有所有相关文件b。a 种质库标准4.1.3。b 种质库标准4.1.1。粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 12 如果捐赠机构来自条约缔约方,且捐赠的种质属于条约附件1所列的作物或物种(粮农组织,1995),则必须使用“标准材料转让协议”(SMTA)(粮农组织,2021b,2021c)。如果捐赠机构来自非条约缔约方,或者种质不在附件1的范围内,尽管标准材料转让协议可以使用,但通常还是使用“材料转让协议”(MTA)亚洲蔬菜研究发展中心(AVRDC),2012。如果种质捐赠机构、育种家或其他种质提供者没有“材料转让协议”,种质库最好准备一份捐赠协议,详细说明将种质转移到种质库的条件。3 捐赠的种质应附有粮农组织/生物多样性中心在多作物护照数据描述符中概述的相关数据a。建议要求捐赠者提供样品时,同时提供粮农组织/生物多样性中心在多作物护照数据描述符中详述的相关数据(Alercia等,2015;见插文1)。3 种质库要遵守国家、地区和国际植物检疫法以及其他有关部门关于进口的所有法规和要求b。当种质资源被转移时,存在随寄主植物样本意外引入植物病虫害的风险。下列步骤有助于降低此类风险,并确保符合法规和要求。来自其他国家的种质,要获得提供国的植物检疫证书及种质库所在国家有关当局的进口许可证(见国际植物保护公约,2021)。在样品转移到种质库之前,要通过相关的检疫程序。检查捐赠种质是否需要对种子进行特殊处理,如打破休眠。根据国家植物检疫部门的建议,将种子数量不足的捐赠材料在封闭或隔离区域进行扩繁。3 所有准备入库的种质都需在指定的接收区(如种子健康检测间)检查是否有损坏、污染,并且采取不会改变种质生理状态的方式进行种质处理。低质量或受污染的种子不能直接在田间种植。必要时采取检疫措施。a 种质库标准4.1.4。b 种质库标准4.1.1。2种 质 获 取13粮农组织/A.Noorani种子保藏,赞比亚农业研究所粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 143干燥和保藏建议种质库制定适用的书面政策或规程,将获取的种质进行长期和中期保藏,并确保有足够数量的种子可以满足及时分发的需求(图4)。3 处理收集的样品,并在干燥前进行初步清选。样品清选是种质库初始处理程序的一部分,是样品管理的重要组成部分。在干燥之前,应从肉质果和干果、荚果和穗中取出种子。干燥的种子,特别是干燥的豆荚或穗中的种子,要进行脱粒,将种子从植株中分离,粉碎残留样本。如可能,在干燥前要进行初步清选,去除破碎的死种子。3 将种子样品干燥到便于保藏的最佳含水量。建议在温度5 20C、相对湿度10%25%的可控环境条件下将种子干燥到平衡状态a。不同物种种子保存的最适含水量不同,但这些条件应能确保大部分物种种子能被干燥到最适含水量(油料种子约为3%,淀粉类谷物种子约为7%)。可以利用在线工具查询不同干燥条件下种子的平衡含水量(皇家植物园,2018)。如果没有专用的干燥室或房间,可以使用硅胶等干燥剂干燥种子。根据样品类型(肉质果实、干果或种子)、一次要干燥的样品数量和大小、当地的气候条件和可用的财政资金(Rao等,2006)来确定种子干燥的适当方法。使用数字式湿度监测仪、指示剂硅胶或价格较低的挂壁式湿度表监测干燥情况。3 种子在入库前要进行最后的清选。对种子进行脱粒,将其从残留样本中分离并进行清选,以便在入库保藏前去除破碎的死种子。3 干燥后,用于长期保藏的样品需要在可控的环境条件下,用带有清晰标签的密闭容器进行包装b。a 种质库标准4.2.1。b 种质库标准4.2.2。3干燥和保藏15干燥和保藏收集样品的处理和初步清选-从肉质果和干果、荚果或穗中取出种子-如有可能,对植株进行脱粒分离种子,并粉碎残留的植物材料-在干燥前进行初步清选,去除破碎的死种子将种子样品干燥到最适含水量-在可控环境条件下将种子干燥至平衡状态-根据种质的类型确定适当的种子干燥方法-使用数字式湿度监测仪或其他方法监测干燥情况种子在保藏前要进行最后的清选-脱粒种子,将其从残留的植物样本中取出,并去除破碎的死种子用于长期保藏的样品在干燥后需要在可控条件下进行包装-使用不透气的容器-在相对湿度可控的地方包装种子-将容器装满种子以尽量减少种子上方的空气-在容器内部和外部都贴上标签长期基础收集品最好保存在-18 C的环境中-若无理想条件,可使用0以下的冰柜用于中期保藏的样品在干燥后需要在可控环境条件下进行包装-使用密闭和容易打开的容器-在相对湿度可控的地方包装种子-保存足够数量的种子以供分发-在容器中使用硅胶指示袋来监测湿度-在容器内部和外部都贴上标签在冷藏温度下保藏中期活动收集品如可能,保持(153)%的相对湿度每份种质单独包装50粒种子的参考标本样品维持最原始的样本可用记录、验证和上传有关干燥和保藏的所有数据及其元数据图4干燥和保藏环节各项活动工作流程概要图粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 16用密闭容器密封样品,可确保种子在保藏期间不会重新吸收水分。在干燥室条件下或在控制相对湿度的空调室中包装种子,有助于保持种子的含水量。其他的最佳做法包括:将种子装满容器以尽量减少种子上方的空气,有助于防止种子重新吸收水分(最好配备一系列尺寸规格的容器,以满足不同品种的种子体积要求)。每个样品容器的外部和内部要有标签(最好是条形码),以确保种质能正确识别。要保存足够三次繁殖用种量(SGRP-CGIAR,2010a)a。如果有足够的种子且条件允许,建议同时分装安全备份(见“安全备份”章节)、种子发芽检测(见“种子生活力监测”章节)和标本样品(见下文)。3 长期基础种质最好保藏在-18的环境条件b。长期保藏的适宜温度是-18C。如果技术达不到-18C,也可以使用零度以下的冰柜。如果种子收集品数量大,用一个冷库可能比许多独立的冰柜更节能。为冷库和冰柜配备备用电源非常重要。最佳做法包括:避免在任何停电期间进入冷库或打开冰柜。尽量缩短样品在较高温度下的时间(但在容器从冷藏室或冷冻室取出后,要平衡到外界温度再打开容器,以免冷种子结露)。3 干燥后,用于中期保藏的样品需要在可控环境条件下,用标签清晰、密闭且易打开的容器包装。作为中期保藏的活动收集品可用于分发、更新、鉴定和评价。最佳做法包括:每个样品容器的外部和内部都要有标签(最好是条形码),以确保种质能被准确识别。在容器中使用指示剂硅胶小袋来监测水分。保存足够数量的种子用于分发和更新(SGRP-CGIAR,2010a)c。3 用于中期保藏的活动收集品需在冷藏温度下保存。活动收集品可以保藏在定制的冷库或商业冰箱中,理想温度为5 10,相对湿度为(153)%d。为冷库和冰箱配备备用电源非常重要。最佳做法包括:ac 根据作物种质库知识库建议,遗传同质样本种子保存数量最少为3 000 4 000粒,遗传异质样本种子保存数量最少为4 000 12 000粒。b 种质库标准4.2.3。d 种质库标准4.2.4。3干燥和保藏17 避免在任何停电期间进入冷库或打开冰箱。尽量缩短样品在较高温度下的操作时间(但是在打开容器之前,要让容器平衡到外部温度,以免冷种子结露)。3 每份种质要单独保存少量种子作为标本。在“种子档案”中为每份种质保留一份种子标本(最好是最原始的样本)很有用处。如有可能,应将大约50粒活种子保存在一个小塑料瓶、玻璃瓶或密封的塑料袋中,并在内外贴上标签(最好是条形码),以确保种质被正确识别a。参考种子标本对种质繁殖后的真实性验证特别有用。3 种质清选、干燥和保藏的所有数据及其元数据,都应进行记录、验证并上传到种质库信息管理系统。需要采集的数据包括:种质的位置(活动/基础收集品在冷库中的位置)、每个位置的种子数量、初始含水量(若有)和入库的日期。可考虑使用电子设备以避免抄写错误,且便于上传到种质库信息管理系统。否则,使用不褪色的墨水或铅笔记录数据,字迹要清晰可辨。使用条形码标签和条形码阅读器有助于种质管理,并减少人为错误。a 种质库标准4.4.3。粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 18作物信托基金/Neil Palmer水稻发芽,非洲水稻中心 4种子生活力监测194种子生活力监测建议种质库制定适用的书面政策或程序,详述用于检测种子生活力下降的生活力a监测系统(图5)。3 种子发芽检测应按照最优的标准程序进行。检测的标准化操作很重要,最好是使用重复的检测程序,以便生活力监测测试结果在不同时间仍具有可比性b。许多种质库已经制定了内部操作指南。可以在网上找到许多资料:国际种子检验协会(ISTA,2021)和官方种子分析师协会(AOSA,2021)公布了发芽检测的程序,包括建议的发芽基质、最佳温度以及用于打破休眠可能需要的特殊处理。可通过作物种质库知识库(SGRP-CGIAR,2010b)获得针对特定物种的生活力检测指南。邱园种子信息数据库(Kews Seed Information Database)包含了超过12 424个野生物种的成功发芽方案,包括作物野生近缘种。3 获取种质后,应尽快进行种子初始发芽检测c。准备在种质库进行保藏的种子都应进行种子生活力检测。如果种子来源表明生活力可能并不理想,则该检测就尤其重要。适时的检测可以帮助管理人员对低质量的种质尽早进行更新,并最大限度减少采集和保藏期间种子生活力下降速率。部分物种存在初级休眠期,发芽方案应确保休眠不会影响检测结果。较老的种子可能存在次级休眠。应查阅有关打破种子休眠的具体方法的文献。3 生活力指标要设置得尽可能高,以确保样品的最长寿命。生活力是影响种子寿命的一个重要因素,因为生活力高的种子往往在保a 通常通过检测发芽率来评估种子生活力,应将有生命力但不萌发的休眠种子计算在内。b 见第4章。c 种质库标准4.3.1。粮食和农业植物遗传资源种质库标准实施实用指南 20存过程中存活时间更长。最低生活力指标通常设定为种子发芽率85%a。对于某些种质材料,其种子发芽率通常达不到85%(例如:部分森林和野生物种)b,生活力指标可以设置得比较低。大多数在成熟的最佳阶段收集的种子,如果处理得当并迅速干燥,其初始生活力应该很容易达到85%的标准。那些发芽率未达高水平的种质,可判为休眠的活种子。使用切割测试(皇家植物园,2015)或四氮唑染色试验(皇家植物园,2014)等替代方法,应能更准确地估计出种质的真实生活力。对未发芽的种子进行切割测试,有助于确定种子是否已失活或已染病。无论怎样,建议用同一批次的新鲜种子进行切割测试验证。3 对于生活力极低的种子,必要时可以将发芽的种子直接种植以进行更新。如果种质生活力极低,挽救该样品的唯一方法可能是种植那些在生活力检测中发芽的幼苗。在这种情况下,如有条件,可将发芽的种子直接移植到盆中,并放在温室或生长室中生长。应尽量防止这种情况的发生,以免损害原始样本的遗传完整性。3 建立生活力监测系统,在保藏期间定期检测样品的生活力状况。生活力监测旨在尽可能确定何时生活力会下降至或接近设定的更新指标。监测过于频繁会浪费种子和资源,监测过迟则可能会冒着种子失活的风险,对于这种情况,设置监测间期是一个折中方案。尽可能确定最佳监测间期,以确保每个物种样本的生活力在规定指标以上,同时注意不同物种间种子寿命的差异(Ellis等,2019;Nagel和Brner,2010)。通常情况下,将生活力监测间期设置为预测生活力下降至更新标准时间的1/3,但不超过40年c。中期保藏的短寿命物种的监测间期设定为5 10年。当中期保藏样品的生活力接近设定的更新标准时,监测基础收集品的生活力(Hay和Whitehouse,2017)。3 理想的种质库信息管理系统应包含自动化工具,用以检查种质资源生活力并标记需要更新的库存资源。3 种子生活力监测的所有数据及其元数据,都应进行记录、验证并上传到种质库信息管理系统。a 种质库标准4.3.2。b 种质库标准4.3.4。c 种质库标准4.3.3。4种子生活力监测21种子生活力监测种子发芽检测遵循最优的标准程序-如果发芽条件未知,根据文献等研究可能的发芽条件获取种质后,尽快进行种子发芽检测-检测所有批次准备保存在种质库中种子的生活力生活力标准设置得尽可能高,以确保样品的最长寿命-最低生活力标准设定为种子发芽率85%以上-如果发芽率低于此标准,则利用四氮唑染色或切割检测来确认休眠情况对于生活力很低的种子,必要时可以将发芽后的种子直接种植以进行更新-为了挽救生活力极低的种质,可以将发芽的种子直接移载到盆中,并在温室或培养室中生长建立一个监测系统,在保藏期间定期检测样品的生活力状况-尽可能地确定最佳检测间期,以确保每个物种样本的生活力保持在指标以上,同时注意不同物种间种子寿命的差异理想的种质库信息管理系统应能自动检查种子生活力,并自动标记需要更新的种质-确保数据是最新的记录、验证和上传有关种子生活力监测的所有数据及其元数据图5种子生活力监测环节各项活动工作流程概要图需要考虑的数据包括:发芽检测的日期和过程、死种子或空种子的数量、发芽率等。可考虑使用电子设备,以避免抄写错误,且便于上传到种质库信息管理系统。或者,使用不褪色的墨水或铅笔记录数据,字迹要清晰可辨。使用条形码标签和条形码阅读器便于种质管理,并且可以减少人为错误。作物信托基金/Michael Major蚕豆更新,国际干旱地区农业研究中心黎巴嫩办事处 5更 新235更 新推荐种质库制定适用于种质更新a的书面政策或程序,分步指导说明包括:种子库存数量和种子生活力监测、田间准备、种质选择、样本大小、播种、耕作管理、授粉控制、真实性核对、收获、收获后管理以及资料汇编(图6)。3 定期监测种子库存数量和种子生活力。理想的种质库信息管理系统应能自动检测种子库存数量和生活力,并能自动标记需更新的种质。同时要根据实际情况,避免种植的种质份数过多。3 当种子生活力或种子数量低于更新标准时就要对种质进行更新。当种子生活力低于生活力标准,或种子库存数量不足以满足分发要求时,就需要对种质进行更新。当新获取种质的种子数量少时,也可能需要进行首次更新。建议考虑以下更新措施:当种子生活力降至初始生活力的85%时,应进行更新b。当库存种子数量降至完成繁殖该份种质三次播种所需用种量以下时,应进行更新。3 采用最佳更新方法,以确保获得足够数量健康种子。减少更新次数对于避免有关风险很重要。建议采取以下措施:选择与原收集地生态环境条件尽量相似的地区进行更新,以降低潜在的选择压力。特别要注意野生种的更新需求,以避免适- 配套讲稿:
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