激光扫描共聚焦显微镜在生命科学中应用.pptx
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1、L Laser aser S ScanningcanningC Confocal onfocal MMicroscopeicroscope激光扫描共聚焦显微镜LSCM在生命科学中应用1 1、显微形态学常用工具、显微形态学常用工具电子显微镜光学显微镜TEM SEM生物显微镜生物显微镜 荧光显微镜荧光显微镜 实体镜实体镜LSCM2 2、LSCMLSCM简介简介A.特点特点用激光作为光源,分辨率高,对样品损伤小,活体观察。用激光作为光源,分辨率高,对样品损伤小,活体观察。对样品做光学切片,具有对样品做光学切片,具有Z轴分辨率。轴分辨率。以样品产生的荧光为检测信号,可进行定性、以样品产生的荧光为检测信
2、号,可进行定性、定量测量。定量测量。计算机重构形成立体图像。计算机重构形成立体图像。监测时间空间动态变化。监测时间空间动态变化。超出单纯形态学观察。超出单纯形态学观察。B.光路光路物镜标本针针 孔孔有针孔无针孔C.成像原理成像原理ABBCCCABA3 3、功能介绍、功能介绍具有普通光镜所有的功能具有普通光镜所有的功能:万能生物显微镜、荧光显微镜、微分干涉万能生物显微镜、荧光显微镜、微分干涉A.A.多通道、多荧光成像多通道、多荧光成像B.B.光学切片,重构三维显微图像光学切片,重构三维显微图像C.C.生物活性物质生物活性物质(蛋白质、核酸、离子)(蛋白质、核酸、离子)定性、定量、定位分析定性、定
3、量、定位分析D.D.生理生化指标生理生化指标(pHpH、CaCa2+2+、MgMg2+等等)的动态观察、测量的动态观察、测量E.E.荧光漂白后恢复技术荧光漂白后恢复技术F.F.细胞的激光显微细胞的激光显微“外科手术外科手术”及光陷阱技术及光陷阱技术G.G.药物、病毒、细菌等外界物质的跟踪药物、病毒、细菌等外界物质的跟踪 H.H.荧荧光蛋白的应用光蛋白的应用 I.I.强大的图像处理功能。强大的图像处理功能。利用利用LSCM还可以研究:细胞凋亡、细胞增值的动态过程;膜流还可以研究:细胞凋亡、细胞增值的动态过程;膜流动性、通透性、膜电位变化的检测;各种递质、高分子物质的扩散、动性、通透性、膜电位变化
4、的检测;各种递质、高分子物质的扩散、受体的移动变化;细胞骨架、基因定位、原位杂交受体的移动变化;细胞骨架、基因定位、原位杂交.A.A.多荧多荧光图像光图像 用多荧光,您可以使用多个标记同时研究细胞结构。此外,多荧光试验是直接研究分子和其他细胞成分之间关系的唯一工具。三重荧光图像与透射光图像三重荧光图像与透射光图像多通道成像原理Ch-1DAPICh-2FICTCh-3TRITC=B.B.光学切片与重构三维图像光学切片与重构三维图像C.C.生物活性物质定性、定量、定位监测生物活性物质定性、定量、定位监测D.D.生理生化指标的动态观察生理生化指标的动态观察Cover Glass:170umAir/O
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