牛肉膏蛋白胨培养基的配制与灭菌分析.pptx
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1、1 牛肉膏蛋白胨培养基的配制与灭菌 方月琴2一、复习二、实验:配培养基与灭菌三、斜面的划线培养四、倒平板的操作五、平板划线培养3一、复习一、复习45微生物培养与微生物培养与检验主要主要课程内容程内容1.微生物营养需求2.微生物形态3.微生物纯化、分离4.微生物培养、筛选与保存5.微生物检验LOGO6课程内容程内容微生物吃什么?微生物吃什么?1微生物长的什么样?微生物长的什么样?2如何得到微生物?如何得到微生物?3如何保存微生物?如何保存微生物?4我很爱吃熟食(猪头肉),但是听说我很爱吃熟食(猪头肉),但是听说熟食微生物超标,这是怎么检测的?熟食微生物超标,这是怎么检测的?57规则:1.上课不迟
2、到:第1、5节课,提前10min到教室 2.下课前,自己的实验物品归类,该清洗的清洗,该收拾的收拾 3.值日生负责擦黑板、扫地、擦桌;为大家做好服务工作 4.上课时间请不要玩手机 8安全操作与安全操作与标准操作准操作9(一)微生物培养基的制备(二)微生物的消毒灭菌(三)认识微生物培养所需的仪器设备微生物吃什么?微生物吃什么?110(一)微生物培养基的制(一)微生物培养基的制备培养基:是人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养物质。满足微生物生长发育的水分、C,N,生长因子,P,S,Na,Ca等适宜的酸碱度、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位,合适的渗透压11根据物理状根据物理状态划分
3、划分培养基分 液体、半固体和固体 3种液体液体培养基有各种肉汤培养基,主要用于细菌扩细菌扩大培养大培养;半固体半固体培养基含0.4%琼脂,主要用于保存细菌固体固体培养基含15%20%琼脂,主要用于分离细分离细菌菌12培养基的配制原培养基的配制原则1.选择适宜的营养物质实验室中常用:不同微生物所需培养基各不同不同微生物所需培养基各不同牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基细菌细菌高氏一号高氏一号放线菌放线菌麦芽汁培养基麦芽汁培养基酵母菌酵母菌察氏培养基察氏培养基霉菌霉菌132.营养物质的浓度及配比合适3.控制pH条件 细菌和放线菌:pH7.07.5 酵母菌和霉菌:pH4.56.04.控制氧化还原电
4、位5.原料来源的选择尽量利用廉价且易获得的原料作为培养基成分146.灭菌处理避免杂菌污染,要对所用器械及工作场所进行消毒与灭菌培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基0.1MPa,121.3 1530min15(二)微生物的消毒(二)微生物的消毒灭菌菌灭菌灭菌指利用指利用物理和化学物理和化学的方法杀灭或除去物料及的方法杀灭或除去物料及设备中设备中一切生命物质一切生命物质的过程。的过程。消毒消毒是指用物理或化学的方法杀死物料、容器、是指用物理或化学的方法杀死物料、容器、器具内外的器具内外的病原微生物病原微生物,一般只能,一般只能杀死营养细胞杀死营养细胞而而不能杀死芽孢不能杀死芽孢。消毒不一定能达到
5、灭菌的要求,而灭菌则可达到消毒不一定能达到灭菌的要求,而灭菌则可达到消毒的目的消毒的目的无菌无菌16消毒消毒灭菌方法:菌方法:(一)干热灭菌法(二)湿热灭菌法(三)过滤除菌(四)紫外线杀菌(五)药物杀菌17(一)干热灭菌法(一)干热灭菌法1.火焰灭菌法2.热空气灭菌法14016023h18(二)湿热灭菌法(二)湿热灭菌法1.高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法121 2030min2.常压蒸汽灭菌法3.常压间歇灭菌法19(三)过滤除菌(三)过滤除菌薄膜滤菌器0.22m和0.45m20(四)紫外线杀菌(四)紫外线杀菌240280nm波段紫外线杀菌力较强多以253.7nm作为紫外线杀菌波长特点:穿透力弱穿
6、透力弱超净工作台:超净工作台:21(五)药物杀菌(五)药物杀菌1.酒精2.新洁尔灭22(三)(三)认识微生物培养所需的微生物培养所需的仪器器设备1.培养平板232.试管与棉塞243.接种环,涂布棒254.高温高压蒸汽灭菌锅26p42 高高压蒸汽蒸汽灭菌菌请回顾灭菌锅的操作方法271)用之前检查水位及水质。若水质不好,需换水2)放置灭菌物品,勿过满;瓶子灭菌,瓶盖拧松3)盖上锅盖,相对的两个螺帽一起拧4)启动加热,同时打开放气阀;检查安全阀是否关上。调整温度时间121 15min。5)待排气阀冒出大量热气并持续约25min后排尽冷空气后,再将其关闭;6)灭菌结束,待压力下降至0,可打开放气阀,之
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