猪乙型脑炎及其防制.pptx
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1、猪乙型脑炎及其防制研究进展v乙型脑炎及其危害v乙型脑炎病毒的病原学特性v乙型脑炎的流行病学特性v乙型脑炎的防制v乙型脑炎疫苗研制进展v乙型脑炎诊断方法研究进展v乙型脑炎病毒分子生物学研究进展v展 望 Iv乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE),简称乙脑,是一种由蚊虫传播引起的人与动物共患的急性病毒性传染病。1871年,日本。v夏秋季节流行,曾称为“夏季脑炎”。冬季曾发生过的昏睡脑炎(嗜眠性脑炎),日本学者(1928年)。冬季 甲型脑炎,夏秋 乙型脑炎。I 乙型脑炎乙型脑炎 乙脑对人类危害巨大,是人类中枢神经系统(CNS)最常见的虫媒病之一,是包括印度次大陆在内的整个亚洲引
2、起人类死亡和残疾的一个主要原因。I 乙型脑炎的危害(人)乙型脑炎的危害(人)时时 间间 国国 别别 病病 例例 病死率病死率1924年 日本 6000 60%1958年 越南 68971965年 日本 3000-50001999年 马来西亚 I我国是乙脑发病人数最多的国家,占世界总发病数的80%以上。乙型脑炎的危害(人)乙型脑炎的危害(人)乙脑暴发流行的部分大事记乙脑暴发流行的部分大事记v该病主要危害儿童,特别是学龄儿童,在新加坡曾有12岁儿童感染率高达70%的报道。40-45岁的成人也易感。怀孕妇女感染后导致流产。v全球每年感染乙脑人数超过1千万,大多数呈隐性感染(亚临床感染),其发病率一般
3、为1:25-1:1000,平均为1:200。v 病死率高,平均为20%,国外有的地方高达50%-60%,全球每年病死人数超过1万人。v后遗症严重,约57%-68%的治愈者患有不同程度的神经学后遗症。I乙型脑炎的危害(人)乙型脑炎的危害(人)v 多种动物如猪、马、牛、山羊、绵羊、猴和家禽很易感染乙脑,其它如兔、大鼠、鸽、犬、鸭、野禽和爬行类也易感,小鼠和某些蜥蜴能被实验感染。其临床症状随患病动物的种类不同而异,牛、羊、家禽多为隐性感染,马可发生严重的脑炎。I乙型脑炎的危害(动物)乙型脑炎的危害(动物)v猪主要表现为:潜伏期3d-4d,仔猪脑炎,高热稽留,精神沉郁,步行踉跄,最后身躯麻痹而死;育肥
4、猪持续高热;妊娠母猪主要表现为流产,产出大小不等的死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔;公猪单侧或两侧性睾丸肿大,局部发热,有痛感,数天后,睾丸肿胀消退,逐渐萎缩变硬。v此病引起的主要经济损失是怀孕母猪发生繁殖障碍,对作为畜牧业支柱产业养猪业的持续增产造成巨大的危害。I乙型脑炎的危害(猪)乙型脑炎的危害(猪)v乙脑病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)的分离和鉴定最早报道于1935年(日本)。v黄病毒科(Flaviviridae)。v 3个血清型:JaGAr,Nakayama和Mie(intermediate type),它们具有不同的生物学特性,包括生长特性和毒力。v
5、JEV毒粒呈球形,20面体对称,有囊膜,毒粒直径为45-50nm(核心30nm),沉降系数200S,其分子量约为3000KD,是黄病毒科66个成员中最小的病毒之一。vJEV在环境中不稳定,易被灭活。I乙型脑炎的分类及理化性质乙型脑炎的分类及理化性质vJEV囊膜外表有穗状突起,提纯的穗状突起具有血凝活性,其成分为糖蛋白。其血凝素有轻重两种,血凝性与毒力相关,血凝性是JEV强毒株的共性,减毒毒株的血凝性相当低,甚至完全丧失。vJEV的血凝谱比较广,在一定条件下能凝集鹅、鸽、雏鸡、绵羊等动物的红细胞,但其血凝素易于破坏而且血凝反应要求比较严格的pH域。不同毒株血凝反应的最适pH不完全相同。I血凝特性
6、血凝特性 JEV的抗原性较强,自然或人工感染的动物一般都能产生较高效价的中和抗体、血凝抑制抗体和补体结合抗体。I抗原性抗原性 vJEV可在多种原代和传代细胞上增殖。鸡胚成纤维细胞、鼠胚肌和肾细胞、牛胚肾细胞、人胚肺和肾细胞、人羊膜细胞、猪肾原代细胞、狗肾原代细胞(PDK)、白纹伊蚊细胞(C6/36)、金黄地鼠肾原代细胞(Primary Hamster Kidney,PHK)、BHK-21、PK-15、Hela、Vero等。vJEV在PHK、猪肾原代细胞、BHK-21和Vero上可增殖到较高的滴度,而且有明显的细胞病变(CPE),其特点主要是圆缩和脱落。v目前国内外用于增殖JEV的细胞主要有PH
7、K,BHK-21和鼠脑。I增殖特性增殖特性致病机制致病机制I肝、脾、肌肉神经元血循蚊虫叮咬叮咬部位繁殖初期病毒血症病毒血症CNS和脑皮质的深层炎症炎症 Reported JE cases by countries and regions where viral transmission is proven or suspected I 流行范围流行范围 乙脑的流行在热带地区无明显的季节性,而在温带和亚热带地区则有严格的季节性。据我国多年统计资料,约有90%的病例发生在7、8、9三个月内,流行高峰华中地区多在7-8月,华南和华北地区由于气候特点,流行较华中提早或推迟1个月。云南省的流行高峰也较华
8、中推迟1个月。I 流行季节流行季节Transmission cycle of JEVTransmission cycle of JEVI传播循环传播循环乙型脑炎的防制乙型脑炎的防制 v灭蚊是控制乙脑流行的一项重要措施 药物灭蚊法、生物学和生态学灭蚊法v免疫接种是一种最有效的预防措施 猪是JEV的扩增动物,预防猪感染本病是防止人患乙脑的重要措施,在蚊虫活动季节开始前1个月或配种前1个月注射疫苗。I乙脑的治疗没有特殊的方法,主要是对症治疗。其主导性防制措施防蚊灭蚊与免疫接种。Japanese encephalitis vaccines for humanVaccine Description Su
9、bstrate Strain(s)Manufacturer(s)inactivated mouse brain Nakayama,India(1),Japan(7),Korea(1),P1 Taiwan(1),Thailand(1),Vietnam(1)inactivated PHK P3 China:Beijng,Shanghai,Changchun live,attenuated PHK SA14-14-2 China:Chengdu and Wuhan I人用乙脑疫苗人用乙脑疫苗 疫疫 苗苗 基基 质质 效效 力力 副副 作作 用用 价价 格格 灭活 鼠 脑 2-3,95%强烈:触痛 红
10、肿 20%高 轻度全身症状10-30%(头痛 肌痛 发热 胃肠道)全身性荨麻疹 面部血管性 水肿 呼吸窘迫 0.6%灭活 PHK 2-3,90%轻微:肿胀4%头痛1%高 发热6%疹 减毒、活 PHK 1,80-100%少见:头痛0.03%发热0.46%低 恶心0.03%疹0.08%I3种疫苗的比较种疫苗的比较人用乙脑疫苗人用乙脑疫苗Virulent parent virus SA14 Isolated from mosquitoes in China 11 passages in newborn mice 100 passages in PHK cell culture 3 plaque pu
11、rifications Irradiation by u.v.and plaque purification in PHK cellsClone12-1-7First attenuated variant 6 animal passages 6 plaque purifications SA14-2-8SA14-5-3 5 passages in suckling mice 2 plaque purifications in PHKSA14-14-2/PHK 9 passages and plague purificationsin PDK cell culture SA14-14-2/PDK
12、I疫苗毒株的传代减毒过程疫苗毒株的传代减毒过程The derivation of live attenuated vaccine clones of JEV by passage of the wild-type strain SA14 in cell culturev日本有2种活疫苗供兽用。一为M株,经胎鼠皮肤培养传代致弱,供猪用,亚洲其它国家有的也用此苗;一为ML-17株,JaOH0566株经3733302725减毒而获得。v我国目前猪用乙脑疫苗主要是鼠脑灭活疫苗,该苗具有注射剂量大、需多次注射、效果不稳定及免疫力不持久等不足之处。I兽用乙脑疫苗兽用乙脑疫苗 v亚单位疫苗v重组活疫苗v核酸
13、疫苗I发展中的乙脑疫苗发展中的乙脑疫苗v森田公一等(日本,1991)用JEV E基因C-末端1/3长度cDNA片段的原核表达产物免疫小鼠,发现该融合蛋白能诱导小鼠产生抗JEV抗体,且对100PFU JEV攻击的保护率为100%(8/8)。v刘金华等(1998)用昆虫细胞(sf9)表达的prM-E蛋白免疫2头猪,每头2mL,2周后加注1mL。第2次免疫1周后,HI抗体为2,2周为8,3周达到16。I 乙脑亚单位疫苗乙脑亚单位疫苗I乙脑重组活疫苗乙脑重组活疫苗List of live virus-vector vaccine of JEVList of live virus-vector vacc
14、ine of JEV时间时间199019911991199119921992199519971997199819991999作者作者AtsushiKonishiKonishiMason Konishi Konishi娄元梅刘启富KonishiKonishiGuirakhooMonath 载体载体VacciniaVacciniaAvipoxVacciniaNYVACVacciniaVacciniaVacciniaNYVACALVACNYVACALVACYFVYFV基因片段基因片段prM prM-E NS1prM,E ,NS1 prM-E-NS1-NS2a-NS2b prM-E-NS1-NS2a
15、E-NS1-NS2a-NS2b E-NS1-NS2aprM,E,NS1prM-EE-NS1-NS2a prM-E-NS1-NS2aprM-E-NS1-NS2a prM-E-NS1 prM-E-NS1prM-E-NS1prM-E-NS1 prM-EprM-E 宿主宿主rabbi t,mice mice micemice swinemicemice rabbitmice humanmicemonkey 免疫应答及保护力免疫应答及保护力均有特异性抗体反应,抗致死性攻击有抗体反应,保护力高有抗体反应,保护力低 抗致死性攻击均有特异性抗体反应,抗致死性攻击均有特异性抗体反应特异性抗体反应,抗致死性攻击有
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