大肠埃希菌的微生物检验分析.pdf
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1、中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生 收稿日期:2023 年 12 月 21 日 作者简介:张志霞(1973),女,汉族,河北张家口人,本科,副主任技师,研究方向为微生物检验技术。-122-大肠埃希菌的微生物检验分析 张志霞 河北省张家口市沽源县疾病预防控制中心,河北 张家口 076550 摘要:摘要:目的 分析进行大肠埃希菌微生物检验的方法及价值。方法 随机抽取疾控中心在 2023.01-2023.06 送检的样本 44 例,针对大肠埃希菌进行微生物检验,分析检验结果。结果 44 例样本中,检出大肠埃希菌菌落 26 例,占比 59.09%;阳性对照组生长特征性的大肠埃希菌菌落,阴性对照组中无
2、;大肠埃希菌在麦康凯琼脂平板上表现出该菌的特色形态。结论 实验室按照药典的规定和要求对样本进行大肠埃希菌的微生物检验,可以得出比较准确的检验结果,而且培养的细菌具备代表性特点,因此可以将相关检验方法作为疾病临诊治疗和用药的参考依据。关键词:关键词:大肠埃希菌;微生物检验;方法;意义 中图分类号:中图分类号:R44 0 引言 临床工作中,微生物检验是一项必须、复杂且重要的工作,是选择合适的方法对样本中的微生物指标进行检测,确定相关微生物的浓度,帮助判断病情存在、严重程度以及治疗效果等。随着技术的不断进步,目前疾控中心使用的微生物检验体系比较成熟,有明确的流程和统一的标准,可以取得准确的检验结果。
3、大肠埃希菌即大肠埃希菌,英文简称 E.coli,是革兰氏阴性杆菌的一种,在自然界中普遍存在。其中,该菌在人体肠道中属于正常栖息菌,有一定浓度,但如果受到一些因素的刺激就会激活其致病性,导致机体出现感染、炎症反应等问题,比如食物不干净可能导致该菌浓度超过,引发感染、肠炎等问题。因此医学和食品领域都很关注对该菌的微生物检验工作的开展。但目前对于该菌的微生物检验方法较多,选择哪一种方法比较合适且效果明确是疾控中心工作人员关注的重点。本次就对该菌的微生物检验方法进行分析。1 资料与方法 1.1 材料 随机抽取疾控中心微生物实验室在 2023 年 1 月-2023 年 6 月期间送检的样本 44 例。其
4、中标准对照选择大肠埃希菌菌株CMCC(B)44102,同时准备恒温培养箱、全自动微生物鉴定仪、培养基等。1.2 方法 按照药典(2020 年版)的规定进行大肠埃希菌相关的微生物检验。具体内容:首先是在无菌操作台,血平板称取培养基基础,加入蒸馏水或去离子水,搅拌煮沸到完全溶解,分装到三角瓶中,选择 121高压灭菌 15min。在培养基冷却到 50左右后,按照无菌操作要求,每 100mL 培养基加入脱纤维羊血或兔血5-10mL,摇晃倾注到平板上,保证均匀。然后使用试管吸取10mL待检样品供试液划线或涂布到血平板培养基中,同时取中性的牛肉膏-蛋白胨缓冲液 10mL 接种到另一个血平板培养基中,作为阴
5、性对照组;取 10mL样品供试液接种到新的血平板培养基中,加入大肠埃希菌菌悬液(菌落数 10-100cfu)作为阳性对照组。所有培养基都放置到培养箱,设定 361的条件,放置24h;之后取出培养物 1mL,接种到 MacB 培养基,设定42恒温培养 24h;出现菌落后,使用接种环蘸取一点,接种到 MacA 培养基,设定 33恒温倒置培养 8h。最后检查是否长出菌落,并进行分离纯化,鉴定之后,如果发现是阳性结果认定为检测出 E.coli,如果未发现没有长出菌落或者鉴定结果为阴性,则认为没有检测出 E.coli。1.3 观察指标 观察培养基中的细菌菌落情况。2 结果 44 例样本中,检出大肠埃希菌
6、菌落 26 例,占比59.09%;阳性对照组生长特征性的大肠埃希菌菌落,阴性对照组中无。大肠埃希菌在麦康凯琼脂平板上表现出该菌的特色形态,总结包括:颜色呈鲜桃红色,少数呈微红色,菌落中心多数为深桃红色;圆形,较中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生-123-扁平;边缘齐整,表面光滑,湿润。3 讨论 微生物检验是属于疾控中心的重点工作内容,主要是检测送检的样本中是否存在微生物,以及确定微生物的浓度。正常来说,对于健康群体采集的样本,微生物浓度有正常标准水平,而且很多微生物不应该存在。但是如果个体因为一些因素的影响而发病,特别是病原菌感染类型的疾病,通过检测可以发现相关病原菌浓度超标。此时通过微生物
7、检验就可以帮助判断疾病的存在、疾病严重程度以及治疗方案的效果。对于疾控中心来讲,主要是负责控制传染性疾病的传播和扩散,预防传染病出现。因此需要在工作中定期采集样本,检验其中是否有违规存在的微生物,这可以帮助判断传染病等问题的发生。而对于质量的追求,要求疾控中心开展的微生物检验工作也不断提升检验质量,以应对新时期的工作压力和挑战。所以在检验过程中,疾控中心要注意完善管理制度体系,强化监督工作开展,严格遵制度要求落实工作和监督,以保证检验工作的有效开展。特别是当前时代,新的抗菌药物不断出现和应用,新的传染病类型也不断增加,感染类疾病的发生率还是很高,病原微生物变异几率大,带来新的基因型,使得原本的
8、药物不再适用或者效果变差。所以临床上十分关注病原学诊断工作的开展,要求按规定进行操作,保证微生物检验结果的全面性、准确性和合理性。近年来随着医学技术的不断进步,以及各类传染病的不断出现,微生物检验工作的需求和工作量不断增长,检验方法逐渐丰富,检验技术的便捷程度也逐渐升高。但具体来说,微生物检验过程中,可能影响检测结果准确性的因素较多,比如检验室条件、样本的采集与保存、检验方法的选择就是主要因素之一。因此,对上述相关因素进行严格控制,尽量排除产生的影响,比如检验方法、检验人员技术等,就可以保证检验环节的顺利且按规定进行,确保检验过程符合要求,得到的结果准确和可靠,可以为研究分析工作奠定数据基础。
9、这项工作的内容主要是两方面,一是指示菌检测,通过检验发现样本中是否存在指示菌以及是否处于合格范围内,比如计算该菌的菌落数量,常用的是细菌总数、大肠埃希菌检验两方面内容,帮助判断样本是否存在病原菌污染;二是致病菌检测,药典以及其他相关标准制度中,对于体内、药物等中的微生物含量有明确规定,其中有一部分微生物属于致病菌,如果这部分微生物含量超标,浓度过高,就表示被污染,意味着个体可能发病,比如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等。微生物检验工作的开展,需要检验人员对于微生物学与医学等学科知识有丰富的了解,并可以有效掌握实验室生物安全、消毒灭菌技术、医院感染等方面的内容;可以熟练对检验样本进行采集、处理和检
10、验,掌握相关的标准原则与方法;比如血液、脑脊液、脓液、痰液、粪便等多种类型的标本检验方法和标准都需要了解。在疾控中心的实验室中,进行微生物检验的方法主要是微生物分离法,即采集可疑样本或血液、痰液、粪便等,进行细菌培养、纯化,然后分离出其中的致病菌进行分别鉴定;而进行鉴定的方法比较多,比如血清学分型、噬菌体分型等,这些方法都可以鉴定出致病菌的类型,或者使用 PCR 技术还可以检测出致病菌的基因分型。大肠埃希菌作为人体正常的肠道菌群,有一定的致病性,特别是血浆凝固酶,致病水平较高。而致病性的该菌也有多种类型,带来的影响有一定区别,感染后表现出不一样的症状,比如产肠毒素性、肠道侵袭性、出血性等。大部
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