基本培养方法.pptx
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1、Your company sloganYour company slogan一、培养操作前注意一、培养操作前注意1.1.培养用物品的灭菌消毒(写出物品清单)。培养用物品的灭菌消毒(写出物品清单)。2.2.操作台消毒(各物品布局合理进行紫外线操作台消毒(各物品布局合理进行紫外线消毒消毒3030分钟)。分钟)。3.3.洗手和着装(原则上与外科手术相同)。洗手和着装(原则上与外科手术相同)。4.4.火焰消毒(酒精灯使用、金属器械、吸过火焰消毒(酒精灯使用、金属器械、吸过培养液的吸管)。培养液的吸管)。Your company sloganYour company slogan二、培养操作中注意:二、
2、培养操作中注意:动作准确敏捷有序;培养用液开口后应45度倾斜,不再重复使用的应立即封口;一个吸管只能吸一种液体;不能面向操作台讲话或咳嗽。Your company sloganYour company slogan基本的培养方法基本的培养方法悬滴培养方法悬滴培养方法:Your company sloganYour company slogan悬滴培养用的凹载玻片 单位:mmYour company sloganYour company slogan(一)(一)单盖玻片培养方法盖玻片培养方法Your company sloganYour company slogan左图;凹载玻片支架右图:单盖玻
3、片培养法操作图解 1、胚胎浸出液2、血浆3、心肌块 4、混合待凝固5、涂凡士林6、扣压7热溶石蜡密封 a为正确操作 b错误操作Your company sloganYour company slogan8 8、将密封好的凹玻片放到凹玻片、将密封好的凹玻片放到凹玻片支架上,放到培养箱内培养支架上,放到培养箱内培养9 9、培养、培养7-87-8个小时,组织块向外生个小时,组织块向外生长,培养长,培养2424小时在组织块外周形成小时在组织块外周形成生长晕(一圈薄而透明的细胞圈),生长晕(一圈薄而透明的细胞圈),4848小时候生长减慢甚至停止。需要小时候生长减慢甚至停止。需要重新加入鸡胚浸出液。重新加
4、入鸡胚浸出液。Your company sloganYour company slogan盖玻片法再培养 1、2、眼科刀切除生长晕 3 方型培养物切为两到四片 4、5培养物漂洗 6、7、再培养Your company sloganYour company slogan(二)双盖玻片悬滴培养法(二)双盖玻片悬滴培养法Your company sloganYour company slogan 双盖玻片图解:1、载体盖玻片 2、带培养物盖玻片 Your company sloganYour company slogan与单盖玻片不同之处:与单盖玻片不同之处:1 1、载体盖玻片加一滴消毒纯水贴到、载
5、体盖玻片加一滴消毒纯水贴到带有组织块的另一面。带有组织块的另一面。2 2、再培养时:直接取下带培养物的、再培养时:直接取下带培养物的盖玻片漂洗,换一张新的载体盖玻片盖玻片漂洗,换一张新的载体盖玻片,可减少污染。可减少污染。Your company sloganYour company slogan二、培二、培养瓶养瓶培培养养方法方法2020世纪世纪5050年代年代CarrelCarrel设计了卡氏瓶设计了卡氏瓶EarleEarle设计了设计了T-T-培养瓶培养瓶Your company sloganYour company slogan用血浆固定组织块的培养方法用血浆固定组织块的培养方法You
6、r company sloganYour company slogan 图:卡氏瓶培养组织块 1.消毒卡氏瓶 2.火焰略烧瓶口 3.取少量血浆加入瓶底 4.再加等量胚胎浸出液 5.接种组织块 7.上盖 8.消毒 9加入培养液 10.通气Your company sloganYour company slogan用透明纸固定组织块的培养方法用透明纸固定组织块的培养方法Your company sloganYour company slogan图:内放有孔透明纸的培养瓶培养 a.一个T培养瓶内放有有孔透明纸b.卡氏瓶接种后图解 1.有孔透明纸 2.组织块 3.培养液Your company slo
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