果蝇杂交试验.pptx

果蝇杂交实验果蝇杂交实验一、一、实验目的实验目的二、二、实验材料实验材料三、三、实验器具和药品实验器具和药品四、实验内容四、实验内容（一）（一）果蝇形态的观察果蝇形态的观察（二）（二）果蝇的饲养果蝇的饲养（三）（三）果蝇的杂交果蝇的杂交五、五、实验数据的统计及分析实验数据的统计及分析六、六、实验报告实验报告七、注意事项七、注意事项2024/8/8 周四4一、实验目的一、实验目的2024/8/8 周四5n学会杂交实验设计的方法学会杂交实验设计的方法理解遗传的三大定律理解遗传的三大定律学会运用统计学和遗传学的理论分学会运用统计学和遗传学的理论分析实验现象析实验现象初步学会论文的撰写方法初步学会论文的撰写方法2024/8/8 周四6二、实验材料二、实验材料 黑腹果蝇黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)品系品系 18、6、e#、2#2024/8/8 周四7 三、实验器具和药品三、实验器具和药品 显微镜、培养瓶、棉塞、量筒显微镜、培养瓶、棉塞、量筒 麦片、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等麦片、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等2024/8/8 周四8四、实验内容四、实验内容2024/8/8 周四9（一）果蝇的形态观察（一）果蝇的形态观察2024/8/8 周四101、果蝇雌雄的区别、果蝇雌雄的区别雄雄：腹部狭长，末端浑圆腹背有5条横纹，粗细不一致，末端23条横纹“连成一片”，呈现“黑屁股黑屁股”一样；前足附节端表面有黑色“性梳性梳”，在显微镜下呈黑梳子；雌雌：腹部宽大，末端突尖，腹背有7条横纹条横纹，色淡，粗细一致，前足附趾无性梳；雌蝇体内有一储精囊，一次受精，终身够用，所以杂交时必须选择处女蝇处女蝇2024/8/8 周四112、其他性状的观察、其他性状的观察 眼色：眼色：白眼与红眼白眼与红眼；翅形：翅形：长翅（正常翅）、短（小）翅、残翅；长翅（正常翅）、短（小）翅、残翅；体色：体色：黑檀体、灰身；黑檀体、灰身；刚毛：刚毛：直刚毛、焦刚毛；直刚毛、焦刚毛；果蝇几种品系的性状果蝇几种品系的性状品系 体色 眼色 翅形 雌 雄26e#182024/8/8 周四13 3、其他、其他 卵：卵：圆形，前端有两条触须突起，通常附在瓶壁上；幼虫：幼虫：蛆状，奶白色，前端尖，后端钝，头部收缩迅速；蛹：蛹：黄色2024/8/8 周四14（二）果蝇的饲养（二）果蝇的饲养2024/8/8 周四151、果蝇的生活史和生活习性、果蝇的生活史和生活习性成虫交成虫交配后配后1天天3.54.5天后，天后，羽化成虫羽化成虫产卵，卵，1天孵化天孵化为一一龄幼虫幼虫11.5天天后，成二后，成二龄虫虫1天后，天后，成三成三龄虫虫2.53.5天天后，成蛹后，成蛹2024/8/8 周四16 羽化后的成虫一般要经过至少羽化后的成虫一般要经过至少12小时小时才能交配，此时的成虫又称为才能交配，此时的成虫又称为处女蝇；处女蝇；温度越低，生活周期越长，温度越低，生活周期越长，25平均平均10101212天一个世代；但超过天一个世代；但超过30 30 易出现易出现变异；变异；生活习性：果蝇是以水果上的酵母为生活习性：果蝇是以水果上的酵母为食，所以实验室内凡能发酵的基质都可作食，所以实验室内凡能发酵的基质都可作为果蝇的饲料。为果蝇的饲料。2、培养基的配制（、培养基的配制（以以100ml量为例）量为例）70ml水 +0.85g琼脂 +7g蔗糖煮开至琼脂溶化煮开至琼脂溶化加入麦片糊（加入麦片糊（30ml冷水与冷水与8g麦片混匀）麦片混匀）煮开约煮开约3分钟分钟稍凉后加入稍凉后加入1g酵母粉，酵母粉，0.4-0.5ml丙酸，混匀丙酸，混匀分装分装,乘热塞上棉花塞。乘热塞上棉花塞。2024/8/8 周四19 3、果蝇的麻醉（示范）、果蝇的麻醉（示范）注意：不可在培养瓶内麻醉；如果进行形态观察可进行深度麻醉至死腹部向前弯；双翅向背后与胸部成45 如果进行杂交，一般成自然停飞状态为宜；4、转瓶（示范）、转瓶（示范）5、处死、处死 6、取处女蝇、取处女蝇 在培养瓶中出现第一个蛹后，除去所有的成虫，每隔9h观察一次，此时出现的雌蝇还未能进行交配，分离出来后即为处女蝇。2024/8/8 周四23（三）果蝇杂交的流程（三）果蝇杂交的流程2024/8/8 周四24以以 6 2 2#为正交为正交 取原种（纯种）取原种（纯种）656对对于一培养瓶于一培养瓶2#56对对于另一培养瓶于另一培养瓶每一培养瓶要贴标每一培养瓶要贴标签，注明（签，注明（杂交）杂交）品系，时间，班别，品系，时间，班别，姓名姓名78天后天后，出现第，出现第一个蛹时除去原种一个蛹时除去原种78天后天后，出现第，出现第一个蛹时除去原种一个蛹时除去原种每隔每隔9h取一取一次处女蝇，次处女蝇，共共67对于一对于一培养瓶中培养瓶中超过超过9h的雌蝇坚的雌蝇坚决不能用于杂交决不能用于杂交,若混有一只雄蝇，若混有一只雄蝇，所有雌蝇都无用所有雌蝇都无用！取取67对雄蝇对雄蝇于一培养瓶中于一培养瓶中若混有雌若混有雌蝇，除去蝇，除去后，雄蝇后，雄蝇仍可用仍可用6与与2 2#放放入一培养瓶内入一培养瓶内杂交杂交杂交之前，反复检查杂交之前，反复检查雌内是否混有雄蝇，雌内是否混有雄蝇，或雄蝇内是否混有雌或雄蝇内是否混有雌蝇！蝇！用同样方用同样方法做反交法做反交实验实验出现第一个蛹后，除去亲本，之后出现第一个蛹后，除去亲本，之后出现的成虫即为出现的成虫即为F1代；代；若想增加若想增加F1的数量，可将亲本进行的数量，可将亲本进行转瓶一次；转瓶一次；统计统计F1的的性状性状统计天数为统计天数为78天天列表统计列表统计F1的的性别、性别、体色、翅形、眼色体色、翅形、眼色及及是否有是否有异常异常，数量：，数量：250300只只取取F16-7对于一培养对于一培养瓶内做自交实验瓶内做自交实验为什么自交不为什么自交不需要处女蝇？需要处女蝇？78天后除去天后除去F1，或转一次瓶，或转一次瓶统计统计F2的性状的性状数量为数量为400只以上只以上F1自交可做自交可做2瓶瓶五、实验数据的统计及分析五、实验数据的统计及分析 将原始数据将原始数据(眼色、翅形、体色、性别）列表归纳统计；列表归纳统计；用统计学原理和遗传学原理对数据进用统计学原理和遗传学原理对数据进行分析、假设和判断；行分析、假设和判断；2（红眼、残翅）（红眼、残翅）6（白眼、小翅）（白眼、小翅）分析要点：显隐性的判断；常染色体遗传和性染色体遗传的判断；是否连锁的判断；若是连锁则要计算它们之间的交换率；若是非连锁则要计算它们之间的组合比例；分析时从一对性状 两对性状 三对性状；实验结果（模拟）实验结果（模拟）26（正交）（正交）2 6反交）反交）F1:红长红长82 红长红长 111 ：白小：白小98 红长红长 75F2:红长红长62：红长：红长52 ：红长：红长165：红长：红长38 红小红小57 红小红小55 红残红残47 红小红小37 红残红残37 红残红残50 红残红残24 白长白长35 白长白长53 白长白长32 白小白小49 白小白小48 白小白小36 白残白残37 白残白残31 白残白残28e（红眼黑檀体长翅红眼黑檀体长翅）6（白眼灰身小翅）白眼灰身小翅）分析要点：显隐性的判断；常染色体遗传和性染色体遗传的判断；是否连锁的判断；若是连锁则要计算它们之间的交换率；若是非连锁则要计算它们之间的组合比例；分析时从一对性状 两对性状 三对性状；实验结果（模拟）实验结果（模拟）e 6（正交）（正交）e 6(反交）反交）F1 红长灰红长灰：116 ：红长灰：红长灰108 ：112 ：白小灰：白小灰121F2 红长灰红长灰108 47 :红长灰红长灰70 ：74 红长黑红长黑 35 4 红长黑红长黑6 0 红小灰红小灰 0 26 红小灰红小灰18 6 红小黑红小黑 0 7 红小黑红小黑16 22 白长灰白长灰 0 18 白长灰白长灰13 14 白长黑白长黑 0 6 白长黑白长黑11 12 白小灰白小灰 0 57 白小灰白小灰83 85 白小黑白小黑 0 5 白小黑白小黑0 0七、实验报告七、实验报告封面：果蝇杂交实验封面：果蝇杂交实验实验人：实验人：实验时间：实验时间：实验地点：实验地点：前言：前言：主要讲述实验的原理和目的；主要讲述实验的原理和目的；1、实验材料及方法、实验材料及方法1.1、实验材料：、实验材料：品系及性状品系及性状1.2、实验用品、实验用品1.3、培养基的配置、培养基的配置1.4、实验流程、实验流程2、实验结果及分析、实验结果及分析2.1、一对性状的结果及分析、一对性状的结果及分析2.2、两对性状的结果及分析、两对性状的结果及分析2.3、三对性状的结果及分析、三对性状的结果及分析3、结论与讨论、结论与讨论 4、体会与建议、体会与建议七、注意事项：七、注意事项：准备记录本做好每日的工作记录；检查实验流程之后方可开始实验；实验之前做好所有的准备工作；培养基按比例用多少配多少，不能浪费；取处女蝇时，出现幼虫后天天观察是否有蛹出现；你是否明白以下问题：1、取原种放入新的培养瓶中继续培养的目的、取原种放入新的培养瓶中继续培养的目的 是什么？是什么？2、什么时候除去原种？、什么时候除去原种？3、怎样保证所取的雌蝇为处女蝇？、怎样保证所取的雌蝇为处女蝇？4、怎样进行正交和反交？、怎样进行正交和反交？5、怎样扩充子代数量？、怎样扩充子代数量？