沙棘叶水煎剂对饮食诱导高脂血症小鼠的降脂作用.pdf
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1、目的 探究沙棘叶水煎剂对饮食诱导高脂血症小鼠的降血脂作用,并探究其可能的作用机制。方法 小鼠随机分为 6 组,空白对照组、高脂模型组、沙棘叶水煎剂低、中、高(0.5 g/mL、1 g/mL、2 g/mL)剂量组、阳性对照组(辛伐他汀 5 mg/kg),8 只/组。适应性饲养 3d 后,连续灌胃 2 周高脂乳剂建立小鼠高脂模型,再分别灌胃给药 4 周后,取小鼠血清测定血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C、SOD、MDA、AST、ALT 水平,取小鼠肝脏进行大体形态和病理学变化的观察,分别于起始、建模 2 周后、给药 2 周、4 周后测定小鼠体重。结果 沙棘叶水煎剂中、高剂量组的血清血脂水平及
2、肝转移酶水平较高脂模型组明显下降(P0.05),其中沙棘叶水煎剂高剂量组降 ALT、AST 的作用显著优于阳性对照组(P0.05)。小鼠肝脏的肿胀程度减轻,HE 染色下肝细胞中脂肪空泡明显减少。结论 沙棘叶水煎剂能够改善高脂血症模型小鼠的血脂水平、抗氧化水平及肝功能,具有一定降血脂、抗氧化、保肝作用,且沙棘叶水煎剂较辛伐他汀有更好的保肝作用。关键词:关键词:沙棘叶水煎剂;高脂血症;降血脂;抗氧化;保肝 中图分类号:中图分类号:R286 沙棘是富含多种对人体有益的生物活性物质的药食同源类植物,中医学上常用,具有抗氧化、保肝、抗心血管疾病、增强免疫力等药理作用1。黄酮是沙棘叶的主要功效物质,有极强
3、的抗氧化活性,能较好调节脂质代谢;多酚类化合物有抗氧化、清除自由基、降血脂的药理作用2。沙棘叶还具有保肝作用,能降低血清中肝转移酶的活性,缓解肝脏损伤,改善肝脏的超微结构3。本实验通过建立高脂小鼠模型,以辛伐他汀为阳性对照药,研究沙棘叶水煎剂对高脂小鼠的体重、血脂、抗氧化能力、保肝作用的影响,探讨沙棘叶水煎剂降血脂可能的作用机制,以期为沙棘叶水煎剂治疗高脂血症的临床应用提供实验依据。1 材料与方法 1.1 材料与试剂 SPF 级昆明小鼠,体重 1822g,雄性,48 只,购置于延边大学实验动物中心;沙棘叶购置于甘肃定西七叶草中草药;辛伐他汀购置于厦门福满药业有限公司;总胆固醇(TC)、甘油三酯
4、(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒均购置于南京建成生物科技有限公司。1.2 实验方法 1.2.1 沙棘叶水煎剂制备 沙棘叶浸泡于 10 倍体积的水中 30min,煎煮 60min,收集水煎液,二次煎煮 60min,过滤弃滤渣,合并两次水煎液,均等分为 3 份,分别浓缩至含药量 0.5 g/mL、1 g/mL、2 g/mL 的低、中、高剂量沙棘叶水煎剂,4冷藏。1.2.2 高脂乳剂配制方法 取 30g 猪油于 250mL 烧杯中,水浴加热融化,加入
5、 12 g 胆固醇、2 g 胆酸钠、1.5 g 丙硫氧嘧啶,充分搅拌至其完全溶解。再加入 20 mL 丙二醇、30 mL蒸馏水、10 mL 吐温-80,充分搅拌至产生乳化现象。冷却至室温后倒入 200 mL 容量瓶定容,4冷藏。1.2.3 实验分组 小鼠适应性饲养 3 天后,根据体重随机分为空白对照组、高脂模型组、沙棘叶水煎剂低、中、高剂量组、阳性对照组,每组 8 只。1.2.4 高脂血症模型建立及给药 除对照组外各组小鼠建模期间每日灌胃 10 mL/kg的高脂乳剂,空白对照组小鼠灌胃等体积生理盐水,灌胃 2 周后根据空白对照组和其余 5 组小鼠体重变化的差异是否有统计学意义判断建模成功与否。
6、建模成中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生-123-功后,沙棘叶水煎剂低、中、高剂量组分别灌胃 10 mL/kg 相应浓度的沙棘叶水煎剂,阳性对照组灌胃 5 mg/kg 辛伐他汀,空白对照组和高脂模型组灌胃等体积生理盐水,连续给药 4 周,期间小鼠自由摄食与饮水。1.2.5 小鼠体重 分别于起始、建模 2 周、给药 2 周、给药 4 周后测量小鼠的体重。1.2.6 血清生化指标 给药结束后小鼠禁食不禁水 12 h,麻醉后取眼眶静脉血 12mL,静置 30min,4000 r/min 离心 15 min,得到上层血清。按照试剂盒说明操作,计算出血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C、MDA、S
7、OD、AST、ALT 浓度,记录数据。1.2.7 肝脏组织大体形态、HE 染色 小鼠眼眶取血后颈椎脱臼处死,取肝脏组织观察外观、颜色与质地的变化。再 4%多聚甲醛固定,经脱水、包埋、4 m 切片、脱蜡、HE 染色试剂盒染色,光学显微镜下观察肝组织的病理学变化。2 结果与分析 2.1 沙棘叶水煎剂对高脂血症小鼠体重的影响 建模 2 周后,与空白对照组相比,其余 5 组体重均显著增加(P0.01),提示高脂血症模型建立成功。与高脂血症模型组相比,给药 4 周后,沙棘叶水煎剂中、高剂量组和阳性对照组体重均显著下降(P0.05或 P0.01);而给药 2 周后,低、中剂量组体重下降不明显(P0.05)
8、。提示,辛伐他汀改善高脂血症小鼠肥胖程度见效更快,沙棘叶水煎剂见效时间较长,长期服用也有明显改善高脂血症小鼠肥胖的作用。2.2 沙棘叶水煎剂对小鼠血脂水平的影响 灌胃给药 4 周后,与高脂血症模型组相比:(1)沙棘叶水煎剂中、高剂量组及阳性对照组的小鼠血清TC、LDL-C 水平显著降低(P0.05 或 P0.01);(2)沙棘叶水煎剂各剂量组及阳性对照组的小鼠血清TG水平显著降低(P0.01);(3)给予高剂量沙棘叶水煎剂和辛伐他汀的小鼠,其血清 HDL-C 水平显著提高(P0.05)(表 1)。提示沙棘叶水煎剂有改善小鼠脂质代谢的作用。2.3 沙棘叶水煎剂对小鼠抗氧化指标的影响 灌胃给药 4
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