探讨高危型HPV感染对宫颈阴道微生态菌群及miR-222、miR-18a表达的影响.pdf
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1、中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生 收稿日期:2023 年 12 月 21 日 作者简介:李雯琪(1998),女,汉族,陕西西安人,本科,研究方向为妇产。-1-探讨高危型 HPV 感染对宫颈阴道微生态菌群及 miR-222、miR-18a 表达的影响 李雯琪 沈阳医学院,辽宁 沈阳 110000 摘要:摘要:目的 探讨高危型 HPV 感染对宫颈阴道微生态菌群及 miR-222,miR-18a 表达的影响。方法 在 2021 年 12 月到 2022 年 12 月期间,随机选取 1000 例在我院接受宫颈筛查的妇女,均检查 HPV。以是否感染为标准,将所有研究对象分为为 HR-HPV 阴性组(
2、n=892)和 HR-HPV 阳性组(n=108)。应用 PCR 检测法对宫颈和阴道脱落细胞进行检测,了解其 HR-HPV 感染情况;应用 DNA 探针技术对阴道分泌物中的加德纳细菌(BV)、霉菌(VVC)和滴虫(TV)进行检测,了解其 HR-HPV 感染情况;应用阴道微生态检测仪对过氧化氢、唾液酸苷酶、白细胞酯酶进行检测;应用实时定量荧光 PCR 对 miR-222、miR-18a 表达进行检测;应用 Spearman 法对阴道微生态和 miR-222、miR-18a的相关性进行分析。结果 1000 名接受筛查的妇女中,108 例 HR-HPV 阳性,HPV16 检出人数最多,为 61 例,
3、占比56.48%;在 HR-HPV 阳性组中,研究对象菌群多样性、BV 阳性率、过氧化氢阳性率为 33.33%(36 例)、30.56%(33例)、95.37%(103 例),阳性组各项数据高于阴性组,P0.05。在 HR-HPV 阳性组中,miR-222 和 miR-18a 的表达量分别为 2.740.45、3.120.51。在 HR-HPV 阴性组中,miR-222 和 miR-18a 的表达量分别为 0.550.09、0.810.14。两组差异具有统计学意义,P0.05;BV 阳性率、过氧化氢阳性率与 miR-222 和 miR-18a 均表现出正相关,P0.05。结论 患者感染 HR-
4、HPV后,其机体微生态环境会变得紊乱,miR-222 和 miR-18a 表达量升高,BV 阳性率、过氧化氢阳性率 miR-222 和miR-18a 均是危险因素。关键词:关键词:高危型 HPV 感染;宫颈阴道;微生态菌群;miR-222;miR-18a 表达 中图分类号:中图分类号:R71 宫颈癌是一种发生在女性宫颈部位的恶性肿瘤。宫颈是连接子宫和阴道的部分,宫颈癌通常起源于宫颈上皮细胞的异常增生,逐渐发展为恶性肿瘤1。宫颈癌通常与人乳头瘤病毒(HPV)感染有关,特别是高危型 HPV 感染(如 HPV16 和 HPV18)。这种病毒通过性接触传播,感染后可引起宫颈细胞的异常变化,最终导致癌变
5、。定期进行宫颈癌筛查,如宫颈细胞学检查(Pap涂片)和 HPV 检测,可以帮助早期发现宫颈癌或前癌变病变。目前的研究表明,HR-HPV 感染和宫颈阴道微生态菌群的失衡可能存在一定的关联。微生态菌群是指生活在人体内的微生物群落,包括细菌、真菌和病毒等。宫颈阴道微生态菌群的平衡对于维持女性生殖道的健康非常重要。另外,高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染与 miR-222 和 miR-18a 的表达之间存在一定的关系。研究表明,HR-HPV 感染可以导致miR-222 的上调。miR-222 是一种微小 RNA,它参与了多种生物学过程的调控,包括细胞增殖、凋亡和侵袭等。miR-222 的上调与肿瘤
6、的发生和发展密切相关,因为它可以抑制抗肿瘤基因的表达,促进肿瘤细胞的增殖和侵袭。HR-HPV 感染也可以影响 miR-18a 的表达。综上,本文主要探讨高危型 HPV 感染对宫颈阴道微生态菌群及 miR-222,miR-18a 表达的影响。研究结果如下。1 资料与方法 1.1 一般资料 在 2021 年 12 月到 2022 年 12 月期间,随机选取1000 例在我院接受宫颈筛查的妇女,均检查 HPV。以是否感染为标准,将所有研究对象分为为 HR-HPV 阴性组(n=892)和 HR-HPV 阳性组(n=108)。所有研究对象均处于 18-65 岁之间,并签署知情同意书。排除近期使用过阴道炎
7、相关药物、存在严重疾病、进行免疫治疗的人。中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生-2-1.2 方法 应用PCR检测法对宫颈和阴道脱落细胞进行检测。使用专用的采样刷或刮片,从宫颈和阴道表面采集脱落细胞样本。通常在妇科检查中进行采集,也可以由医生或护士指导患者自行采集。将采集到的脱落细胞样本放入适当的容器中,加入保存液或缓冲液,以保持细胞的完整性和稳定性。样本处理的具体方法可能因实验室的要求而有所不同。使用 DNA 提取试剂盒等方法,从脱落细胞样本中提取 DNA。提取过程旨在分离和纯化细胞中的 DNA 分子,以便进行后续的 PCR分析。根据需要检测的目标基因或序列,设计合适的引物(primers)和
8、探针(probes)。引物和探针是PCR 反应中用于扩增和检测目标 DNA 序列的特定序列。将提取的 DNA 加入 PCR 反应体系中,包括引物、探针、酶和缓冲液等。通过一系列的温度循环,包括变性、退火和延伸步骤,使目标 DNA 序列得以扩增。利用凝胶电泳、荧光探针或其他方法,对 PCR 扩增产物进行分析和检测。可以根据 PCR 产物的大小、荧光信号或其他特征来确定目标基因或序列的存在与否。根据PCR分析的结果,判断目标基因或序列的有无、数量或变异情况。结合临床资料和其他检测结果,进行综合判断和诊断。应用 DNA 探针技术对阴道分泌物中的加德纳细菌(BV)、霉菌(VVC)和滴虫(TV)进行检测
9、。使用专用的采样刷或刮片,从阴道分泌物中采集样本。通常在妇科检查中进行采集,也可以由医生或护士指导患者自行采集。将采集到的阴道分泌物样本放入适当的容器中,加入保存液或缓冲液,以保持样本的完整性和稳定性。样本处理的具体方法可能因实验室的要求而有所不同。使用 DNA 提取试剂盒等方法,从样本中提取 DNA。提取过程旨在分离和纯化样本中的DNA 分子,以便进行后续的 PCR 分析。根据需要检测的目标细菌或真菌,设计合适的引物(primers)和探针(probes)。引物和探针是 PCR 反应中用于扩增和检测目标 DNA 序列的特异性分子。将提取到的 DNA 样本与 PCR 反应体系中的引物和探针一起
10、进行 PCR 扩增。PCR 反应会在特定的温度条件下,使目标 DNA 序列得以扩增。使用特定的 DNA 探针技术,如荧光探针技术或其他标记技术,对 PCR 扩增产物进行检测。这些探针会与目标 DNA 序列特异性结合,并产生荧光信号或其他标记信号。通过检测荧光信号或其他标记信号,判断样本中是否存在目标细菌或真菌。根据信号的强度和特征,可以确定是否阳性或阴性。应用阴道微生态检测仪对过氧化氢、唾液酸苷酶和白细胞酯酶进行检测收集阴道分泌物样本。可以使用专门的采样器具,如阴道拭子或吸管,将阴道分泌物采集到样本容器中。将采集到的阴道分泌物样本放入阴道微生态检测仪中进行处理。根据具体的检测仪器,可能需要将样
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