免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值.pdf
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1、中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生 收稿日期:2023 年 12 月 21 日 作者简介:赵小莉(1988),女,汉族,学历本科,江苏省苏州市张家港第一人民医院,初级职称,研究方向病理技术方向。-141-免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值 赵小莉 江苏省苏州市张家港市第一人民医院,江苏 苏州 215600 摘要:摘要:目的 探讨免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值。方法 选取采集的标本 70 例,时间 2020 年 1月2023 年 2 月,所分对照组(35 例)传统方法制作,观察组(35 例)免疫组化技术,对比效果。结果 观察组病理组织切片的制作优良率、检测的确诊率,相比对照
2、组有统计学意义(P0.05)。1.2 方法 1.2.1 对照组 对照组使用常规方法制备病理学组织切片。对标本须在离体后的 30min 内进行处理,将要检查的组织样本放入固定液或低温盒中,在中性缓冲甲醛溶液中,使用 10%浓度固定样品,固定时间控制在 824h 之间。对于固定后的样本,利用热量作用的理论,实施抗原修复。该方法能对抗原进行有效的引导。在进行修复的过程中,需要注意温度、修复液的 pH 值和修复时间等因素,分别控制在 100以上,7.58.5 范围内,315min 内。抗原修复完成之后,需要严格按着操作要求,常规制作标本病理组织切片,脱蜡时间需要合理的控制,一定要确保充足,且在进行各类
3、试剂的使用当中,需要合理控制添加的剂量,在使用方面,各类试剂应比组织切片面积多出 0.050.35 cm,从而可对边缘效应进行规避。1.2.2 观察组 观察组采用免疫组化技术。首先,对脱蜡片进行正常的处理。将组织样本放置在浓度为 3%的过氧化氢中,常温浸泡 20min,然后用磷酸盐缓冲液清洗,每次进行 5min 的清洗,总共清洗 3 次。接下来,在烧杯(1000mL)中加入 700ml 柠檬酸缓冲液,加热至煮沸。随后,将切片标有人表皮生长因子受体 2、Ki-6、P16等的标签,继续升温处理溶液,15min 后向各切片加入一抗滴,并置于雪柜中过夜孵育。最后,用磷酸缓冲剂清洗切片,需要实施三次,每
4、次冲洗 5min;二抗的使用,需要在室温条件下进行,将其滴加在组织切片上,实施孵育,控制时长在 15min,随后需要继续对组 中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生-142-表 1 比较两组病理组织切片的制作质量n(%)组别 例数 优质片 良质片 差质片 制片优良率 对照组 35 13(37.14)15(42.86)7(20.00)28(80.00)观察组 35 20(57.14)14(40.00)1(2.86)34(97.14)x2 5.081 P 0.024 表 2 比较两组制片的确诊率n(%)组别 例数 未确诊 未确诊率 确诊 确诊率 对照组 35 10 28.57 25 71.43 观察
5、组 35 2 5.71 33 94.29 x2 6.437 P 0.011 织切片进行三次冲洗,使用的冲洗液、每次冲洗的时间均与之前相同;组织切片接下来需要进行显色处理,将其放置在显色剂内,显色操作时间为 510 min,之后需要利用苏木精,对组织切片进行染色、水洗操作,完成后,需对组织切片进行封固,这一操作需借助脱水透明中型树胶进行处理。1.3 指标观察(1)对两种制片效果进行评价,病理组织切片经显微镜进行观察,主要分为三个等级,其中优质片(清晰显示,组织结构完整,色彩较鲜亮,薄厚适中,没有裂痕损害,优质清楚的细胞形态,便于获取信息),良质片(显示较清晰,组织结构没有损坏,在其中分布较少褶皱
6、,没有污染,未检出活气泡,色彩呈较鲜亮,无非特异性脱片,易观察组),差质片(编号欠清晰,颜色欠鲜明,存在组织结构损害,有较多气泡、褶皱,难以显著获取信息)。(2)对两组制片的确诊情况进行统计。1.4 统计学分析 经 SPSS 21.0 处理数据。2 结果 2.1 对比两组制片效果 观察组的病理组织切片的制片效果更优(P0.05),见表 1。2.2 对比两组病理组织切片的确诊情况 观察组的确诊率更高(P0.05),见表 2。3 讨论 近年来,免疫组织化学技术在临床病理学检查中得以广泛应用,这得益于新抗体的不断涌现。该技术在判断肿瘤性质、分期、细胞属性、转移瘤起始位置以及“未分化”恶性肿块方面具有
7、重要意义3。免疫组化病理技术是一种常见的检查手段,它通过酶和底物的作用,促进着色反应物的形成,定位组织或细胞内的抗原,具有高精度的定位能力4,并且样本具备长时间保存条件,操作步骤相对简单。在筛选过程中,确保易于检测并能通过光学或电子显微镜进行观察是必要的。为了实现有效的定位条件,酶的反应物需要具备强大的分散能力5。在病理学检测过程中,如果组织脱水或样本固定时间不符合标准,很容易对样品的含量产生干扰,导致切片质量下降,从而增加临床诊断的困难。然而,在免疫组化研究中,由于具有特定的染色环境和酶多聚体与两种抗体高效偶联的能力,为多肽的合成提供了良好的条件6。此外,单抗还能有效提高核酸检测的灵敏度,并
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