生物化学常用检验项目及质量控制省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx
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1、1 1 生物化学惯用检验项目生物化学惯用检验项目及质量控制及质量控制 昌大一附院检验科昌大一附院检验科 郑晓丰第第1页页2 2主要内容:主要内容:一、惯用生化检验项目标一、惯用生化检验项目标 原理及临床意义原理及临床意义二、生化检验质量控制二、生化检验质量控制第第2页页3 3 一、惯用生化检验项目一、惯用生化检验项目 及其临床意义及其临床意义第第3页页4 4 惯用项目惯用项目 肝功效类肝功效类 丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶 总胆红素总胆红素 总蛋白总蛋白 白蛋白白蛋白第第4页页5 5肾功效类肾功效类 肌酐肌酐 尿素氮尿素氮 心肌酶类心肌酶类 肌酸激酶肌酸激酶 第第5页页6 6血脂类血脂类
2、总胆固醇总胆固醇 甘油三酯甘油三酯 其它其它 葡萄糖葡萄糖 淀粉酶淀粉酶 第第6页页7 7各项目检验方法各项目检验方法第第7页页8 8丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶 ALT 底物L-丙氨酸与a-酮戊二酸在ALT作用下生成丙酮酸,生成丙酮酸在乳酸脱氢酶作用下转化成L-乳酸,同时伴伴随NADH氧化,引发在波长340nm处吸光度下降,下降速率与血清中ALT活力成正比 第第8页页9 9总胆红素总胆红素TBil 改良改良J-G法(仪器和手工)法(仪器和手工)重氮反应,重氮反应,600nm比色。比色。钒酸盐氧化法(仪器)钒酸盐氧化法(仪器)总胆红素在表面活性剂总胆红素在表面活性剂TritonX-100存
3、在下,被钒酸盐氧化,生成胆绿素,存在下,被钒酸盐氧化,生成胆绿素,测定测定450nm处吸光度降低与总胆红素处吸光度降低与总胆红素浓度成正比。浓度成正比。第第9页页1010总蛋白总蛋白TP 双缩脲法(仪器和手工)双缩脲法(仪器和手工)蛋白质分子中有许多肽健蛋白质分子中有许多肽健(-CONH-),在碱性条件下,蛋白质多肽链中肽键在碱性条件下,蛋白质多肽链中肽键与铜离子作用形成紫红色络合物,在与铜离子作用形成紫红色络合物,在540nm波长有特定吸收峰,所产生颜波长有特定吸收峰,所产生颜色强度与蛋白质含量成正比。与经过色强度与蛋白质含量成正比。与经过一样处理总蛋白校准品进行比较,即一样处理总蛋白校准品
4、进行比较,即可计算出样品中总蛋白含量。可计算出样品中总蛋白含量。第第10页页1111白蛋白白蛋白ALB 溴甲酚绿法(仪器和手工)溴甲酚绿法(仪器和手工)在在pH 4.2缓冲液中,白蛋白作为一个缓冲液中,白蛋白作为一个阳离子,结合阴离子染料溴甲酚绿阳离子,结合阴离子染料溴甲酚绿(BCG)形成蓝绿色复合物,在波长形成蓝绿色复合物,在波长630nm处有吸收峰。其吸光度与白蛋白处有吸收峰。其吸光度与白蛋白浓度成正百分比,与一样处理白蛋白校浓度成正百分比,与一样处理白蛋白校准液比较,即可计算出样品中白蛋白含准液比较,即可计算出样品中白蛋白含量。量。第第11页页1212肌酐肌酐Cr 碱性苦味酸法(仪器)碱
5、性苦味酸法(仪器)Jaffe反应反应 尿、血清中肌酐在碱性条件下与尿、血清中肌酐在碱性条件下与苦味酸盐作用,生成黄红色苦味酸苦味酸盐作用,生成黄红色苦味酸肌酐复合物,颜色深浅与肌酐浓度肌酐复合物,颜色深浅与肌酐浓度成正比。成正比。第第12页页1313尿素氮尿素氮BUN 酶偶联速率法(仪器)酶偶联速率法(仪器)尿素在尿素酶催化下,水解生成氨和二氧尿素在尿素酶催化下,水解生成氨和二氧化碳,氨在化碳,氨在-酮戊二酸和还原型辅酶酮戊二酸和还原型辅酶I存在存在下,经谷氨酸脱氢酶下,经谷氨酸脱氢酶(GLDH)催化生成谷氨催化生成谷氨酸。同时,还原型辅酶酸。同时,还原型辅酶I被氧化成氧化型辅被氧化成氧化型辅
6、酶酶I。还原型辅酶。还原型辅酶I在在340nm波优点有吸收峰,波优点有吸收峰,其吸光度下降速率与待测样品中尿素含量成其吸光度下降速率与待测样品中尿素含量成正比。正比。第第13页页1414总胆固醇总胆固醇TC 酶法酶法(仪器和手工)(仪器和手工)血清中胆固醇酯被胆固醇酯酶血清中胆固醇酯被胆固醇酯酶(CE)水解成水解成游离胆固醇,后者被胆固醇氧化酶游离胆固醇,后者被胆固醇氧化酶(COD)氧化成氧化成4-胆甾胆甾-3-烯酮并产生过氧化氢,烯酮并产生过氧化氢,再经过氧化物酶再经过氧化物酶(POD)催化催化4氨基安替比氨基安替比林林(4-AAP)与酚与酚(三者合称三者合称PAP),生成红色醌生成红色醌亚
7、胺亚胺(Trinders反应反应)。在。在505nm比色测定,比色测定,其吸光度与样品中总胆固醇其吸光度与样品中总胆固醇(TC)含量成正含量成正比。与经过一样处理校准品进行比较,即比。与经过一样处理校准品进行比较,即可计算出样品中总胆固醇含量。可计算出样品中总胆固醇含量。第第14页页1515甘油三酯甘油三酯TG 酶法(仪器和手工)(仪器和手工)脂蛋白脂肪酶脂蛋白脂肪酶 中性脂肪中性脂肪+H2O+H2O 甘油甘油+脂肪酸脂肪酸 甘油激酶甘油激酶脂肪酸脂肪酸+ATP+ATP 甘油甘油-3-3-磷酸磷酸+ADP+ADP 甘油甘油-3-3-磷酸氧化酶磷酸氧化酶甘油甘油-3-3-磷酸磷酸+O2 +O2
8、二羟丙酮磷酸二羟丙酮磷酸+H2O2+H2O2 过氧化物酶过氧化物酶2H2O2+4-AA+EMSE+H3+O 2H2O2+4-AA+EMSE+H3+O 红紫色苯醌红紫色苯醌色素色素+5 H2O+5 H2O第第15页页1616肌酸激酶 CK CK催化磷酸肌酸与二磷酸腺苷(ADP)反应产生三磷酸腺苷(ATP)与肌酸;偶联己糖激酶(HK)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)催化反应。HK催化葡萄糖与ATP反应,形成葡萄糖-6-磷酸,G6PDH催化葡萄糖-6-磷酸氧化,形成6-磷酸葡萄糖内酯及NADPH。NADPH生成速率代表CK活力。第第16页页1717葡萄糖葡萄糖GLU 葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶
9、法葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,在色原性萄糖酸,并产生过氧化氢,在色原性氧受体氧受体4-氨基安替比林偶联酚存在下氨基安替比林偶联酚存在下过氧化物酶催化过氧化氢,氧化色过氧化物酶催化过氧化氢,氧化色素原,生成红色醌类化台物。其颜色素原,生成红色醌类化台物。其颜色深浅与葡萄糖浓度成正比。与经过一深浅与葡萄糖浓度成正比。与经过一样处理葡萄糖校准品进行比较,即可样处理葡萄糖校准品进行比较,即可计算出样品中葡萄糖含量。计算出样品中葡萄糖含量。第第17页页1818淀粉酶淀粉酶 -淀粉酶将底物淀粉酶将底物4,6-亚乙基亚乙基-D-麦芽七糖麦芽七糖-(
10、EPS-G7)水解为各种)水解为各种片段。这些片段又被试剂中片段。这些片段又被试剂中-葡萄葡萄糖苷酶深入水解,生成葡萄糖和对糖苷酶深入水解,生成葡萄糖和对硝基酚。吸光度上升速率与硝基酚。吸光度上升速率与-淀粉淀粉酶活力成正比。酶活力成正比。第第18页页1919各项目临床意义各项目临床意义第第19页页2020丙氨酸氨基转移酶 ALT正常参考值 0-40U/L临床意义 增高:常见于急慢性肝炎,药品性、酒精肝损伤药品性、酒精肝损伤,脂肪肝,肝硬化,胆道疾病等。第第20页页2121 总胆红素 TBIL正常参考值 4.00-17.39umol/L临床意义 增高:原发生胆汁性肝硬化、急性黄疸型肝炎,慢性活
11、动期肝炎,病毒性肝炎。肝硬化,溶血性黄疸,新生儿黄疸新生儿黄疸,胆石症等。第第21页页2222总蛋白总蛋白 TP正常参考值正常参考值 55.00-85.00g/L临床意义临床意义 增高:常见于高度脱水症(如腹泻、增高:常见于高度脱水症(如腹泻、沤吐,休克,高热)及多发性骨髓瘤。沤吐,休克,高热)及多发性骨髓瘤。降低:常见于恶性肿瘤,重症结核,降低:常见于恶性肿瘤,重症结核,营养及吸收障碍,肝硬化,肾病综合营养及吸收障碍,肝硬化,肾病综合症,烧伤,失血。症,烧伤,失血。第第22页页白蛋白白蛋白 ALB正常参考值正常参考值 35.00-55.00g/L临床意义:临床意义:增高:常见于严重失水而造成
12、血浆浓缩,增高:常见于严重失水而造成血浆浓缩,使白蛋白浓度上升。使白蛋白浓度上升。降低:基本与总蛋白相同,尤其是肝脏,降低:基本与总蛋白相同,尤其是肝脏,肾脏疾病更为显著,肾脏疾病更为显著,见于慢性肝炎、肝硬见于慢性肝炎、肝硬化、肝癌、肾炎等。如白蛋白化、肝癌、肾炎等。如白蛋白30g/L,则预后则预后较差。较差。2323第第23页页2424肌酸激酶肌酸激酶 CK正常参考值正常参考值 30-170U/L临床意义临床意义 增高:心梗增高:心梗4-6小时开始升高,小时开始升高,18-36小时小时可达正常值可达正常值20-30倍,为最高峰,倍,为最高峰,2-4天恢天恢复正常,另外,病毒性心肌炎,皮肌炎
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