人教版教学8动物细胞融合与单克隆抗体省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx
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1、第1页蛇身蛇身马首马首鹿角鹿角兽脚兽脚鬣尾鬣尾鹰爪鹰爪鱼鳞鱼鳞虎须虎须。第2页 受精卵受精卵来自精子来自卵细胞第3页一、动物细胞融合1 1、动物细胞融合过程、动物细胞融合过程第4页不一样不一样DNADNA两个细胞两个细胞AB第5页思索题1 1、植物体细胞杂交中诱导原生质体、植物体细胞杂交中诱导原生质体 融合惯用方法有哪些?融合惯用方法有哪些?离心、振动和电激等物理方法;离心、振动和电激等物理方法;PEGPEG等化学方法等化学方法2 2、动物细胞融合能利用上述两类方、动物细胞融合能利用上述两类方 法吗?还有其它方法吗法吗?还有其它方法吗?能能 能够利用灭活病毒进行诱导能够利用灭活病毒进行诱导第6
2、页灭活病毒诱导细胞融合原理灭活病毒诱导细胞融合原理第7页用灭活病毒诱导动物细胞融合过程用灭活病毒诱导动物细胞融合过程细胞核细胞核病毒颗粒病毒颗粒细胞核细胞核灭活丧失感染性灭活丧失感染性保留融合活性保留融合活性 为何细胞融合过程中为何细胞融合过程中为何细胞融合过程中为何细胞融合过程中使用病毒需要使用病毒需要使用病毒需要使用病毒需要灭活灭活灭活灭活?第8页不一样不一样DNADNA两个细胞两个细胞灭活病毒诱导细胞融合灭活病毒诱导细胞融合融合后细胞进融合后细胞进行有丝分裂行有丝分裂AB第9页3 3、植物体细胞杂交过程应先进行原、植物体细胞杂交过程应先进行原 生质体融合再进行组织培养形成生质体融合再进行
3、组织培养形成 完整个体,动物细胞融合后能完整个体,动物细胞融合后能 形成杂种动物个体吗?形成杂种动物个体吗?4 4、你能归纳出什么叫做动物细胞、你能归纳出什么叫做动物细胞 融合吗?融合吗?不能不能思索题思索题第10页2 2、动物细胞融合概念、动物细胞融合概念 动物细胞融合也称细胞杂交,动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞(单核杂交细胞)过程。一个细胞(单核杂交细胞)过程。第11页4 4、动物细胞融合应用、动物细胞融合应用生物新品种培育生物新品种培育细胞遗传细胞遗传 细胞免疫细胞免疫 肿瘤肿瘤 利用动物细胞融合技术诱导形成杂利用动物细胞融
4、合技术诱导形成杂交瘤细胞,制备单克隆抗体交瘤细胞,制备单克隆抗体3 3、动物细胞融合意义、动物细胞融合意义 突破了有性杂交方法局限,使远缘突破了有性杂交方法局限,使远缘杂交成为可能。杂交成为可能。假如你掌握了动物细胞融合技术,你想用假如你掌握了动物细胞融合技术,你想用它来处理什么问题?它来处理什么问题?第12页 植物体细胞杂交和动物植物体细胞杂交和动物细胞融合在原理、细胞融合细胞融合在原理、细胞融合方法、诱导方法等方面有什方法、诱导方法等方面有什么差异呢?么差异呢?小结:小结:第13页主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体取得杂种植株取得杂种植株用途用途物理、化学方法物理、化学方法(同左
5、)(同左)灭活病毒灭活病毒物理(离心、振物理(离心、振动、电刺激)动、电刺激)化学(聚乙二醇)化学(聚乙二醇)诱导方法诱导方法使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合去除细胞壁后诱去除细胞壁后诱导原生质体融合导原生质体融合细胞融合方法细胞融合方法细胞膜流动性细胞膜流动性细胞膜流动性、细胞膜流动性、植物细胞全能性植物细胞全能性原理原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目比较项目植物、动物细胞融合比较植物、动物细胞融合比较第15页1.抗体是由何种细胞产生?抗体是由何种细胞产生?提提问问?二、单克隆抗体二、单克隆抗体2.2.利用已学知识,考虑怎样利用已学知识,考虑怎样
6、 得到抗体?得到抗体?抗体抗体抗原抗原刺激刺激浆细胞浆细胞经过免疫经过免疫B淋巴细胞(浆细胞)淋巴细胞(浆细胞)动物体内动物体内第16页抗体传统生产方法抗体传统生产方法从从血血清清中中分分离离抗抗体体各各种种浆浆细细胞胞动动物物体体内内各各种种抗抗体体抗抗原原 第17页 抗原抗原 动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯不能增殖产生大量抗体不能增殖产生大量抗体二、单克隆抗体二、单克隆抗体产量低、纯度低,抗体特异性差产量低、纯度低,抗体特异性差3.此方法得到抗体缺点是什么?此方法得到抗体缺点是什么?该法制备抗体特点:该法制备抗体特点:第18页1 1、怎样确保
7、抗体纯度?、怎样确保抗体纯度?怎样取得化学性质单一、特异性强高产抗体?怎样取得化学性质单一、特异性强高产抗体?(一)、单克隆抗体制备设计方案:设计方案:小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖2 2、怎样提升抗体产量?、怎样提升抗体产量?一个一个B B淋巴细胞只分泌一个特异性抗体淋巴细胞只分泌一个特异性抗体第19页杂种细胞杂种细胞小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖一个一个B B淋巴细胞只分泌一个特异性抗体淋巴细胞只分泌一个特异性抗体第20页B B-B B-瘤瘤 瘤瘤-瘤瘤 瘤瘤3 3、细胞融合后培养液中有几个细胞?、细胞融合后培养液中有几个细胞?4 4、怎样从中筛选出杂交
8、瘤细胞?、怎样从中筛选出杂交瘤细胞?用特定选择性培养基进行筛选:用特定选择性培养基进行筛选:在培养液中加入氨基嘌呤,搜集增殖细在培养液中加入氨基嘌呤,搜集增殖细胞胞第21页5 5、怎样选择出分泌、怎样选择出分泌所需专一所需专一抗体杂交瘤细胞?抗体杂交瘤细胞?克隆化培养和抗体检测。经屡次筛选,取克隆化培养和抗体检测。经屡次筛选,取得足够数量能分泌所需专一抗体细胞。得足够数量能分泌所需专一抗体细胞。第22页体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖,体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖,从细胞培养液或小鼠腹水中,可提取大量从细胞培养液或小鼠腹水中,可提取大量单克隆抗体。单克隆抗体。6 6、怎样取得大量单
9、克隆抗体?、怎样取得大量单克隆抗体?第23页总结总结:单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程第24页 分组讨论,单抗制备过程分哪几步?分组讨论,单抗制备过程分哪几步?请用箭头把以请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤图解字母按正确次序连下代表单克隆抗体制备过程步骤图解字母按正确次序连接起来。次序是?接起来。次序是?第25页 由由单个单个B B淋巴细胞淋巴细胞经过无性繁殖经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同细胞群,这(克隆),形成基因型相同细胞群,这一细胞群所产生一细胞群所产生化学性质单一、特异性化学性质单一、特异性强抗体强抗体称为单克隆抗体。称为单克隆抗体。最主要优点:最主要优点:特异性强、灵
10、敏度高并可能大量制备。特异性强、灵敏度高并可能大量制备。第27页 在基础理论研究中含有主要意义在基础理论研究中含有主要意义 (二)、单克隆抗体应用(二)、单克隆抗体应用诊疗试剂诊疗试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速同位素标识单克隆抗体,同位素标识单克隆抗体,在特定组织中成像,定位在特定组织中成像,定位诊疗相关疾病诊疗相关疾病第28页运载药品运载药品(“生物导弹生物导弹”单抗导向,药品为弹头单抗导向,药品为弹头)用于治疗疾病和运载药品用于治疗疾病和运载药品第29页比较植物体细胞杂交和单克隆抗体制备比较植物体细胞杂交和单克隆抗体制备比较项目比较项目植物体细胞杂交植
11、物体细胞杂交单克隆抗体制备原理原理融合前处理融合前处理促融方法促融方法用途用途过过程程第一步第一步第二步第二步第三步第三步第四步第四步细胞膜流动性、细胞全能性细胞膜流动性、细胞全能性膜流动性、细胞膜流动性、细胞增殖增殖酶解法去壁酶解法去壁小鼠免疫处理小鼠免疫处理、细胞分散、细胞分散物理法化学法物理法化学法物理、化学、生物法物理、化学、生物法原生质体制备原生质体制备融合亲本细胞准备融合亲本细胞准备原生质体融合原生质体融合与筛选与筛选动物细胞融合与动物细胞融合与两次筛选两次筛选杂种细胞形成与培养杂种细胞形成与培养产特定抗体杂交瘤细胞培养产特定抗体杂交瘤细胞培养杂种植株判定杂种植株判定单克隆抗体分离
12、提纯单克隆抗体分离提纯单抗有利于疾病诊疗、治疗、预防单抗有利于疾病诊疗、治疗、预防 取得具优良性状杂种植株取得具优良性状杂种植株第30页小结小结两个过程两个过程动物细胞融合过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三个三个“一一”一个诱导细胞融合新方法灭活病一个诱导细胞融合新方法灭活病毒毒一个新细胞杂交瘤细胞一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高优势强、灵敏度高优势第31页1 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交瘤细胞,经培养可产生大量单合,得到杂交瘤细胞,经培养可产生大量单克隆抗体,与
13、骨髓瘤细胞融合是克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合是A.A.经过免疫经过免疫B B淋巴细胞淋巴细胞 B.B.不经过免疫不经过免疫T T淋巴细胞淋巴细胞C.C.经过免疫经过免疫T T淋巴细胞淋巴细胞 D.D.不经过免疫不经过免疫B B淋巴细胞淋巴细胞B不要气馁,不要气馁,再来一次!再来一次!ADC不要气馁,不要气馁,再来一次!再来一次!不要气馁,不要气馁,再来一次!再来一次!恭喜你,答恭喜你,答对了!再接对了!再接再厉!再厉!知识闯关知识闯关第32页2 2、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B B淋巴淋巴细胞融合后要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在细胞融合后要用特定培
14、养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖细胞是这种培养基上不能存活、增殖细胞是B B淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞 B B淋巴细胞本身融合细胞淋巴细胞本身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞本身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞本身融合细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞A.A.B.B.C.D.C.D.B不要气馁,不要气馁,再来一次!再来一次!ADC不要气馁,不要气馁,再来一次!再来一次!不要气馁,不要气馁,再来一次!再来一次!恭喜你,答恭喜你,答对了!再接对了!再接再厉!再厉!第33页3 3、试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者能够、试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者能够说是当代生物科技出色结果说是当代生物科
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