人教版教学8动物细胞融合与单克隆抗体省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

第1页蛇身蛇身马首马首鹿角鹿角兽脚兽脚鬣尾鬣尾鹰爪鹰爪鱼鳞鱼鳞虎须虎须。第2页 受精卵受精卵来自精子来自卵细胞第3页一、动物细胞融合1 1、动物细胞融合过程、动物细胞融合过程第4页不一样不一样DNADNA两个细胞两个细胞AB第5页思索题1 1、植物体细胞杂交中诱导原生质体、植物体细胞杂交中诱导原生质体 融合惯用方法有哪些？融合惯用方法有哪些？离心、振动和电激等物理方法；离心、振动和电激等物理方法；PEGPEG等化学方法等化学方法2 2、动物细胞融合能利用上述两类方、动物细胞融合能利用上述两类方 法吗？还有其它方法吗法吗？还有其它方法吗?能能 能够利用灭活病毒进行诱导能够利用灭活病毒进行诱导第6页灭活病毒诱导细胞融合原理灭活病毒诱导细胞融合原理第7页用灭活病毒诱导动物细胞融合过程用灭活病毒诱导动物细胞融合过程细胞核细胞核病毒颗粒病毒颗粒细胞核细胞核灭活丧失感染性灭活丧失感染性保留融合活性保留融合活性 为何细胞融合过程中为何细胞融合过程中为何细胞融合过程中为何细胞融合过程中使用病毒需要使用病毒需要使用病毒需要使用病毒需要灭活灭活灭活灭活？第8页不一样不一样DNADNA两个细胞两个细胞灭活病毒诱导细胞融合灭活病毒诱导细胞融合融合后细胞进融合后细胞进行有丝分裂行有丝分裂AB第9页3 3、植物体细胞杂交过程应先进行原、植物体细胞杂交过程应先进行原 生质体融合再进行组织培养形成生质体融合再进行组织培养形成 完整个体，动物细胞融合后能完整个体，动物细胞融合后能 形成杂种动物个体吗？形成杂种动物个体吗？4 4、你能归纳出什么叫做动物细胞、你能归纳出什么叫做动物细胞 融合吗？融合吗？不能不能思索题思索题第10页2 2、动物细胞融合概念、动物细胞融合概念 动物细胞融合也称细胞杂交，动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞（单核杂交细胞）过程。一个细胞（单核杂交细胞）过程。第11页4 4、动物细胞融合应用、动物细胞融合应用生物新品种培育生物新品种培育细胞遗传细胞遗传 细胞免疫细胞免疫 肿瘤肿瘤 利用动物细胞融合技术诱导形成杂利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞，制备单克隆抗体交瘤细胞，制备单克隆抗体3 3、动物细胞融合意义、动物细胞融合意义 突破了有性杂交方法局限，使远缘突破了有性杂交方法局限，使远缘杂交成为可能。杂交成为可能。假如你掌握了动物细胞融合技术，你想用假如你掌握了动物细胞融合技术，你想用它来处理什么问题？它来处理什么问题？第12页 植物体细胞杂交和动物植物体细胞杂交和动物细胞融合在原理、细胞融合细胞融合在原理、细胞融合方法、诱导方法等方面有什方法、诱导方法等方面有什么差异呢？么差异呢？小结：小结：第13页主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体取得杂种植株取得杂种植株用途用途物理、化学方法物理、化学方法（同左）（同左）灭活病毒灭活病毒物理（离心、振物理（离心、振动、电刺激）动、电刺激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）诱导方法诱导方法使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合去除细胞壁后诱去除细胞壁后诱导原生质体融合导原生质体融合细胞融合方法细胞融合方法细胞膜流动性细胞膜流动性细胞膜流动性、细胞膜流动性、植物细胞全能性植物细胞全能性原理原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目比较项目植物、动物细胞融合比较植物、动物细胞融合比较第15页1.抗体是由何种细胞产生？抗体是由何种细胞产生？提提问问？二、单克隆抗体二、单克隆抗体2.2.利用已学知识，考虑怎样利用已学知识，考虑怎样 得到抗体？得到抗体？抗体抗体抗原抗原刺激刺激浆细胞浆细胞经过免疫经过免疫B淋巴细胞（浆细胞）淋巴细胞（浆细胞）动物体内动物体内第16页抗体传统生产方法抗体传统生产方法从从血血清清中中分分离离抗抗体体各各种种浆浆细细胞胞动动物物体体内内各各种种抗抗体体抗抗原原 第17页 抗原抗原 动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯不能增殖产生大量抗体不能增殖产生大量抗体二、单克隆抗体二、单克隆抗体产量低、纯度低，抗体特异性差产量低、纯度低，抗体特异性差3.此方法得到抗体缺点是什么？此方法得到抗体缺点是什么？该法制备抗体特点：该法制备抗体特点：第18页1 1、怎样确保抗体纯度？、怎样确保抗体纯度？怎样取得化学性质单一、特异性强高产抗体？怎样取得化学性质单一、特异性强高产抗体？（一）、单克隆抗体制备设计方案：设计方案：小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖2 2、怎样提升抗体产量？、怎样提升抗体产量？一个一个B B淋巴细胞只分泌一个特异性抗体淋巴细胞只分泌一个特异性抗体第19页杂种细胞杂种细胞小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖一个一个B B淋巴细胞只分泌一个特异性抗体淋巴细胞只分泌一个特异性抗体第20页B B-B B-瘤瘤 瘤瘤-瘤瘤 瘤瘤3 3、细胞融合后培养液中有几个细胞？、细胞融合后培养液中有几个细胞？4 4、怎样从中筛选出杂交瘤细胞？、怎样从中筛选出杂交瘤细胞？用特定选择性培养基进行筛选：用特定选择性培养基进行筛选：在培养液中加入氨基嘌呤，搜集增殖细在培养液中加入氨基嘌呤，搜集增殖细胞胞第21页5 5、怎样选择出分泌、怎样选择出分泌所需专一所需专一抗体杂交瘤细胞？抗体杂交瘤细胞？克隆化培养和抗体检测。经屡次筛选，取克隆化培养和抗体检测。经屡次筛选，取得足够数量能分泌所需专一抗体细胞。得足够数量能分泌所需专一抗体细胞。第22页体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中，可提取大量从细胞培养液或小鼠腹水中，可提取大量单克隆抗体。单克隆抗体。6 6、怎样取得大量单克隆抗体？、怎样取得大量单克隆抗体？第23页总结总结:单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程第24页 分组讨论，单抗制备过程分哪几步？分组讨论，单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤图解字母按正确次序连下代表单克隆抗体制备过程步骤图解字母按正确次序连接起来。次序是？接起来。次序是？第25页 由由单个单个B B淋巴细胞淋巴细胞经过无性繁殖经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同细胞群，这（克隆），形成基因型相同细胞群，这一细胞群所产生一细胞群所产生化学性质单一、特异性化学性质单一、特异性强抗体强抗体称为单克隆抗体。称为单克隆抗体。最主要优点：最主要优点：特异性强、灵敏度高并可能大量制备。特异性强、灵敏度高并可能大量制备。第27页 在基础理论研究中含有主要意义在基础理论研究中含有主要意义 （二）、单克隆抗体应用（二）、单克隆抗体应用诊疗试剂诊疗试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速同位素标识单克隆抗体，同位素标识单克隆抗体，在特定组织中成像，定位在特定组织中成像，定位诊疗相关疾病诊疗相关疾病第28页运载药品运载药品(“生物导弹生物导弹”单抗导向，药品为弹头单抗导向，药品为弹头)用于治疗疾病和运载药品用于治疗疾病和运载药品第29页比较植物体细胞杂交和单克隆抗体制备比较植物体细胞杂交和单克隆抗体制备比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交单克隆抗体制备原理原理融合前处理融合前处理促融方法促融方法用途用途过过程程第一步第一步第二步第二步第三步第三步第四步第四步细胞膜流动性、细胞全能性细胞膜流动性、细胞全能性膜流动性、细胞膜流动性、细胞增殖增殖酶解法去壁酶解法去壁小鼠免疫处理小鼠免疫处理、细胞分散、细胞分散物理法化学法物理法化学法物理、化学、生物法物理、化学、生物法原生质体制备原生质体制备融合亲本细胞准备融合亲本细胞准备原生质体融合原生质体融合与筛选与筛选动物细胞融合与动物细胞融合与两次筛选两次筛选杂种细胞形成与培养杂种细胞形成与培养产特定抗体杂交瘤细胞培养产特定抗体杂交瘤细胞培养杂种植株判定杂种植株判定单克隆抗体分离提纯单克隆抗体分离提纯单抗有利于疾病诊疗、治疗、预防单抗有利于疾病诊疗、治疗、预防 取得具优良性状杂种植株取得具优良性状杂种植株第30页小结小结两个过程两个过程动物细胞融合过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三个三个“一一”一个诱导细胞融合新方法灭活病一个诱导细胞融合新方法灭活病毒毒一个新细胞杂交瘤细胞一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高优势强、灵敏度高优势第31页1 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量单合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合是克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合是A.A.经过免疫经过免疫B B淋巴细胞淋巴细胞 B.B.不经过免疫不经过免疫T T淋巴细胞淋巴细胞C.C.经过免疫经过免疫T T淋巴细胞淋巴细胞 D.D.不经过免疫不经过免疫B B淋巴细胞淋巴细胞B不要气馁，不要气馁，再来一次！再来一次！ADC不要气馁，不要气馁，再来一次！再来一次！不要气馁，不要气馁，再来一次！再来一次！恭喜你，答恭喜你，答对了！再接对了！再接再厉！再厉！知识闯关知识闯关第32页2 2、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B B淋巴淋巴细胞融合后要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在细胞融合后要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖细胞是这种培养基上不能存活、增殖细胞是B B淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞 B B淋巴细胞本身融合细胞淋巴细胞本身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞本身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞本身融合细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞A.A.B.B.C.D.C.D.B不要气馁，不要气馁，再来一次！再来一次！ADC不要气馁，不要气馁，再来一次！再来一次！不要气馁，不要气馁，再来一次！再来一次！恭喜你，答恭喜你，答对了！再接对了！再接再厉！再厉！第33页3 3、试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者能够、试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者能够说是当代生物科技出色结果说是当代生物科技出色结果,以下对其生物以下对其生物学原理及技术叙述学原理及技术叙述,正确是正确是 A.A.都属于无性生殖都属于无性生殖 B.B.都利用了细胞工程一些技术都利用了细胞工程一些技术 C.C.都不会发生基因重组都不会发生基因重组 D.D.都表达了已分化细胞含有全能性都表达了已分化细胞含有全能性B第34页解题思绪探究解题思绪探究对克隆与组织培养、试管动物对克隆与组织培养、试管动物(婴儿婴儿)区分不清区分不清克隆克隆组织培养组织培养试管动物试管动物(婴儿婴儿)生殖方式生殖方式无性无性无性无性有性有性遗传物质起源2 2个亲本个亲本1 1个亲本个亲本2 2个亲本个亲本性别决定性别决定提供核亲本提供核亲本普通没有精子类型精子类型用途用途优良种畜快优良种畜快速繁育速繁育,可可选择性别选择性别快速繁殖无快速繁殖无病毒植株病毒植株处理不孕不育第35页4、将小鼠骨髓瘤细胞与一个将小鼠骨髓瘤细胞与一个B B淋巴细胞融合，淋巴细胞融合，可使融合细胞经培养产生单克隆抗体，其依可使融合细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是据是 A.BA.B淋巴细胞能够产生抗体，但不能无限增殖淋巴细胞能够产生抗体，但不能无限增殖 B.BB.B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产 生抗体生抗体C.C.骨随瘤细胞能够无限增殖，但不能产生抗骨随瘤细胞能够无限增殖，但不能产生抗 体体 D.D.骨髓瘤细胞能够产生抗体，但不能无限增骨髓瘤细胞能够产生抗体，但不能无限增 殖殖多项选择题多项选择题（A、C）第36页下课啦下课啦！第37页5、右图为某同学依据杂交瘤技术方法，右图为某同学依据杂交瘤技术方法，设计生产破伤风杆菌抗体试验方案。设计生产破伤风杆菌抗体试验方案。据图回答：据图回答：该方案能到达预期效果吗？该方案能到达预期效果吗？原因是原因是图中图中为为 过程，可在过程，可在 诱导下完成。诱导下完成。杂交瘤细胞繁殖进行是杂交瘤细胞繁殖进行是 分裂，该分裂，该细胞特点是细胞特点是淋巴细胞能与骨髓瘤融合成一个细胞，淋巴细胞能与骨髓瘤融合成一个细胞，两种细胞膜也能融合在一起，说明细两种细胞膜也能融合在一起，说明细胞膜胞膜不能没有抗原注入小鼠体内，无法取得产生此种抗体B细胞细胞融合有丝灭活病毒或聚乙二醇又能产生专一抗体。既能快速大量繁殖，既能快速大量繁殖，含有一定流动性含有一定流动性第38页将诱导后产生各种细胞，放在含将诱导后产生各种细胞，放在含 培养基多孔培养板上培养，筛选。培养基多孔培养板上培养，筛选。该方案目标是该方案目标是 。单克隆抗体准确定义为单克隆抗体准确定义为 。A.A.一类特殊抗体一类特殊抗体B.B.无性繁殖系无性繁殖系C.C.单一抗体细胞无性繁殖系单一抗体细胞无性繁殖系D.D.单一抗体细胞有性繁殖系单一抗体细胞有性繁殖系单克隆抗体与普通血清抗体相比，含有优点单克隆抗体与普通血清抗体相比，含有优点 是是 。特定选择性特定选择性制备单克隆抗体制备单克隆抗体C特异性强，灵敏度高并可大量制备特异性强，灵敏度高并可大量制备第39页 抗体是机体受抗原刺激后产生、抗体是机体受抗原刺激后产生、并能与该抗原发生特异性结合含有并能与该抗原发生特异性结合含有免疫功效球蛋白。免疫功效球蛋白。第40页 已知细胞合成已知细胞合成DNADNA有有DD和和S S两条路径，两条路径，其中其中DD路径能被路径能被氨基嘌呤氨基嘌呤阻断。人淋巴阻断。人淋巴细胞中有这两条细胞中有这两条DNADNA合成路径，但普通合成路径，但普通不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S S路径，但能不停分裂增殖。路径，但能不停分裂增殖。小资料：小资料：第41页思索与探究思索与探究1.1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不一样？合技术有什么不一样？提醒：植物体细胞杂交技术与动物提醒：植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，不一样是植细胞融合技术基本相同，不一样是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。直接融合。第42页思索与探究思索与探究 2.2.制备单克隆抗体时，为何要选取制备单克隆抗体时，为何要选取B B淋巴细胞淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？提醒：提醒：动物在免疫反应过程中，每一个动物在免疫反应过程中，每一个B B淋巴细胞能淋巴细胞能分泌一个特异性抗体，要想取得大量特异性抗体，必分泌一个特异性抗体，要想取得大量特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体须使能分泌该单一抗体B B淋巴细胞大量增殖。淋巴细胞大量增殖。B B淋巴淋巴细胞含有产生单一抗体能力，但不能在体外增殖；骨细胞含有产生单一抗体能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一个癌细胞，它能在体外培养条件下无限髓瘤细胞是一个癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。所以，把一个增殖，但不能产生抗体。所以，把一个B B淋巴细胞与淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞特征有两个亲本细胞特征在体外培养条件下能不停增在体外培养条件下能不停增殖，同时能产生出某种特异性抗体。殖，同时能产生出某种特异性抗体。第43页4.4.为何不用两个而要用多个细胞进行动物细胞间融合为何不用两个而要用多个细胞进行动物细胞间融合？就当前惯用细胞融合方法来看，不论是用物理、化学就当前惯用细胞融合方法来看，不论是用物理、化学方法，还是生物方法，其融合率都不可能是方法，还是生物方法，其融合率都不可能是100%100%。仅用。仅用两个细胞融合，其效率太低，不一定能得到融合细胞。两个细胞融合，其效率太低，不一定能得到融合细胞。更主要是，即使两个细胞已发生融合，但并不一定是研更主要是，即使两个细胞已发生融合，但并不一定是研究者期望得到细胞类型。当前动物细胞融合技术最有价究者期望得到细胞类型。当前动物细胞融合技术最有价值应用就是单克隆抗体制备。我们以制备单克隆抗体为值应用就是单克隆抗体制备。我们以制备单克隆抗体为例来说明这一问题。我们知道，体内产生特异性抗体种例来说明这一问题。我们知道，体内产生特异性抗体种类可多达百万种以上，不过每一个类可多达百万种以上，不过每一个B B淋巴细胞只分泌一个淋巴细胞只分泌一个特异性抗体，假如仅取一个脾细胞（含特异性抗体，假如仅取一个脾细胞（含B B淋巴细胞）和一淋巴细胞）和一个瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌抗体是否正个瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌抗体是否正是我们所需要；若用大量脾细胞和瘤细胞进行融合，就是我们所需要；若用大量脾细胞和瘤细胞进行融合，就能够从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体杂交瘤细胞。能够从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体杂交瘤细胞。第44页5.5.怎样进行杂交瘤细胞抗体检测及克隆化培养？怎样进行杂交瘤细胞抗体检测及克隆化培养？融合后细胞经选择性培养基培养后，能存活细胞就是融合后细胞经选择性培养基培养后，能存活细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体细胞，通惯用细胞，通惯用“有限稀释法有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超出一个，经过培用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超出一个，经过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌抗体（惯用养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌抗体（惯用酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合培酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合培养孔为阳性孔。阳性孔中细胞还不能确保是来自单个细胞，养孔为阳性孔。阳性孔中细胞还不能确保是来自单个细胞，挑选阳性孔细胞继续进行有限稀释，普通需进行挑选阳性孔细胞继续进行有限稀释，普通需进行3 34 4次，次，直至确信每个孔中增殖细胞为单克隆细胞。该过程即为杂直至确信每个孔中增殖细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞克隆化培养。交瘤细胞克隆化培养。第45页对位训练对位训练3.3.利用细胞工程方法，以利用细胞工程方法，以SARSSARS病毒核衣壳蛋白为抗病毒核衣壳蛋白为抗 原制备出单克隆抗体。以下相关叙述正确是原制备出单克隆抗体。以下相关叙述正确是（）A.A.用纯化核衣壳蛋白重复注射到小鼠体内，产用纯化核衣壳蛋白重复注射到小鼠体内，产 生血清抗体为单克隆抗体生血清抗体为单克隆抗体 B.B.体外培养单个体外培养单个B B淋巴细胞能够取得大量针对淋巴细胞能够取得大量针对SARSSARS 病毒单克隆抗体病毒单克隆抗体 C.C.将等量将等量B B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEGPEG诱诱 导融合后细胞均为杂交瘤细胞导融合后细胞均为杂交瘤细胞 D.D.利用该单克隆抗体与利用该单克隆抗体与SARSSARS病毒核衣壳蛋白特异病毒核衣壳蛋白特异 性结合方法可诊疗出病毒感染者性结合方法可诊疗出病毒感染者D第46页1、从母羊甲体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核卵细胞中，融合后细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙子宫内，出生小羊大多数性状 ()A.难以预测 B.像甲 C.像乙 D.像丙2（，全国）用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，以下试验步骤中错误是（）A将抗原注入小鼠体内，取得能产生抗体B淋巴细胞B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交资金积累细胞，并从中选出能产生所需抗体细胞群，培养后提取单克隆抗体BB第47页3.动物细胞融合和植物体细胞杂交比较中，正确动物细胞融合和植物体细胞杂交比较中，正确是是 （）诱导融合方法完全相同诱导融合方法完全相同 所用技术伎俩不相同所用技术伎俩不相同 所采取原理完全相同所采取原理完全相同 都能形成杂种细胞都能形成杂种细胞A.B.C.D.4.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖细胞是（细胞，在这种培养基上不能存活增殖细胞是（）淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞淋巴细胞本身融合细胞本身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞本身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞本身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞A BC D CA第48页