实验一普通生物显微镜的使用省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx
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1、试验一、普通生物显微镜使用试验一、普通生物显微镜使用(一一)动、植物细胞、真菌观察及生物绘动、植物细胞、真菌观察及生物绘图法图法第1页一、实验目:1.1.了解普通光学显微镜和体视显微镜基本构了解普通光学显微镜和体视显微镜基本构 造及功用,并正确掌握使用和维护方法。造及功用,并正确掌握使用和维护方法。2.观察一些真核细胞结构,学习基本生物绘观察一些真核细胞结构,学习基本生物绘图方法。图方法。3.学习暂时装片制作方法。学习暂时装片制作方法。第2页二、试验原理:二、试验原理:(一)、显微镜概述:(一)、显微镜概述:显微镜是观察细胞主要工具。依据光源不一显微镜是观察细胞主要工具。依据光源不一样,可分为
2、样,可分为光学显微镜光学显微镜和和电子显微镜电子显微镜两大类。两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。源,后者则以电子束为光源。第3页(二)、显微镜创造:(二)、显微镜创造:1.最早由荷兰眼镜商在最早由荷兰眼镜商在16前后制造,它前后制造,它结构简单,放大倍数只有结构简单,放大倍数只有1030倍,能够倍,能够观察一些小昆虫,如跳蚤等,因而有些人称观察一些小昆虫,如跳蚤等,因而有些人称它它为为“跳蚤镜跳蚤镜”。这种显微镜是用光线照明,属于光学显微镜。这种显微镜是用光线照明,属于光学显微镜。第4页2.2.英国物理学家罗伯特英
3、国物理学家罗伯特虎克(虎克(Robert HookeRobert Hooke,1635 1635 1703 1703)研制出能够放大研制出能够放大140140倍光学显微倍光学显微 镜,并用它来观察软木薄片,发觉了细胞。镜,并用它来观察软木薄片,发觉了细胞。第5页3.3.16731673年有个名叫列文年有个名叫列文.虎克(虎克(Antoni van Antoni van LeeuwenhoekLeeuwenhoek)荷荷兰人用自己制造人用自己制造显微微镜观察到了被他称察到了被他称为“小小动物物”微生物世界。微生物世界。他也被称为微生物开山祖。他也被称为微生物开山祖。第6页4.1938年,德国工程
4、师鲁斯卡(年,德国工程师鲁斯卡(Ernest Ruska,Ernest Ruska,1906 1906-1988)1988)制造出世界第一台透射电子显微镜制造出世界第一台透射电子显微镜(TEM)。)。1952年,英国工程师年,英国工程师CharlesOatley制造出第一台扫描电子显微镜(制造出第一台扫描电子显微镜(SEM)第7页(三)、显微镜分辨率(三)、显微镜分辨率:分辨率分辨率:也称为分辨力,它是指能把两个物点分:也称为分辨力,它是指能把两个物点分 辨清楚最小距离。辨清楚最小距离。分辨率数值越高,分辨距离越大,则分辨率越低。分辨率数值越高,分辨距离越大,则分辨率越低。反之亦然。所以,分辨
5、率是以分辨距离来表示。反之亦然。所以,分辨率是以分辨距离来表示。其其计算公式计算公式为为:D=0.61 D=0.61入入/N NA NA NA A=n=n sina/2 sina/2 式式中中D D为为分分辨辨率率,A A为为光光波波波波长长,N NA A为为物物镜镜数数值孔径值孔径(镜口率镜口率)。第8页 在物镜上,有在物镜上,有镜口率镜口率(N.A.)N.A.)标志,它反应该镜头标志,它反应该镜头 分辨力大小,其数字越大,表示分辨率越高。分辨力大小,其数字越大,表示分辨率越高。各物镜镜口率以下表:各物镜镜口率以下表:物镜 镜口率(N.A.)工作距离(mm)10 0.25 5.40 40 0
6、.65 0.39 100 1.30 0.11显微镜显微镜总放大倍数总放大倍数=目镜放大倍数物镜放大倍数 公式为:M=K1 K2 第9页焦点深度焦点深度:显微镜调焦到看清标本某一点时,不显微镜调焦到看清标本某一点时,不 仅是这一物点,而且它上下两侧也仅是这一物点,而且它上下两侧也 能看清楚厚度叫做焦点深度。能看清楚厚度叫做焦点深度。要看到标本全厚度,必须调整螺旋要看到标本全厚度,必须调整螺旋 仔细地从上到下进行观察仔细地从上到下进行观察。第10页三、材料和仪器:三、材料和仪器:仪器:普通光学显微镜、体视镜仪器:普通光学显微镜、体视镜(附显微用具:擦镜纸、香柏油、二甲苯、载玻片、盖玻片)材料与器材
7、:新鲜酵母液、滴管、镊子、培养材料与器材:新鲜酵母液、滴管、镊子、培养皿、标本盒(内有各种装片)皿、标本盒(内有各种装片)第11页四、试验步骤:四、试验步骤:(一)普通显微镜使用及维护:(一)普通显微镜使用及维护:I I .光学显微镜结构光学显微镜结构普通生物显微镜由普通生物显微镜由2 2部分组成:部分组成:光学部分光学部分:包含物镜、目镜、光源、聚光器,是显:包含物镜、目镜、光源、聚光器,是显 微镜主体。微镜主体。:机械部分机械部分:包含镜筒、镜臂、镜座、镜台:包含镜筒、镜臂、镜座、镜台(载物台)、载物台)、调整旋钮、物镜转换器等,用于固定材调整旋钮、物镜转换器等,用于固定材 料和观察方便料
8、和观察方便。第12页IIII.显微镜使用显微镜使用1.1.观察前准备工作观察前准备工作 .显微镜在使用之前应检验一下它各个部件是否显微镜在使用之前应检验一下它各个部件是否 完整和正常,并对载物台、目镜、物镜以及聚光完整和正常,并对载物台、目镜、物镜以及聚光 器上端透镜进行必要清洁工作。然后进行调整。器上端透镜进行必要清洁工作。然后进行调整。.观察时要观察时要双眼同时睁开双眼同时睁开,一边观察一边进行统计,一边观察一边进行统计 或描绘。或描绘。.观察时所用材料、药品和各种器具要预先备好观察时所用材料、药品和各种器具要预先备好第13页2.使用方法:使用方法:(1)低倍镜使用:)低倍镜使用:观察任何
9、标本,均需从低倍镜观察任何标本,均需从低倍镜开始开始。检验:检验显微镜是否完好。检验:检验显微镜是否完好。准备:将显微镜放于准备:将显微镜放于前策略偏左前策略偏左,转动粗调旋钮,转动粗调旋钮将将载物台下降载物台下降,旋转物镜转换器使,旋转物镜转换器使低倍镜低倍镜正对通正对通光孔。光孔。对光:对光:放标本片:放标本片:调整焦距调整焦距 计算放大倍数:计算放大倍数:第14页错误原因:如按上述操作,依然看不到图象,错误原因:如按上述操作,依然看不到图象,可能有以下原因:可能有以下原因:A.转动调整太快,超出焦点,需重新调整。转动调整太快,超出焦点,需重新调整。B.物镜未对准通光孔。物镜未对准通光孔。
10、C.标本没放在视野内,需移动标本片寻找观察标本没放在视野内,需移动标本片寻找观察对象。对象。D.光线太强或太弱。尤其观察透明或未染色标光线太强或太弱。尤其观察透明或未染色标本时,应将光线调稍暗些,有利观察。本时,应将光线调稍暗些,有利观察。第15页(2 2)高倍镜使用:)高倍镜使用:依照上述操作步骤,依照上述操作步骤,先用低倍镜先用低倍镜找到清楚物象,找到清楚物象,将需要观察部分移到视野中央,将需要观察部分移到视野中央,眼睛眼睛从侧面注视物镜从侧面注视物镜,移动转换器,换高倍镜,移动转换器,换高倍镜,看目镜,看目镜,微调细调旋钮微调细调旋钮,至看到清楚物象。,至看到清楚物象。第16页错误原因:
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