普通生物学实验市公开课一等奖百校联赛特等奖课件.pptx

普通生物学试验普通生物学试验 EMAIL: TEL：[phone]植物学部分王建芳王建芳第1页Contents1.植物徒手切片和植物各类组织观察2.植物叶脉标本制作3.叶绿体色素提取、分离及含量测定4.植物种子活力快速测定第2页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察一、植物徒手切片法v试验目标 徒手切片方法是我们从事教学、科研及生产 技术工作中惯用最简便观察植物内部结构 方法，这种方法不需要复杂设备，又能随 时快速地观察植物生活细胞及各器官内部组 织生活情况和天然色彩，所以有很大实 用价值。第3页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察一、植物徒手切片v材料与工具 芹菜叶柄（长度23厘米）、刀片v药品和试剂 染色剂第4页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察一、植物徒手切片v方法和步骤（1）切片前，在小培养皿中盛以清水，准备好滴管和刀片等用具和欲切材料（芹菜叶柄）。（2）切片时用左手三个指头拿住材料，并使其稍 突出手指之上。右手持刀片，平放在左手食 指之上，刀口向内，且与材料断面平行，然后以均匀动作，自左前方向右后方滑行切片，注意要用整个手臂向后拉（手腕无须用力）。切下薄片后，将薄片轻轻移入已盛水培养皿中备用。（3）挑选最薄而透明切片，取出放在载玻片上，制成暂时装片观察，也可制成永久性玻片标本。第5页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察一、植物徒手切片v试验注意事项（1）选择材料时不易太硬也不要太软。（2）切片时动作要灵敏，材料要一次切下。（3）整个切片过程中应用清水湿润材料和刀面，使之滑润，不然材料轻易破损。第6页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察v二、植物各类组织观察v实验介绍v 种子植物组织结构按照其发育特点，可分为两大类，即分生组织和成熟组织。分生组织细胞在植物一生中始终具有分裂能力，一方面增加新细胞到植物体中，其次使自己永存下去。成熟组织是由分生组织分裂一些细胞在后来生长发育过程中陆续分化而失去分裂能力，所形成有特定功能细胞。按成熟组织功能又可以分成营养组织、保护组织、输导组织、机械组织和分泌组织。在不一样种植物、植物体不一样器官和植物发育不一样阶段，组织结构有所不一样。第7页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织观察v试验介绍v 分生组织：植物根尖顶端有一帽状根冠，其内圆锥状部分染色深，细胞小，细胞核相对较大，细胞质较厚，没有显著液泡，无分化，为原分生组织。原分生组织上策略有分化组织，为初生分生组织，其表面是原表皮，表皮以内染色较淡是基本分生组织，中央染色较深部位为原形成层。第8页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织观察v试验介绍v 保护组织：是覆盖在植物体表面起保护作用组织，由一层或数层细胞组成，其功效主要是防止水分过分散失，调整植物与环境气体交换，抵抗外界风雨和病虫害侵袭，预防机械或化学损伤。依据其起源和形态不一样，保护组织又分为表皮（初生保护组织）和周皮（次生保护组织）。保护组织细胞排列整齐，含有保护内部柔嫩部分功效。第9页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织观察v试验介绍v 输导组织：是植物体中担负物质长途运输主要组织，是植物体中最复杂系统。根从土壤中吸收水分和无机盐，由输导组织运输到地上部分。叶光合作用产物，由输导组织运输到根、茎、花、果实中去。植物体各部分之间经常进行物质重新分配和转移，也要经过输导组织来进行。输导组织分为二类，一类为木质部，主要运输水分和溶解于其中无机盐；另一类为韧皮部，主要运输有机营养物质。输导组织细胞特点是细胞长形，常上下相连，形成适于输导管道。木质部有导管，韧皮部有筛管和伴胞。第10页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织观察v试验介绍v 输导组织植物茎结构木栓形成层双子叶植物茎结构第11页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织观察v试验介绍v 输导组织小麦茎结构第12页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织观察v试验介绍v 厚角组织：厚角组织是植物机械组织一类,厚角组织细胞最显著特征是细胞壁含有不均匀增厚，壁增厚通常在几个细胞邻接处角隔上尤其显著，故称厚角组织。厚角组织分布于茎、叶柄、叶片、花柄等部分，根中普通不存在。厚角组织分布含有一个显著特征，即普通总是分布于器官外围，或直接在表皮下，或与表皮只隔开几层薄壁细胞。在茎和叶柄中厚角组织往往成连续圆筒或分离成束，常在具脊状突起茎和叶柄中棱部分尤其发达，比如在薄荷方茎中，南瓜、芹菜具棱茎和叶柄中。细胞为长柱形，相互重合排列。第13页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织观察v试验介绍v 分泌组织：分泌组织是由含有分泌作用能分泌挥发油、树脂、蜜汁、乳汁等细胞所组成。依据分泌组织分布在植物体表或植物休内，可分为外部分泌组织和内部分泌组织两大类。（一）外部分泌组织：位于植物体表，其分泌物直接排出于体外，其中有腺毛和蜜腺 （二）内部分泌组织：存在于植物体内，其分泌物贮在细胞内或细胞间隙中。按其组成，形状和分泌物不一样，可分为：1 分泌细胞；2分泌腔；3分泌道；4乳汁管。第14页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察二、植物各类组织观察v试验目标 能说出植物分生组织、薄壁组织、保护组织、输导组织和机械组织基本形态结构特点，并能从植物器官中识别各种植物组织。v器材和试剂1.植物材料 玉米根尖纵切永久制片、南瓜茎纵切永久制片、大叶黄杨叶、芹菜叶柄、柑橘果实。2.试验器材 显微镜、剪刀、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、滴管、培 养皿。第15页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察l试验步骤1.分生组织观察（1）取玉米根尖纵切永久制片，先在低倍镜下观察，再用高倍镜。（2）注意观察：初生分生组织细胞形态特点，有没有正在分裂细胞；假如观察到了正在分裂细胞，注意观察其分裂方向；初生分生组织细胞之间有没有细胞间隙？（3）细胞特点：细胞小，细胞核较大，没有大液泡，细胞呈正方形，排列整齐紧密。因为正在分裂，细胞质密度大，活动旺盛，细胞壁薄。第16页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察l试验步骤2.保护组织观察（1）撕取大叶黄杨叶表皮制成暂时装片，观察其表皮细胞、气孔器形态结构。（2）注意观察：细胞间排列、细胞间有没有间隙。（3）细胞特点：外有细胞壁，内有大液泡；细胞之中可观察到绿色颗粒状物（叶绿体).另外，还可能观察到唇状叶孔保护细胞 第17页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察l试验步骤3.输导组织观察（1）观察南瓜茎纵切永久制片，找出木质部中导管、韧皮部中筛管和半胞，（2）注意观察：筛板和长形成群分布一类细胞，此为木纤维。（3）细胞特点：细胞长形，常上下相连，形成适于输导管道。第18页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察l试验步骤4.厚角组织观察（1）将芹菜叶柄制成暂时装片置于显微镜下，观察叶柄棱角处，在表皮和维管束之间有一团厚角组织，细胞壁较厚，并有光泽。（2）细胞特点：细胞稍长，含有显著加厚初生壁，其加厚部分多在细胞相互毗连角隅处，有植物细胞壁加厚在切向壁或近胞间隙部位。第19页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察l试验步骤5.分泌组织（1）取柑橘外果皮，观察其上透明小囊，挤压果皮，观察小囊中有什么物质溢出？将果皮制成切片，在显微镜下观察，小囊为一空腔，其中有什么物质？（2）细胞特点：是由细胞分化来特化细胞。这种细胞体积普通较相邻细胞大，形状各异，它们常呈单个细胞分散在植物体内其它较不特化细胞间，在各类器官中存在。第20页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察三、思索题1.初生分生组织、保护组织细胞之间有没有细胞间隙？2.木质部和韧皮部在输送过程中作用有什么区分？筛管和导管细胞是死细胞还是活细胞？3.厚角组织细胞是死细胞还是活细胞？第21页试验一试验一 植物徒手切片和植物各类组织观察植物徒手切片和植物各类组织观察l作业1.完成试验汇报第22页第23页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定一、植物组织水势测定 水势表示水化学势，水分在渗透系统中总是由 水势高处向水势低处流动。植物生活细胞是一个渗透系统，当将植物细胞或组织放入外界溶液中时，水分将以水势差为动力在二者间流动，最终到达动态平衡。假如植物组织水势小于外界溶液水势，植物细胞吸水，使外界溶液浓度增大；反之，植物细胞失水，使外液浓度变小。若植物组织与外界溶液水势相同，将不改变外部溶液浓度，此时外液渗透势就等于植物组织水势。第24页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定一、植物组织水势测定v试验原理 利用外界溶液浓度不一样其比重也不一样原理来确定与植物组织水势相同外液，依据公式计算植物组织水势。v试验方法 小液流法v试验目标 掌握植物组织水势测定方法，并了解渗透系统中水势大小是水分移动方向决定原因。第25页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定一、植物组织水势测定v试验器材 吸水纸、容量管（或10ml量筒）、试管、带盖小瓶、胶头细玻璃弯管、移液管、剪刀、橡皮塞、试管架、温度计、镊子。v试剂与材料 植物叶片（大叶黄杨叶）、1mol/L蔗糖溶液、染色试剂。第26页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定一、植物组织水势测定v试验步骤1.外界溶液配制与渗透作用配制0.10.8mol/L 8个梯度蔗糖溶液各10ml，注入8只试管中，并分别加上塞子后编号，作为对照组。将8只带盖小瓶编号，分别从对照组中相同编号试管中取蔗糖溶液4ml 注入各瓶，加上塞子作为试验组。用剪刀将植物叶片剪成大小相同（约0.5cm2）小块，每瓶中投入40小块（约占1/4溶液体积），塞好塞子，放置30min。在此期间摇动小瓶数次。用针尖挑取少许染色剂加入上述带盖小瓶中，摇匀，此时溶液为浅蓝色。第27页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定一、植物组织水势测定v试验步骤2.等渗溶液确定用胶头细玻璃弯管从各带盖小瓶中依次吸收少许浅蓝色溶液，并用吸水纸吸掉管外壁上溶液，然后将弯管伸入相同编号对照组试管液体中部，迟缓放出溶液一滴，观察有色液滴移动方向。若有色液滴向上移动，表明组织失水，使蔗糖溶液浓度降低、比重减小；若有色液滴向下移动，表明组织吸水，使蔗糖溶液浓度升高、比重增大；假如有色液滴静止不动，则表明蔗糖溶液与植物组织水势相等，统计该蔗糖溶液浓度。第28页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定一、植物组织水势测定v试验步骤3.结果计算 依据上述蔗糖溶液浓度，依据公式计算植物组织水势。计算公式：w=-iRTc 式中w为植物组织水势，以bar表示；i为解离系数，蔗糖是1；R为气体常数，0.083Lbar/molK；T为绝对温度，K（即273+t，t为试验室温度）；c为等渗溶液浓度，mol/L。第29页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定一、植物组织水势测定v思索1.小液流法测定植物组织水势时,为何操作时,应强调所用试管、毛细管应保持干燥?2.剪取植物叶片，并投入试管中时动作为何要快速？3.加入甲烯蓝不应太多？第30页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定二、植物组织渗透势测定v试验原理 当植物组织细胞内汁液与其周围某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内压力势为零时，细胞汁液渗透势就等于该溶液渗透势。这种渗透势相等溶液称为等渗溶液。该溶液浓度称为等渗浓度。当一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞等渗浓度介于刚才引发初始质壁分离最低浓度和尚不能引发质壁分离最高浓度之间溶液浓度。代入公式即可计算其渗透势。第31页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定二、植物组织渗透势测定v试验方法 质壁分离法v试验目标 观察植物组织在不一样浓度溶液中细胞质壁分离产生过程，了解其用于测定植物组织渗透势原理与方法。第32页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定二、植物组织渗透势测定v试验器材 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、刀片、酒精灯、滤纸、滴管、移液管、小培养皿。v材料与试剂 洋葱鳞片、1mol/L蔗糖溶液。第33页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定二、植物组织渗透势测定v方法步骤1.配制0.10.8mol/L浓度8个梯度蔗糖溶液各10ml，分别盛于小培养皿中，并加上盖子。2.从部位相近鳞片上斯取大小相近（约几个平方毫米）内表皮，从浓度高蔗糖溶液开始，依次每隔3min投放3片内表皮到一个浓度溶液中（方便有充分时间观察，并使组织在不一样溶液中处理时间一致），并使之完全浸没，室温下放置30min。第34页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定二、植物组织渗透势测定v方法步骤3.按浓度由高到低依次取出处理过表皮，放在有12滴对应浓度蔗糖溶液载玻片上，盖上盖玻片，在显微镜下观察质壁分离情况（每次镜检约100个细胞），并统计不一样浓度溶液处理下质壁分离程度。4.依据不一样溶液中植物细胞质壁分离程度，确定一个引发50%细胞角隅上出现质壁分离（作为初始质壁分离）溶液浓度，或确定引发细胞质壁分离最低浓度和不引发质壁分离最高浓度平均值，作为等渗浓度。用新溶液和植物材料进行重复试验过程，以确保结果准确性。第35页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定二、植物组织渗透势测定v结果计算 依据所确定等渗浓度，依据下式计算该植物组织平均渗透势。计算公式s=-iRTc 式中s为平均渗透势，以bar表示；i为解离系数，蔗糖是1；R为气体常数，0.083Lbar/molK；T为绝对温度，K（即273+t，t为试验室温度）；c为等渗溶液浓度，mol/L。第36页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定二、植物组织渗透势测定v思索题1.怎样提升质壁分离法测定植物组织渗透势试验准确性？2.不一样浓度NaCl可否用于测定植物组织渗透势？第37页试验二试验二 植物组织水势和渗透势测定植物组织水势和渗透势测定l作业 完成试验汇报第38页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定一、叶绿体色素提取、分离l试验原理 植物色素包含脂溶性叶绿体色素和水溶性细胞液色素。叶绿体色素是植物进行光合作用吸收光能主要物质基础。叶绿体色素主要包含叶绿素a、叶绿素b、叶黄素和胡萝卜素，它们与类囊体膜蛋白结合成色素蛋白复合体而存在。依据叶绿体色素脂溶性特征，惯用乙醇、丙酮等有机溶剂离析而从植物材料将其提取。叶绿体色素是由化学结构和相对分子质量不一样各种成份组成，依据它们在有机溶剂中溶解性和在吸附剂上吸附性差异，可分离出它们各组分。第39页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定一、叶绿体色素提取、分离v试验目标 以植物叶片组织为材料，提取叶绿体色素；以纸层析法分离其成份。v试验器材 天平、剪刀、研钵、离心机、玻璃棒、量筒、烧杯、滤纸、小烧杯。v材料与试剂 植物叶片、丙酮、碳酸钙粉、石英砂、层析液 按石油醚：丙酮（25：3）百分比配置（V/V）。第40页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定一、叶绿体色素提取、分离v试验步骤1.叶绿体色素提取称取新鲜植物叶片2 g，洗净，擦干，去中脉，剪碎后放入研钵中。加入少许石英砂和CaCO3，再加入无水丙酮10ml，研磨成匀浆，再加丙酮15ml，摇匀。离心，取上清液，即可得到叶绿体色素提取液（保留于暗处备用）。第41页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定一、叶绿体色素提取、分离v试验步骤2.叶绿体色素分离纸层析法层析样纸制备 将优质滤纸剪成3cm9cm长条，将一端剪成高约1cm三角形。点样 用细玻璃棒蘸取叶绿体色素提取液，于层析纸三角形一端在三角形底边上划一条样线，风干后在原处重复点样几次。展层 在小烧杯中加入35ml层析液，然后将层析纸已经点样一端放入小烧杯里，注意层析液不可触及样线，并盖好盖子，于阴暗处展层约10min，即可在层析纸上分辨出4种不一样清楚色层。用铅笔在层析纸上指出4种色层轮廓，并注明色层名称和颜色，附在试验汇报中第42页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定一、叶绿体色素提取、分离v思索1.严密提取色素时加入CaCO3有什么作用？2.色素扩散速度与什么相关？第43页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定二、叶绿体色素含量测定v试验原理 叶绿体色素溶液各组成成份在可见光谱中含有不一样特征吸收峰。所以，应用分光光度计在某一特定波长下所测定吸光度，依据经验公式即可计算出众素溶液中各色素浓度，不一样溶剂所提取色素吸收光谱有差异，所以，应使用不一样计算公式。叶绿体色素提取惯用丙酮和乙醇有机溶剂。用80%丙酮提取叶绿素a和叶绿素b以及类胡萝卜素分别在663nm、646nm和470nm波长下有最大吸收峰，而用95%乙醇提取则在665nm、649nm和470nm波长下含有最大吸收峰，据此所测得吸光度值代入不一样经验公式，计算出叶绿素a和b浓度，及叶绿素总浓度和类胡萝卜素总浓度，并依据所使用单位植物组织（鲜重、干重、或面积），计算出众素含量。第44页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定二、叶绿体色素含量测定v试验目标 掌握分光光度计法对植物叶绿体色素提取液中叶绿素a和b浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素总浓度测定与计算方法，以及植物材料中各种色素含量计算方法。v试验器材 分光光度计第45页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定二、叶绿体色素含量测定v试验步骤1.吸光度测定将色素提取液重新混匀。以丙酮溶液做空白对照，分别在波长为663、646和470nm下测定提取液吸光度值，即A663、A646和A470。第46页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定二、叶绿体色素含量测定v试验步骤2.结果计算叶绿素浓度计算 计算公式：Ca=12.21A663-2.81A646 Cb=20.13A646-5.03A663 CT=Ca+Cb=17.32A646-7.18A663 Cx.c=（1000A470-3.27Ca-104Cb）/229式中，Ca、Cb和CT、Cx.c分别为叶绿素a、b浓度和叶绿素及类胡萝卜素总浓度，mgL-1。第47页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定二、叶绿体色素含量测定v试验步骤2.结果计算叶绿体色素含量计算叶绿体色素含量第48页试验三试验三 叶绿体色素提取、分离及含量测定叶绿体色素提取、分离及含量测定l作业 完成试验汇报第49页试验四试验四 植物种子活力快速测定植物种子活力快速测定植物种子活力是指种子萌发出芽潜能，它决定种子品质和实用价值大小。测定种子活力常规方法是测定种子发芽率。种子发芽率是指在适宜条件下，要求时间内发芽种子占供试种子百分率。常规发芽率测定所需时间长，限制了在实际生产实践中应用。第50页试验四试验四 植物种子活力快速测定植物种子活力快速测定试验方法 TTC法（氯化三苯基四氮唑法）BTB法（溴麝香草酚蓝法）红墨水染色法 第51页试验四试验四 植物种子活力快速测定植物种子活力快速测定TTC法是利用含有活力种子呼吸时所产生NADH2和NADPH2与渗透胚细胞内TTC反应，将无色TTC还原成红色三苯基甲腙（TTF），从而使种胚着色（无生活力种子浸泡TTC时种胚不着色），以判别种子活力方法。BTB法是利用含有活力种子呼吸时所释放CO2溶于水后所解离成H+和HCO3-，使活细胞周围酸度增加，造成蓝色BTB转变为黄色（死种子不能使BTB变色），以判别种子活力方法。红墨水染色法是依据活种子胚细胞含有物质选择性吸收，用红墨水浸泡活种子其胚不被染色（而死种子胚细胞膜丧失半透性其胚可被染色），来判别种子活力方法。第52页试验四试验四 植物种子活力快速测定植物种子活力快速测定试验目标 掌握植物种子活力测定基本原理，及几个快速测定种子活力方法。试验器材 烧杯、培养皿、刀片、镊子、恒温箱、电炉、琼脂。材料与试剂 植物种子 0.5%TTC溶液（以少许酒精溶解后再以水定容）、0.1%BTB溶液（配制后需用滤纸过滤，滤液若为黄色，可滴加数滴氨水使之变为蓝色或蓝绿色，棕色瓶保留备用）、5%红墨水。第53页试验四试验四 植物种子活力快速测定植物种子活力快速测定试验步骤氯化三苯基四氮唑法（TTC法）将种子在3035温水中浸泡68h，使种子充分吸涨，呼吸加强。取吸涨种子100粒，用刀片沿种胚中央准确纵切为两半，二分之一置于培养皿中，另二分之一放入烧杯中。向烧杯中加水并在电炉上煮沸5min杀死种胚，然后将死种子转入另一培养皿中（作为对照观察）。在2个培养皿中分别加入适量0.5%TTC溶液，然后置于30 恒温箱中保温1h。用水漂洗后观察试验结果。凡胚被然为红色是活种子。计算活种子百分率。第54页试验四试验四 植物种子活力快速测定植物种子活力快速测定试验步骤溴麝香草酚蓝法（BTB法）按上述TTC法中相同步骤浸种。取0.1%BTB溶液100ml注入烧杯中，并加入剪碎琼脂1g，加热烧杯并搅拌，直至琼脂溶解，趁热倒入两个洁净培养皿中，制成含BTB琼脂凝胶薄层，冷却后备用。取吸涨种子100粒，在沸水中煮沸杀死种胚，并与另100粒吸涨种子分别整齐地平铺于两个琼脂凝胶培养皿中（间隔最少1cm）。将培养皿于3035恒温箱中保温24h，显色。在蓝色背景下观察两个培养皿中种子，如种胚附近有黄色晕圈则为活种子，不然为死种子。计算活种子百分率。第55页试验四试验四 植物种子活力快速测定植物种子活力快速测定试验步骤红墨水染色法按上述TTC法中相同步骤浸种。取已吸涨种子100粒，沿胚中线切为两半，将其中二分之一置于烧杯中，在沸水中煮沸杀死种胚。将两份半粒种子分别置于盛有5%红墨水培养皿中，浸泡染色10min。倒去红墨水，用水冲洗屡次，直至冲洗液无色为止。检验种子死活，凡种胚不着色或着色很浅为活种子，而种胚与胚乳显示相同程度着色为死种子。计算活种子百分率。第56页试验四试验四 植物种子活力快速测定植物种子活力快速测定作业 完成试验汇报第57页