土壤中分解尿素的细菌的分离和计数习题和答案.doc

2.2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 习题
1．在培养基中加入尿素(惟一氮源)，以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于(　　)
A．选择培养基 B．固体培养基 C．液体培养基 D．半固体培养基
2．实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是(　　)
A．链霉素能阻止结核菌的生长
B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效
C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效
D．链霉素可以用于治疗伤寒病人
3．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是(　　)
A．细菌个体小，真菌个体大 B．细菌易稀释，真菌不易稀释
C．细菌在土壤中数量比真菌多 D．随机的，没有原因
4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是(　　)
A．未接种的选择培养基新课标 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D．接种了的选择培养基
5．在涂布平板操作时错误的是(　　)
A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B．取少量菌液滴加在培养基表面
C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8 s～10 s再用
D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀
6．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养能分解尿素的细菌后，指示剂的颜色是(　　)
A．蓝色 B．红色 C．黑色 D．棕色
7．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做(　　)
A．鉴别培养基 B．加富培养基 C．选择培养基 D．基础培养基
8．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(　　)
①加尿素　②不加尿素　③加琼脂　④不加琼脂　
⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖　⑦加硝酸盐　⑧不加硝酸盐
A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦
9．在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，下列不属于厌氧细菌生存环境的是(　　)
A．土壤深层 B．人或动物体内寄生 C．真空 D．池塘淤泥
10．下列是关于检测土壤中细菌总数实验操作的叙述，其中错误的是(　　)
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
11．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是(　　)
A．以尿素为惟一氮源的培养基中加入二苯胺试剂B．以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂
C．以尿素为惟一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为惟一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
12．在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于(　　)
A．空白对照 B．标准对照 C．相互对照 D．条件对照
13．某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(“目的菌”)。实验的主要步骤如下。请分析回答问题：
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选__________，这种培养基属于__________培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的__________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是__________。
(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量__________。
(4)转为固体培养时，常采用__________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。
(5)若要研究“目的菌”的生长规律，可将单个菌落进行液体培养，采用__________的方法进行计数，以时间为横坐标，以________________________________________________________________________为纵坐标，绘制生长曲线。
(6)实验结束时，使用过的培养基应该进行__________处理后，才能倒掉。
14．某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起。该同学设计下面的实验，分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。
(1)实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。
(2)材料用具：(略)
(3)实验步骤
①制备两种培养基，将两种培养基各自分成两份，依次标号A、a和B、b。
②________________________________________________________________________，
并在25 ℃条件下培养__________天。
③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养3～4天。
(4)请问答
①本实验中，配制的分离用的培养基成分特点：A、a是__________培养基，B、b是__________培养基，根据上述原理配制的培养基属于__________培养基。
②根据所需目的配制上述培养基时除营养要协调外还应注意
________________________________________________________________________。
③实验步骤中第③步的目的是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
④圆褐固氮菌与酵母菌在结构上的主要差异为
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
⑤青霉素抑制圆褐固氮菌等细菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。请据此推测不影响酵母菌等真菌生长繁殖的原因是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。

2.2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 习题答案
1.解析：选A。选择培养基是从功能上对培养基进行分类的，B、C、D三项所述的培养基是根据培养基的物理状态进行分类的。题述培养基能分离出以尿素为惟一氮源的细菌，故是一种选择培养基。
2. 解析：选D。从图中可以看出，这是含有链霉素的选择培养基，接种的三种细菌中，霍乱菌和结核菌都可以被杀灭，并且链霉素对结核菌杀灭的有效程度大于霍乱菌，而伤寒菌照常生长不受影响，所以选项D错。
3. 解析：选C，土壤中的微生物大约70%～90%是细菌，真菌的数量要比细菌少。样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。
4．解析：选C。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，应选牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照遵循的是单一变量原则，所以与选择培养基一样接种、培养。
5. 解析：选A。涂布平板时，首先要对涂布器进行灭菌处理，方法是把沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上点燃，冷却后使用；然后把0.1毫升的菌液滴加到平板上，用涂布器涂布均匀。如果涂布器在酒精灯火焰上灼烧直到烧红，不经冷却，则涂布器的温度很高，在使用时就会杀死要接种的细菌。
6. 解析：选B。尿素被细菌分解形成碱性物质氨，在碱性环境下，酚红指示剂变红。
7. 解析：选C。基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需基本营养物质的培养基，例如牛肉膏蛋白胨培养基；加富培养基一般用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物；鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊的化学物质，微生物的代谢产物能与该物质产生特定的化学反应，产生明显的特征变化，如出现某种特定颜色等，从而鉴别出微生物种类；选择培养基是在培养基中加入某种物质，促进需要的微生物生长、抑制不需要的微生物生长，从而选择出某种微生物。
8. 解析：选C。土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶，将尿素分解生成氨，利用尿素中的氮合成自身有机物。培养基中只加尿素，分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长；分离微生物要用固体培养基；土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物，需要加葡萄糖作为碳源。
9. 解析：选C。厌氧型微生物的生长繁殖不仅需要厌氧环境，但同时还需要生存所必需的各种营养物质，如碳源、氮源、水、无机盐等。真空环境只能提供无氧环境，却不能提供其他营养物质。
10. 解析：选D。本题考查的是土壤微生物总数的计数，所以培养所使用的培养基就应该是标准培养基，并要经过高压蒸汽灭菌处理；涂布时要对样本的水溶液进行稀释，一般选取104、105、106倍的土壤稀释液各0.1 mL进行涂布，为了检查平板培养基是否制备合格，要同时把一培养基接种少量无菌水，以作空白对照；培养一段时间后，如果平板上菌落个数在30～300之间，即可把该组所有平板的菌落计数，然后取其平均值，即可计算出土壤细菌的总数。而D项是菌落数在300以上，故D项错。
11. 解析：选B。尿素分解细菌的特点是可以产生脲酶，能把尿素分解为氨，而氨溶解于水后使溶液呈碱性，所以可以用酚红遇碱性变为红色的颜色反应来检测分解尿素细菌的存在。
12. 解析：选D。乙组和甲组实验仅是培养条件不同，因此为条件对照。
13. 解析：题干中首先说明了化合物A是有机物，后来在培养基中又增加了磷酸盐、镁盐以及微量元素，通过比较各培养瓶中化合物A的多少，选出“目的菌”，由此还可推断出“目的菌”所需碳源和氮源都来自化合物A，是异养型。获得“目的菌”后，再进行扩大培养，培养过程中及培养结束后注意灭菌。
答案：(1)“目的菌”　选择　(2)化合物A　异养需氧型　(3)减少　增加　(4)平板划线　(5)定期取样　“目的菌”数目的对数　(6)灭菌
14. 解析：本题综合考查微生物培养、分离以及有关的实验设计问题，圆褐固氮菌是自生固氮菌，在无氮源的培养基上可以生长，但是可以被青霉素杀灭；酵母菌是单细胞真菌，在无氮源培养基上不能生长，但是青霉素不能杀灭酵母菌，所以使用无氮源的培养基和加入青霉素的培养基都可以把它们分离出来。因为圆褐固氮菌是细菌，所以没有真正的细胞核，其细胞壁成分是肽聚糖；酵母菌是真核细胞，有真正的细胞核，细胞壁的成分也和细菌不同，主要是多聚糖，还有少量蛋白质和脂类。
答案：(3)②分别在A、B培养基上接种等量的混合的微生物　3～4
(4)①无氮　含青霉素的　选择 ②pH要适宜
③分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌 ④圆褐固氮菌无成形的细胞核
⑤细菌细胞壁和真菌细胞壁的化学组成不同