水杨酸钠药代动力学实验分析培训课件.doc
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1、此文档仅供收集于网络,如有侵权请联系网站删除全血水杨酸钠药物代谢动力学参数的测定一、 实验目的:掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法,掌握用分光光度法测定水杨酸钠(sodium salicylate)的血药浓度。二、实验动物:家兔 体重2.585kg 性别:雌三、 实验药品:20%乌拉坦、 生理盐水、0.5%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、蒸馏水水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸(salicylic acid),与三氯化铁生成一种紫色络合物。该络合物在520nm 波长下比色,其光密度与salicylic acid 浓度成正比。反应式为:四、 实验器材:电子天
2、平、兔台、5ml和1ml枪头、5ml注射器、6号针头、手术器械、动脉插管、棉球、头皮针、10ml离心管、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器五、实验方法1、 取10支10ml试管,用0.5%肝素润湿管壁。2、 家兔称重,从兔耳缘静脉注射20%乌拉坦(1g/kg体重,注射了13ml),待兔麻醉后,将其仰卧,先后固定四肢及兔头(此时家兔惊醒,补助乌拉坦6ml)。3、 剪去颈前部兔毛,正中切开皮肤5-6cm,用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉,暴露器官及与气管平行的颈动脉。分离颈动脉,行颈动脉插管。手术完毕后,用温热的生理盐水纱布覆盖手术创口。静脉注射肝素,剂量为1000U/kg体重(约为2.58ml
3、)。4、 取1支10ml试管,家兔颈动脉取血1.5ml,摇匀试管内血液,防止凝血。5、 沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg(因注射过程中发现部分药品漏出,补注了一部分,估计约为3.9ml)。于注射后1、3、5、10、20、50、80、110min分别颈动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。6、 取10支10ml离心管,水杨酸注射前取血管子标为“对照”,水杨酸注射之后不同时间取血管标为相应“取血时间”,另有1个管子没有取血,直接加入配置好的0.06%水杨酸钠标准液标为“标准”,按下表加入样品及试剂:试管号10%三氯制酸(ml)全血(ml)0.06%水杨酸钠(ml)蒸馏水(ml)
4、对照4101标准4110各取血时间41017、 各试管用涡旋混匀器充分混匀,2000rpm,离心10min。8、 各试管取上清液3ml加入另一套干净试管中,再加入10%三氯化铁0.3ml,混匀显色。以对照管调零,再722分光光度计上读取520nm的OD值。9、 求出水杨酸钠在家兔体内的血药浓度(Y)。先求出标准管浓度(Y0)与OD值(X0)的比值(K),K=Y0/X0, Y=XK。10、绘出药-时曲线,以水杨酸钠浓度的对数值为纵坐标,对应时间横坐标作图,分析 水杨酸钠药动力学模型及药动学参数计算。六、 注意事项1. 颈总动脉插管术。2. 取血前注意用肝素润湿注射器和针头,取血后注意用肝素封管,
5、避免血液凝固。3. 注意取药时间的精准性。4. 注意先放掉残留在管中的液体后再放出的血才为该被收集的血液,不要误取了管中残留的血液和肝素等。5. 离心后不要用力摇晃细管避免沉淀物溶解。6. 每次加样时剂量一定要准确。七、 实验记录采血时间校零前实测数据校零后数据计算所得药物浓度(mg/ml)对照0.18500标准0.2260.0410.06010.260.0750.10930.2290.0440.06450.2330.0480.070100.2280.0430.063200.2220.0370.054500.165-0.020-0.029800.163-0.022-0.0321100.154-
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