条华蜗牛破厣前后体内总糖含量的变化.pdf
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1、北京农学院学报2 0 2 4,39(1):2 3-2 8Journal of Beijing University of Agriculturehttp:/doi:10.13473/ki.issn.1002-3186.2024.0105条华蜗牛破前后体内总糖含量的变化张民照,覃晓春,赵晨,张爱环*(北京农学院生物与资源环境学院/农业农村部华北都市农业重点实验室,北京10 2 2 0 6)摘要:【目的】了解条华蜗牛破前后体内总糖含量变化规律,为深人研究蜗牛破生化机理提供参考。【方法】用葱酮-硫酸比色法测定了两个体质量组条华蜗牛在破、休眠、取食或饥饿等条件下足和内脏的总糖含量。【结果】条华蜗牛破后
2、体内含糖量升高,体质量组IV蜗牛足、内脏含糖量都高于相应体质量组I。破前蜗牛足内含糖量与破后的差异显著(P0.05),而内脏的差异不显著。休眠蜗牛体内含糖量随休眠天数增加有降低的趋势,除体质量组I蜗牛足内含糖量休眠1d后(2 7.6 2 g/mg)显著高于5d15d 外,其他休眠时间之间差异都不显著。蜗牛取食后,足和内脏含糖量变化趋势基本类似,都是取食12 h2 4h 后增加,然后有所下降。除体质量组IV足外,取食2 4h后都显著高于取食12 h和36 h。活动蜗牛体内含糖量随饥饿时间延长有降低趋势,饥饿36 h后含糖量均显著低于饥饿12 h。【结论】条华蜗牛破前后体内总糖含量变化与多个因素有
3、关,总糖量变化规律反映了蜗牛破的生理生化特征。关键词:条华蜗牛;破;总糖含量;体质量;取食;饥饿中图分类号:Q956文章编号:10 0 2-318 6(2 0 2 4)0 1-0 0 2 3-0 6 文献标志码:AVariation of total sugar content in the body of Cathaica fasciolabefore and after epiphragm-breakingZHANG Minzhao,QIN Xiaochun,ZHAO Chen,ZHANG Aihuan(College of Bioscience and Resource Environm
4、ent/Key Laboratory of Urban Agriculture(North China),Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Beijing University of Agriculture,Beijing 102206,China)Abstract:ObjectiveJ To understand the variation characteristics of the total sugar content in the body of Cathaica fasciola be-fore and after epiphrag
5、m-breaking,and to provide information for further research on the biochemical mechanism ofepiphragm-breaking.MethodsJThe total sugar content in the feet and viscera in two weight groups of C.fasciola under dif-ferent conditions,including epiphragm-breaking,the duration of dormancy,feeding and starva
6、tion,were measured with theanthrone colorimetry.ResultsJThe total sugar content in the body of dormant snails increased after epiphragm-breaking,which was higher in the snail feet and viscera in weight group IV than that in weight group I.There was a significant differencein the sugar content of sna
7、il feet between before and after epiphragm-breaking,while no significant difference was found in theviscera(P0.05).The total sugar content in dormant snails decreased with the increase of dormant duration,the differencesbetween dormant durations were not significant except for the significant differ
8、ences between the dormant durations of 1 d(27.62 g/mg)and 5 d-15 d in the feet of weight group I.After feeding,the variation of the total sugar content in the feet andviscera had basically similar tendency,which all increased after feeding for 12-24 h then decreased after feeding for more than24 h E
9、xcept for the feel in weight group IV,the total sugar content after feeding for 24 h was significantly higher than those for12 h and 36 h.The total sugar content in the feet and viscera of active snails decreased with the increase of starvation duration,which was significantly lower after being star
10、ved for 24 h than 12 h.Conclusion The variation of total sugar content in thebody of C.fasciola before and after epiphragm-breaking was affected by many factors,which reflected the physiological char-acteristics in epiphragm-breaking.收稿日期:2 0 2 3-12-15基金项目:北京市农委项目“北京市农委2 0 16 年北农菜篮子新型生产经营主体提升项目”(2 0
11、 16 0 3)第一作者:张民照,博士,副教授,研究方向为昆虫生态学及害虫防治,E-mail:m i n z h a o z h a n g t o m.c o m通信作者:张爱环,女,博士,副教授,研究方向为昆虫多样性及害虫防治,E-mail:z h a n g a i h u a n 12 6.c o m24北京农学院学报第39卷Keywords:Cathaica fasciola;epiphragm-breaking;total sugar content;body weight;feeding;starvation条华蜗牛属软体动物门腹足纲柄眼目巴蜗牛科,广泛分布,食性较杂,给大田和设
12、施栽培作物带来较大损失1-3。条华蜗牛虽是常见蜗牛,但对其研究甚少,目前主要调查了其分布、为害及寄主种类4-7 。近年来,对条华蜗牛生物学研究发现其翻身习性8 和假死性9 与蜗牛体质量、环境温度、光照强度、取食与饥饿相关;破行为与体质量、水温及水深有关10 ;对多种植物取食量与体质量、植物类型有关11。在不同树种中,最喜栖息树种为槐树,分布数量随树干高度而增加,且呈聚集分布12 。自然环境下,条华蜗牛为适应某些恶劣环境会用膜封闭螺口,并进入休眠或滞育状态,在适宜环境下又重新破开始活动。此行为是应对干旱、食物及温度胁迫的一种生存策略。蜗牛封破类似昆虫等其他动物的休眠或滞育。有关昆虫休眠、滞育过程
13、中体内生化物质变化研究甚多,其中糖类参与滞育解除后各项生命活动而备受关注,如棉铃虫越冬蛹随滞育强度深人糖原浓度逐渐降低13。斑蛾滞育虫体糖原浓度是非滞育虫体2 多倍141。麦红吸浆虫不同时期滞育幼虫总糖含量明显不同,滞育前明显高于人土滞育期间15。作蚕5龄幼虫春、秋期总糖含量均随生长发育而增加,且秋期含量略高于春期16 。桃小食心虫滞育初期总糖含量较高,且快速降低,随后渐慢;滞育最深时总糖含量降到最低;滞育解除时含量上升17。茶足柄瘤蚜茧蜂滞育蛹总糖与非滞育蛹差异显著,滞育蛹总糖浓度高于非滞育蛹,但随滞育时间延长总糖浓度逐渐降低18 。食蚜瘘蚊滞育解除后成虫糖原含量低于非滞育的,随滞育发展总糖
14、、糖原含量呈下降趋势19蜗牛体内糖类为其各种生命活动提供能量,是许多生理和行为必需的最基本物质之一。条华蜗牛在破过程中,体内糖类含量可能存在某些变化,而目前对其破庵前后生化物质变化的研究尚未见报道,为此本文用葱酮一硫酸比色法对条华蜗牛破、休眠、取食、饥饿等条件下蜗牛足和内脏总糖含量的变化进行研究,以揭示总糖类物质与条华蜗牛休眠破的相关性,为了解蜗牛破生化机理及预测预报和防治提供理论依据。1材料与方法1.1蜗牛采集与饲养2013年7 至10 月,在北京农学院校园及其周边大量采集大小不等的活动或休眠期蜗牛,分别置塑料盒(2 2 cmX15 cm8cm)内。活动蜗牛在不喂食的情况下,不久形成膜封闭螺
15、口而休眠。室内蜗牛饲养则将30 50 头的蜗牛置塑料盒内,盒底铺一层湿纱布,将用水清洗过的油菜叶置盒内,并盖盖防蜗牛逃逸,盒盖用解剖针均匀扎2 0 个小洞。每天清理盒内残存叶片及粪便,更换一次纱布及饲料,并保持纱布湿润。蜗牛按体质量分成4个体质量组:0.1 0.3 g组I、0.3 0.5g 组、0.5 0.7g组,0.7 0.9 g 组IV。选取其中组I和IV大小基本一致的蜗牛进行实验。1.2葡萄糖标准曲线制作参考相关文献2 0-2 1配置各试剂及制作标准曲线。葱酮、浓硫酸、葡萄糖、三氯乙酸等试剂均为国产分析纯。标准曲线制作步骤是:10 mL离心管内分别加10 0 g/mL葡萄糖标液0、0.2
16、、0.4、0.6、0.8和1.0 mL,用10%三氯乙酸补足至1mL,各离心管加0.2%葱酮试剂4mL,混匀,沸浴10 min,流水冷却2 0 min。在6 2 5nm波长下,空白管液调零,UV-2000分光光度计(尤尼柯(上海)仪器有限公司)测定吸光度,重复3次。以OD625为纵坐标糖含量为横坐标绘制标准曲线。1.3蜗牛总糖提取及总糖的测定总糖抽提参考文献2 0 的方法。休眠或活动蜗牛剪去外壳,并快速切下最外面的足和壳内顶端深色内脏,分别置1.5 mL离心管内,千分之一电子天秤称净重。加2 0 L10%三氯乙酸,电动棒研磨5min,研磨棒用2 8 0 L10%三氯乙酸洗2次。50 0 0 r
17、pm离心5min,取上清于新1.5mL离心管内,沉淀加40 0 L10%三氯乙酸振荡混匀,再离心1次,合并2 次上清。取蜗牛上清抽提液10 0L稀释10 倍到1mL,按1.2 标准曲线糖含量测试步骤,测定吸光度,计算样品中粗多糖含量。每处理测试5头蜗牛,重复3次。1.4蜗牛破前后体内总糖含量的测定选取体质量组I和IV内活动蜗牛分别置干燥塑料盒内,4h后选各体质量组已休眠的蜗牛置新干燥塑料盒内,室内存放5d,选取一部分休眠蜗牛做破前的蜗牛处理,选取另一部分休眠蜗牛置培养皿内用水淹没壳口,15min后选活动蜗牛做破后的蜗牛处理,破前后的蜗牛按1.3 步骤测定两个体质量组蜗牛足和内脏总糖含量。202
18、4年第1期1.5休眠时间对蜗牛体内总糖含量的影响选取体质量组I和IV内的活动蜗牛分别置干燥塑料盒内,4h后选各体质量组已休眠蜗牛分别置4个干燥塑料盒内,各盒标注存放日期,室内干燥处分别继续存放1.d、5d、10 d、15d,到期后取出蜗牛分别用1.3方法进行含糖量测定。1.6取食与饥饿对蜗牛体内总糖含量的影响选取体质量组I和IV内的活动蜗牛分别置干燥塑料盒内,4h后选各体质量组已休眠的蜗牛置新干燥塑料盒内,室内存放5d,将休眠蜗牛置培养皿内用清水浸泡,15min后选取破活动蜗牛做取食和饥饿实验。两体质量组活动蜗牛分别置3个塑料盒内,按1.1饲养方法用油菜喂食12 h、2 4h、36h,到期后选
19、取其中活动蜗牛用1.3方法测定总糖含量。两体质量组活动蜗牛分别各置底部铺有湿纱布的3塑料盒内,不喂食,保持盒内纱布湿润,饥饿12h、2 4h、36 h 后挑选其中活动蜗牛用1.3方法测定总糖含量。1.7数据处理根据待测液的吸光值,在标准曲线上查出相应的糖含量,按下式计算供试蜗牛糖含量的实际含量:含糖量(g/mg)=从标准曲线查得的糖含量(g/mL)X 测试液体积(mL)X 稀释倍数/虫重(m g)。处理间差异显著性(Duncan氏新复极差法)Tab.1 Variation of the total sugar content in the body of C.fasciola before a
20、nd after epiphragm-breaking组别Group1V注:表中数值是所有重复的平均数土标准误;大、小写字母分别表示表格的同一纵列中、同一行中所有平均数之间的差异显著性P1和P2分别为0.0 5和0.0 1水平显著性;表2,3,4同Note:Values in table are mean SE based on all replications.Capital and small letters indicate the significance between all the averageswithin the same column and row in the tab
21、le,respectively.Pi and P2 stand for the significance at 0.05 and 0.01 levels,respectively.The samefor the following table2,3,42.3不同休眠时间对蜗牛体内总糖含量的影响蜗牛体内总糖含量随休眠时间的变化如表2 所示。从表中可看出,相同体质量组内,足和内脏总含糖量随休眠天数增加有降低的趋势。体质量组I蜗牛在休眠1d后足内含糖量为2 7.6 2 g/mg,极显著高于其他休眠时间(515d)。两体质量组内脏及体质量组IV足在各休眠天数之间无显著差异。张民照等:条华蜗牛破前后体内
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