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巫山县庙宇党参地上部分与根中氨基酸和微量元素的含量测定及对比分析.pdf
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1、基础研究巫山县庙宇党参地上部分与根中氨基酸和微量元素的含量测定及对比分析*郑慧慧1,朱如勇2,刘千桢3,徐冲2,祝慧凤4(1.重庆市中医院药剂科,重庆 4 0 0 0 2 1;2.重庆市中医院制剂中心,重庆 4 0 0 0 2 1;3.重庆医科大学中医药学院,重庆 4 0 0 0 1 6;4.西南大学药学院 中医药学院,重庆 4 0 0 7 1 6)摘要:目的 测定并比较分析巫山县庙宇党参地上部分与根中氨基酸和微量元素的含量。方法 提取分离获得庙宇党参地上部分与根的提取物,根据国家药典标准,分别用全自动氨基酸分析仪和原子吸收分光光度计测定其中的氨基酸和微量元素。结果 庙宇党参地上部分和根均检出
2、1 7种氨基酸,其中地上部分水解氨基酸组分总量为(7 7.7 26.8 3)m g/g,根水解氨基酸组分总量为(3 8.9 89.3 2)m g/g,庙宇党参地上部分水解氨基酸含量明显高于根。庙宇党参地上部分和根均检出1 3种微量元素,地上部分微量元素总量为(9 1 1.5 3 22 9.9 8 3)m g/k g,根微量元素总量为(9 9 2.3 6 62 4.9 9 4)m g/k g,庙宇党参地上部分微量元素含量是根的9 1.8 5%。结论 庙宇党参地上部分氨基酸和微量元素组成多样,含量丰富,营养价值高,具有综合应用和开发价值。关键词:庙宇党参;氨基酸;微量元素;含量测定;对比分析D O
3、 I:1 0.1 1 9 8 6/j.i s s n.1 6 7 3-8 7 3 X.2 0 2 4.0 1.0 7 中图分类号:R 2 8 2 文献标志码:AD e t e r m i n a t i o n a n d c o m p a r a t i v e a n a l y s i s o f a m i n o a c i d a n d t r a c e e l e m e n t c o n t e n t s i n t h e a b o v e g r o u n d a n d r o o t p a r t s o f M i a o y u C o d o n
4、o p s i s p i l o s u l a i n W u s h a n c o u n t yZ h e n g H u i h u i1,Z h u R u y o n g2,L i u Q i a n z h e n3,X u C h o n g2,Z h u H u i f e n g4(1.D e p a r t m e n t o f P h a r m a c y,C h o n g q i n g T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e H o s p i t a l,C h o n g q i n g
5、4 0 0 0 2 1,C h i n a;2.P r e p a r a t i o n C e n t e r,C h o n g q i n g T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e H o s p i t a l,C h o n g q i n g 4 0 0 0 2 1,C h i n a;3.C o l l e g e o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e,C h o n g q i n g M e d i c a l U n i v e r
6、s i t y,C h o n g q i n g 4 0 0 0 1 6,C h i n a;4.C o l l e g e o f P h a r m a c e u t i c a l S c i e n c e s,S o u t h w e s t U n i v e r s i t y,C h o n g q i n g 4 0 0 7 1 6,C h i n a)A b s t r a c t:O b j e c t i v e T o d e t e r m i n e a n d c o m p a r e t h e c o n t e n t s o f a m i n
7、o a c i d s a n d t r a c e e l e m e n t s i n t h e a b o v e g r o u n d a n d r o o t p a r t s o f M i a o y u C o d o n o p s i s p i l o s u l a i n Wu s h a n c o u n t y.M e t h o d s E x t r a c t s o f t h e a b o v e g r o u n d a n d r o o t p a r t s o f M i a o y u C o d o n o p s i s
8、 p i l o s u l a w e r e o b t a i n e d a n d i s o l a t e d.A c c o r d i n g t o t h e s t a n d a r d s o f t h e C h i n e s e P h a r m a c o p o e i a,t h e a m i n o a c i d s a n d t r a c e e l e m e n t s w e r e d e t e r m i n e d u s i n g a n a u t o m a t i c a m i n o a c i d a n a
9、 l y z e r a n d a t o m i c a b s o r p t i o n s p e c t r o p h o t o m e t e r,r e-s p e c t i v e l y.R e s u l t s O v e r a l l,1 7 a m i n o a c i d s w e r e d e t e c t e d i n b o t h t h e a b o v e g r o u n d a n d r o o t p a r t s o f M i a o y u C o d o n o p s i s p i-l o s u l a.T
10、 h e t o t a l c o n t e n t o f h y d r o l y z e d a m i n o a c i d c o m p o n e n t s i n t h e a b o v e g r o u n d p a r t a n d t h e r o o t p a r t w a s(7 7.7 26.8 3)m g/g a n d(3 8.9 89.3 2)m g/g,r e s p e c t i v e l y.T h e c o n t e n t o f h y d r o l y z e d a m i n o a c i d s i n
11、 t h e a b o v e g r o u n d p a r t w a s s i g n i f i-c a n t l y h i g h e r t h a n t h a t i n t h e r o o t p a r t.T h i r t e e n t r a c e e l e m e n t s w e r e d e t e c t e d i n b o t h t h e a b o v e g r o u n d a n d r o o t p a r t s.T h e t o t a l c o n t e n t o f t r a c e e l
12、 e m e n t s i n t h e a b o v e g r o u n d p a r t a n d t h e r o o t p a r t w a s(9 1 1.5 3 22 9.9 8 3)m g/k g a n d(9 9 2.3 6 62 4.9 9 4)m g/k g,r e s p e c t i v e l y.T h e c o n t e n t o f t r a c e e l e m e n t s i n t h e a b o v e g r o u n d p a r t o f M i a o y u C o d o n o p s i s
13、 p i l o s u l a a c c o u n-t e d f o r 9 1.8 5%o f t h a t i n t h e r o o t p a r t.C o n c l u s i o n T h e a b o v e g r o u n d p a r t o f M i a o y u C o d o n o p s i s p i l o s u l a c o n t a i n s a d i v e r s e r a n g e o f a m i n o a c i d s a n d t r a c e e l e m e n t s,w i t h
14、 a b u n d a n t c o n t e n t a n d h i g h n u t r i t i o n a l v a l u e,m a k i n g i t v a l u a b l e f o r c o m p r e-h e n s i v e a p p l i c a t i o n a n d d e v e l o p m e n t.K e y w o r d s:M i a o y u C o d o n o p s i s p i l o s u l a;Am i n o a c i d s;T r a c e e l e m e n t s;
15、C o n t e n t d e t e r m i n a t i o n;C o m p a r a t i v e a n a l y s i s.党参性味甘平,归脾肺经,有健脾益肺、养血生津的功效,是临床常用的大宗补益类中药材。庙宇党参系川党参,是重庆市巫山县庙宇镇独有的全国“四大名党参”之一,明清时期就出口东南亚,历史悠久1。自古以来党参均以根入药,地上部分被丢弃。通过实际测算,党参地上部分干重约占党参的7 0%2。课题组前期研究2发现,巫山庙宇党参地上、地下部分主要有效组分一致:地上部分党参炔苷、党参多糖和党参皂苷含量分别约占地下部分的4 3%、1 0%和2 9%。文献研究3提示
16、,修剪控制党参的地上部分还有助于其药用部位根的生长,因此有效开发党参地上部分,将会避免每年大量的资源24保健医学研究与实践2 0 2 4年1月第2 1卷第1期 H e a l t h M e d R e s&P r a c J a n.2 0 2 4 V o l.2 1 N o.1*基金项目:重庆市科卫联合中医药科技项目-重点项目(Z Y 2 0 1 8 0 1 0 0 2);重庆市中医药重点建设学科西南大学康复学(2 0 2 1-4 3 2 2 1 9 0 0 4 4)。第一作者:郑慧慧,E-m a i l:z h e n g_h u i h u i 1 6 3.c o m。通信作者:祝慧凤
17、,E-m a i l:z h f b s c i 1 2 6.c o m。浪费。目前相关领域对党参地上部分与根中氨基酸和微量元素的对比分析关注不足。氨基酸和微量 元 素 不 仅 是 中 药 材 发 挥 中 药 药 效 的 有 效 成分4-5,而且具有良好的营养价值。本研究以庙宇党参为例,利用L-8 8 0 0型全自动氨基酸分析仪和原子吸收分光光度计分别测定氨基酸和微量元素的种类和含量,分析比较巫山庙宇党参地上部分与根的异同,从营养成分的角度解读其地上部分的营养价值和药用价值。1 材料与方法1.1 药材 庙宇党参药材采自重庆市巫山县庙宇镇,经重庆市中药研究院彭锐研究员鉴定为桔梗科植物川党参的地上
18、部分和根,分别将庙宇党参地上部分和根低温干燥,粉碎,过6 0目筛,样品粉末于6 0 干燥至恒重,备用。1.2 主要仪器及试剂L-8 8 0 0型全自动氨基酸分析仪(日本日立);T A S-9 9 0原子吸收分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);微波消解仪(意大利麦尔斯通E THO S);微机化极 谱仪7 9 7(瑞 士 万 迪 公 司);QU I NT I X 6 5-1 C N电子天平 赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;M S 2 0 5 DU电子天平(重庆市瑞利电子仪器设备有限公司);HH-S 6数显恒温水浴锅(上海双捷实验设备有限公司);QH-1 0 1-2 A电热恒温鼓风干燥箱(
19、上海一恒科学仪器有限公司);A X LM 1 8 2 0-2阿修罗实验室超纯水机;硝酸为分析纯试剂;盐酸为分析纯试剂。1.3 方法1.3.1 氨基酸含量测定 (1)分析条件。分离柱:4.6 mm6 0 mm,洗脱液流速0.4 m L/m i n,柱温7 0,柱压1 2.6 2 7 MP a;反应柱:茚三酮及茚三酮缓冲液流速0.3 5 m L/m i n,柱温1 3 5,柱压1.0 7 8 M p a。1个样品分析周期5 3 m i n1。(2)水解样品前处理。准确称取样品1 5 0 m g于1 51 5 0 mm试管中,向盛有样品的试管中加入1 0 m L 6 m o l/L盐酸,振荡混匀。用
20、酒精喷灯把该试管口下1/3处拉细到46 mm,抽真空1 0 m i n后封管。处理过的试管置(1 1 01)恒温烘箱中沙浴水解2 2 h,拿出冷至室温,摇匀过滤,取1 m L滤液于5 0 m L烧杯中,用6 0 恒温水浴蒸干滤液,加入0.0 2 m o l/L盐酸稀释2倍,用0.2 2 m滤膜过滤上机分析。1.3.2 微量元素含量测定(1)标准曲线法。根据中国药典标准,在仪器推荐的浓度范围内,分别制备含待测元素不同浓度的对照品溶液和供试品溶液,同时以相应试剂做空白对照溶液。依次测定空白对照溶液和各浓度对照品溶液的吸光度,以每一浓度3次吸光度读数的平均值为纵坐标,相应浓度为横坐标,绘制标准曲线,
21、从标准曲线上查得供试品溶液的浓度,计算被测元素含量。(2)标准溶液的配置。分别精密量取对照品标准贮备液适量,用2%硝酸溶液制成不同浓度的一系列标准溶液。分别精密量取l m L,精密加含1%磷酸二氢铵和0.2%硝酸镁的溶液0.5 m L,混匀,精密吸取2 0 L注入石墨炉原子化器,测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。(3)供试品溶液的制备。供试品粗粉(过6 0目筛)0.5 g,精密称定,置聚四氟乙烯消解罐内,加硝酸35 m L,混匀,浸泡过夜,盖好内盖,旋紧外套,置适宜的微波消解仪内,进行消解(按仪器规定的消解程序操作)。消解完全后,取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸气
22、挥尽,并继续缓缓浓缩至2 3 m L,放冷,用水转入2 5 m L量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得。同法同时制备试剂空白溶液。2 结果与分析2.1 庙宇党参地上部分和根的氨基酸图谱分析 由图1和图2水解氨基酸分析图谱可知,1 7种氨基酸峰得到了较为明显的分离,峰面积适宜,表明所选分离方法、参数等合理;除半胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、组氨酸峰较小,其余峰分离较好,面积较大。图1 庙宇党参根水解氨基酸分析图谱34保健医学研究与实践2 0 2 4年1月第2 1卷第1期 H e a l t h M e d R e s&P r a c J a n.2 0 2 4 V o l.2 1 N o.1 图2 庙宇党
23、参地上部分水解氨基酸分析图谱2.2 庙宇党参地上部分和根的氨基酸含量分析氨基酸是人体必需的营养物质,具有广泛的生物学功能,它可作为信号分子广泛参与对多种生理功能的维持与调控,并在D NA的转录、翻译、翻译后修饰等多个层面上发挥作用6-9。庙宇党参地上部分和根均检出1 7种氨基酸,其中地上部分水解氨基酸组分总量范围为7 0.8 98 4.5 5 m g/g,平均(7 7.7 2 6.8 3)m g/g;根水解氨基酸组分总量范围为2 9.6 6 4 8.3 0 m g/g,平均(3 8.9 8 9.3 2)m g/g,庙宇党参地上部分水解氨基酸含量明显高于根。庙宇党参地上部分不同种类氨基酸含量排序
24、与根基本一致。从单个氨基酸含量来看,地上部分中谷氨酸含量最高,是根中谷氨酸含量的1.7 2倍,其后依次是天门冬氨酸和亮氨酸,分别是根中含量的2.5 5倍和3.1 8倍,地上部分脯氨酸含量是根中的2.4 2倍,地上部分精氨酸含量占根的4 4.5 2%。庙宇党参地上部分和根中含量最少的氨基酸均是半胱氨酸,分别占总量的0.5 3%和0.4 4%,详见表1。2.3 必需氨基酸(E A A)组成分析人体E AA在机体内发挥着重要的生理作用,对个体生长发育和代谢调控起着十分重要的作用1 0-1 1。从表1可知,庙宇党参地上部分和根均含有7 种人体E AA,地上部分E AA含量范围为2 7.2 83 4.4
25、 6 m g/g,平均(3 0.8 73.5 9)m g/g;根中E AA含量范围为9.6 21 2.2 0 m g/g,平均(1 0.9 11.2 9)m g/g,地上部分E AA总含量是根的2.8 3倍。庙宇党参地上部分不同E AA含量与根中排序一致。二者E AA中亮氨酸的含量最高,分别占地上部分和根的2 1.6 4%和1 9.2 5%。蛋氨酸含量最低,分别占地上部分和根总量的8.0 0%和5.5 0%。庙 宇 党 参 地 上 部 分 和 根E AA/总 氨 基 酸(T AA)平均比值为3 9.7 2%和2 7.9 9%,E AA/非必需氨基酸(N E AA)的平均比值分别为6 5.8 9
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