生物制剂项目方案.doc

生物制剂项目方案
一、生物制剂提出的背景
近年来，大量使用化学肥料、化学农药和激素类饲料添加剂，进行大面积单品种种植和大规模单畜种养殖，投入农用机械、电力等动力和能源,获得了农牧业的高速发展，基本满足了人口的迅速膨胀对粮食、农畜产品的需求.但大量使用化学肥料、农药已使土壤生态环境、土壤理化性状及土壤微生物区系受到不同程度的破坏，尤其是过多施用单质化学肥料，已使土壤中营养元素比例严重失调，肥力供给能力下降，土壤板结加剧，根际土壤微生物优势种群大量减少,并在一定程度上对农产品品质造成了污染,使农产品难以达到绿色食品的标准。大量使用激素和抗菌素类饲料添加剂,畜产品品质下降，导致耐药菌株的产生，通过食物链进而严重威胁到人类健康。随着微生物领域科学技术的进步，各国科学家普遍认为，开发农用微生物制剂是减少或取代化肥、化学农药和激素抗菌素类饲料添加剂的有效途径.
生物制剂就是针对上述弊端及其国内农业生产现状，适应现代“绿色农业”和“生态农业”的发展趋势，减少化学生产资料的投入,而采用高科技生物工程技术研究开发系列微生物肥料、微生物农药、土壤修复剂、微生物饲料添加剂和水产养殖微生物制剂等农业生产资料.这也是顺应当今农业生产资料的发展方向,与国际农业接轨的必由之路。
二、项目技术（工艺）方案
1. 发酵工艺流程
发酵工艺流程主要以液体深层发酵制备浓缩液或粉剂为主,工艺主要环节为:原菌种活化→菌种扩大培养→种子罐培养→发酵罐培养→添加吸附载体或浓缩→压滤→干燥→粉碎→粉剂质量检测→包装→产品检测
2．菌种生产操作规程
① 仪器设备和试剂：无菌室或超净工作台、灭菌锅、试管、克氏瓶、冰箱、显微镜。NaOH、HCl、NaCl、牛肉膏、蛋白胨和琼脂等
② 培养基制备:按如下配方制备培养基：牛肉膏0。3％，蛋白胨0。5%，NaCl 0.5%，琼脂2%。将琼脂加热溶化后用NaOH或HCl调PH值至7.0-7.5，然后分装克氏瓶或试管,置于灭菌锅内，在0.11MPa压力下灭菌30min，冷却后制成斜面备用。
③ 菌种活化与扩大培养：用培养基在无菌条件下从原菌种斜面上挑取少许菌苔,放置试管斜面内进行划线，然后置28-30℃温箱内培养24h，经检查无杂菌、菌体生长整齐，再置28—30℃温箱内培养24-28h，肉眼观察，菌苔丰满,涂片、染色检查无杂菌，芽孢大小一致的，可放冰箱中存放备用(4℃左右为宜）。
3．种子罐培养
① 培养基：种子罐培养基配方：豆饼粉0。5%、鱼粉0。3%、玉米粉0。5%、葡萄糖0.3％,豆油0。2％—0。3%（或泡敌0.3％)。
② 空发酵罐灭菌:发酵罐在应用前清洗干净，排除污物，并在0.14MPa压力下，灭菌30min。
③ 种子罐装料：参考1的配方比例装料，投料量不得超过罐容积70％。
④ 种子罐灭菌：装好料后，在0.11MPa压力下灭菌30min，冷却至30℃后即可接种。
⑤ 悬浮液制备:在无菌条件下将每个克氏瓶斜面菌种加100ml无菌水，把菌苔刮下制成孢子悬浮液，含菌量为10亿个菌体/ml，并在80℃恒温水锅中处理20min。
⑥ 接种：将制好的孢子悬浮液，在无菌条件下接种后，按1％的比例接种于冷却至30℃的种子罐内进行培养。
⑦ 种子罐培养条件控制:接种后在温度为28—30℃，压力0。05MPa通气量1:1(每min体积比）和220转/min搅拌条件下，培养8-10h.
4．发酵罐发酵
① 发酵罐培养基：
配方：豆饼粉2%，鱼粉0.5％，玉米浆1。8％，淀粉0。4%,硫酸镁0.06%，碳酸钙0.5%，磷酸二氢钾0.03％，豆油0.1％或泡敌0.05%，用NaOH或HCl调PH值7.0—7.5左右，装置为罐容积的70％.
② 发酵培养条件：
搅拌速度180—200转/min，罐压0。05MPa；通气量：移种后4h内通气量有1：0.7-0。8（每分钟进出体积之比)，以后逐淅增大至1：1。一般发酵培养周期为12—18小时，在芽孢70％形成,个别芽孢开始脱落时，即可放罐。
5．放罐指标
① 芽孢含量＞70％②杂菌污染< 0.3%③含菌量＞40亿个菌体
6．后处理操作规程
① 仪器设备：搅拌机、板框、干燥机（装置）、超细度粉碎机等.
② 吸附剂：一般采用的粒度为0.09mm的轻质碳酸钙为吸附填加剂，加入量按下列公式计算：
发酵液体积×发酵液含菌量
吸附剂的量＝—-----——-—---—————————-—-— × 80％—1/2固体投料量
300亿/g
③ 压滤：按2规定加入吸附剂后， 机械搅拌3-6h，使菌孢全部被吸附,然后再用板框压滤。
④ 干燥：将板框压滤后的滤饼捣碎后.置于烘干机或烘干装置内进行烘干。烘干时的温度。不超过65℃，要不断翻动，使受热均匀。当含水率≤5%时,即可进行粉碎、包装.
⑤ 粉碎：利用高细度粉碎机粉碎，100％通过0。09mm孔径筛.8．成品检验
7。检验标准
具体方法见粉剂标准；含水率用干燥失重法（重量法）测定，含水率≤5%为合格，细度采用湿筛法测定，100%通过0。09mm筛为合格,具体方法按HG2-896标准的湿筛法测定。
8．包装
用编制袋（内有塑料袋）25kg包装，于干燥通风处贮存，保存期为3年。
三、生物制剂的优点
生物制剂正是当代可持续农业、有机农业、生态农业发展的新兴产业。生物制剂有以下优点：
（1）高效的多功能性:具有促进作物生长、提高农产品产量、改进品质、提高抗逆性等功效。
（2)广泛的适应性:受地域和环境条件影响较小。
（3）极大的亲和性:在植物体表、体内定植转移。
（4）高度的安全性：对植物、动物、环境等无毒、无污染、无残留。
(5)土壤修复性：改善土壤及环境，培肥土壤、增加土壤有益微生物的数量、改良盐碱地和降解土壤中有害物质。
（6）产品廉价：发展生物制剂投资少、耗能低，价格便宜、具有广谱性，补充了化肥的单一作用.
(7)使用的方便性：使用、保存方便,可与其它栽培管理措施结合施用。生物制剂是肥料史上继有机肥料、化学肥料后的第三次革命.