微生物实验室安全及操作规定.doc

微生物实验室安全及操作规定
1目的:为规范微生物实验操作，确保操作安全有效,制定本规定。
2。适用范围:化验室的微生物检测.
3。要求:
3。1无菌室的门要随手关闭，以防外界微生物的进入.
3。2微生物室内应保持清洁，不得存放与实验室无关的物品。
3.3进入无菌室前要更换经过灭菌的专用工作衣.帽。鞋.
3。4无菌室内应备有体积分数为0。1%的新吉尔灭溶液。体积分数为70~75％的酒精棉球,以便样品表面及意外污染消毒.
3。5无菌室内应备有镊子。剪刀.接种针.接种环,每次使用前后应在酒精灯火焰上灼烧至无菌.
3.6检验人员在操作过程中需严格按照要求进行操作，不得随意减少工序。
3。7无菌室禁止交谈,操作过程中不得用手触摸其它未消毒。灭菌的区域,与该工作无关人员不得随便出入无菌室.
3。8微生物(无菌室.缓冲间）每次使用前,用紫外灯照射30min,要每周检测一次室内空气清洁度，确保其符合实验条件。每周对微生物室进行至少一次2h以上紫外灯消毒.微生物室内的的菌种总数〉5cfu/平皿时,需要对无菌室。缓冲间用85～95％乳酸熏蒸1h，熏蒸结束后（必要时可以将空间密闭整晚），用体积分数为0。1％的新吉尔灭溶液或体积分数为70～75％的酒精棉彻底对洁净室。缓冲间及其内所有设备。物品进行清洗；后对无菌室。缓冲间进行半小时以上紫外线消毒，结束后,验证室内空气清洁度是否合格，仍不合格，则可加大乳酸熏蒸时间及紫外线灭菌时间。
3。9每次微生物试验紫外灯灭菌前，需将所用的吸头.剪刀.纱布等物品浸泡于消毒剂中。
3。10接种前所用的试管.平皿及培养基必须经消毒灭菌，打开包装未使用完毕的器皿，不能再继续使用，金属用具应高压灭菌或用酒精灯过火三次后方可使用。
3。11切忌用手直接接触标本及已灭菌的器材内部,打开瓶塞或管塞时,应夹持在手中适当位置，避免污染。使用完毕的吸管.三角瓶。样品等应及时撤离，不可随意放在洁净工作台内.
3。12微生物检验每批必须做空白。对照试验（菌落总数做1个盐水对照。1个琼脂对照，大肠菌群做单料。双料各1个琼脂空白培养，整个检验过程超净台内的环境空白），同时记录。当有菌生长时必须保留样品及时汇报,分析原因再做处理，如果空白试验不符合要求，微生物结果不能出具。
3。13每次微生物实验结束后，所有物品及时撤离无菌室，并用体积分数为0。1％的新洁尔灭溶液将超净台内清理干净，酒精灯、剪刀等物品上的样品擦拭干净，用体积分数为0。1％的新洁尔灭溶液浸手或以肥皂洗手，再用清水冲洗干净。
3。14凡要丢弃的培养物，必须进行妥善处理，培养霉菌的培养物和玻璃器皿要先高压灭菌、再洗刷干净，然后再进行灭菌处理。
3.15严格控制培养箱温度以及培养时间,对培养箱的温度每个班至少监控两次。
3。16每周进行消毒剂擦拭一次培养箱内金属孔架及内壁，再有平皿破碎的情况时必须马上进行清理消毒，防止污染.