5骨髓细胞学检查.pptx
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1、1骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查苏州大学附属第二医院 血液科2内容介绍v血细胞的生成v血细胞形态学演变规律v正常细胞形态特征3 能够生成并支持造血细胞分化、发育、成熟的组织器官称为造血器官。人体的造血过程分为胚胎造血以及出生后造血。胚胎造血分为中胚叶造血期、肝造血期和骨髓造血期。出生后造血有骨髓造血、淋巴器官造血及髓外造血。45骨髓造血骨髓造血红骨髓红骨髓:是有活跃造血功能的骨髓。18岁后红髓仅存在于扁平骨、短骨及长管状骨的近心端,如颅骨、胸骨、脊椎骨、肋骨、髂骨以及肱骨和股骨的近心端。约 占体重3.4%-5.9%。v红骨髓主要由结缔组织、血管、神经及造血实质细胞组成。v骨髓中有丰富的血管系统,
2、其中血窦是最突出的结构,骨髓中造细胞的分布有一定区域性。v红细胞造血岛:位于血窦附近,其中心有1-2个巨噬细胞,有核红细胞随着成熟逐渐远离巨噬细胞,贴近血窦壁。6骨髓造血骨髓造血v粒细胞造血岛:远离血窦,其中心有一个巨噬细胞,成熟后移向血窦。v巨核细胞伸出伪足,紧贴在血窦壁上,血小板要巨核细胞胞浆分离后,直接进入血流。v单核细胞、淋巴细胞、组织细胞、浆细胞等散在于造血组织中。黄骨髓黄骨髓:主要由脂肪细胞组成。7造血的基本概念v造血干细胞:是由胚胎干细胞发育而来,在血液组织中分化为造血干细胞、间质干细胞和血管干细胞.造血干细胞在骨髓造血微环境以及造血因子等诱导上,分化为各系造血祖细胞、原始细胞和
3、幼稚细胞以及成熟血细胞。v造血微环境:由骨髓基质细胞和细胞外基质细胞包括微血管系统、末梢神经、基质及基质细胞分泌的细胞因子组成,是造血干细胞赖以生存的场所。89全能干全能干细胞细胞髓系干髓系干细胞细胞淋系干淋系干细胞细胞红系祖细胞粒-单核系祖细胞嗜酸粒祖细胞嗜碱粒祖细胞巨核系祖细胞T系祖细胞B系祖细胞原红细胞原粒细胞原粒细胞原粒细胞原巨核细胞T原淋巴细胞B原淋巴细胞早幼红细胞早幼粒细胞早幼粒细胞 早幼粒细胞幼巨核细胞T幼淋巴细胞B幼淋巴细胞中幼红细胞中性中幼细胞晚幼红细胞中性晚幼粒细胞网织红细胞中性杆状粒细胞嗜酸性中幼粒细胞嗜酸性晚幼粒细胞嗜酸性杆状粒细胞嗜 碱 性中 幼 粒细胞 嗜碱性晚幼粒
4、细胞嗜 碱 性杆 状 粒细胞颗粒型巨核细胞产板型巨核细胞血小板血小板T淋巴细淋巴细胞胞B淋巴细淋巴细胞胞红细胞红细胞原单细胞幼单核细胞单核细胞吞噬细胞中性分中性分叶粒细叶粒细胞胞嗜酸性嗜酸性分叶粒分叶粒细胞细胞嗜嗜 碱碱 性性分分 叶叶 粒粒细胞细胞10血细胞发育过程中形态演变规律血细胞发育过程中形态演变规律原始幼稚成熟备注细胞体积细胞体积大小圆形、椭圆形不规则形原始细胞比早幼粒细胞小,巨核细胞由小变大。细胞质细胞质量:少多染色:深蓝浅蓝淡红颗粒:无颗粒嗜天青颗粒特异性颗粒淋巴细胞变化不大红细胞胞质内无颗粒细胞核细胞核大小:大小,规则不规则染色质:细致、疏松粗糙、紧密核仁:有无核膜:不明显明显
5、巨核细胞核由小变大;红系最终消失。核质比例核质比例大小巨核细胞相反11红细胞系统的正常形态学特征红细胞系统原红细胞早幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞细胞体积细胞体积圆形或椭圆形,d=15-22um边缘有瘤状突起圆形或椭圆,d=12-20um圆形,d=8-18um,圆形,d=7-12um细胞质细胞质较原粒深而密深蓝色嗜多色性均匀的淡红色或极淡的灰紫色细胞核细胞核圆形,占细胞直径4/5,1-5核仁,染色质呈细砂状或细粒状圆形,占细胞直径2/3,无核仁,染色质呈凝集成小块状圆形,占细胞直径1/2,染色质呈团状或粗索状圆形,占细胞直径1/2以下,染色质呈大块状或团状1213粒细胞系统的正常形态学特征粒细胞
6、系统原粒细胞早幼粒细胞中性中幼粒嗜酸性中幼粒嗜碱性中幼粒晚幼粒细胞细胞体细胞体积积圆形或椭圆形,d=11-18um边缘有瘤状突起圆形或椭圆,d=12-22um圆形,d=10-18um,直径15-20um直径10-15um圆形,d=10-16um细胞质细胞质量少,呈透明蓝色,不含颗粒或少量颗粒内含紫红色非特异性嗜天青颗粒量多,淡红色,含细小淡紫红色特异性中性颗粒内充满桔红色特异性嗜酸性颗粒含粗大、散乱紫黑色特异性嗜碱性颗粒量多,淡红色(根据内含颗粒不同分类)细胞核细胞核圆形,占细胞直径2/3以上,2-5核仁,染色质呈淡紫红色细粒状圆形或椭圆形,有或无核仁,染色质呈粗网状分布不均圆形,稍有凹陷,占
7、细胞1/2,染色质呈粗索状,与中性中幼粒相似与中性中幼粒相似染色质结构模糊明显凹陷呈肾形,染色质呈粗块状141516粒细胞系统的正常形态学特征粒细胞系统杆状核粒细胞分叶核粒(中性)分叶核粒(嗜酸性)分叶核粒(嗜碱性)细胞体积细胞体积圆形,d=10-15um圆形,d=10-15um圆形,d=11-16um,直径10-12um细胞质细胞质含特异性颗粒(根据颗粒分中性、嗜酸性、嗜碱性三种)胞质丰富,淡红色,布满细小紫红色中性颗粒充满桔红色嗜酸性颗粒内有稀疏的紫黑色嗜碱性颗粒,常覆盖在核上,使核模糊不清细胞核细胞核核狭长,弯曲呈带状,两端钝圆,染色质呈块状,深紫红色分叶状,分2-5叶,以3叶据多,染色
8、质呈小块状,深紫红色核多分为近似对称的两叶分叶不明显1718淋巴细胞正常形态特征淋巴细胞系统原淋巴细胞幼淋巴细胞大淋巴细胞小淋巴细胞细胞体积细胞体积圆形或椭圆形,d=10-18um圆形,d=10-16um圆形,d=13-18um,直径6-10um细胞质细胞质胞质少,呈透明天蓝色,不含颗粒胞质少,淡蓝色,无颗粒,或有数颗深紫红色嗜天青颗粒胞质丰富,呈透明天蓝色,可有少量大而稀疏的嗜天青颗粒胞质少,仅在核的一侧见到少量淡蓝胞质,一般无颗粒,有时仅见裸核细胞核细胞核核大,稍偏位,染色质较原粒稍粗,核仁1-2个圆形或椭圆形,染色质粗糙,核仁消失核圆形或椭圆形,偏于一侧或着边,染色质致密呈块状,排列均匀
9、圆形或椭圆形,或有切迹,核着边,染色质粗糙而致密1920一一.骨髓检查的范畴骨髓检查的范畴v形态学检查v组织化学染色v免疫学检查v细胞遗传学检查v分子生物学检查26二二.骨髓检查的临床适应症骨髓检查的临床适应症2728 三三.骨髓细胞形态检查方法骨髓细胞形态检查方法v标本采集v涂片及染色v低倍镜下观察v油镜下检查v结果分析29标本采集v取材情况判断:抽吸骨髓时,患者有瞬间的酸痛感;骨髓液中有较多的黄色小粒;镜下观察骨髓特有细胞、观察有核细胞数及杆状核/分叶核。v骨髓稀释:骨髓液中混有血液或完全为血液成份。观察骨髓液中骨髓小粒、油滴及骨髓特细胞,观察成熟细胞/幼稚细胞。v注意正确、及时、均匀涂片
10、。30四四.正常骨髓象正常骨髓象v骨髓增生程度v有核细胞分类和粒红比值v正常骨髓象:有核细胞增生活跃。各系、各阶段有核细胞所占比例在正常参考值范围内。各种细胞形态无明显异常。无寄生虫和明显异常细胞。31骨髓细胞学检查32增生极度活跃增生极度活跃增生极度低下增生极度低下33骨髓细胞学检查v巨核细胞计数并分类:低倍镜下计巨核细胞数量,油镜下观察巨核细胞的阶段。v全片观察有无异常细胞骨髓转移癌细胞恶性组织细胞恶性淋巴瘤细胞戈谢细胞尼曼-匹克细胞等34骨髓细胞学检查v油镜下观察各系增生程度、形态、大致比例,并进行有核细胞计数等。v有核细胞计数及分类:部位选择(体尾交界处、厚薄均匀)计数次序(从右到左、
11、从上到下,呈S形走势)计数的数目(至少计200个有核细胞,一般100-400个)巨核细胞不列入有核细胞计数内,而是单独计数和分类。少数异常细胞也可采用单独快速计数法。分裂象细胞计数方法:常规计数法系统计数法。35骨髓细胞学检查v观察内容(油镜下)观察各阶段的粒细胞、红细胞、单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞及组织细胞等比例、形态及数量。注意有无骨髓小粒、寄生虫及恶性淋巴细胞等异常细胞。v计算结果:计算各系、各期细胞百分比。计算粒红系比例。计算各期巨核细胞百分比。36骨髓细胞学检查v填写病人姓名、性别、年龄、科室、病区、床号、住院号、上次及本次髓涂片号、骨髓穿刺部位及穿刺时间、临床诊断等。v填写骨髓涂
12、片取材、制备和染色情况(良好、尚可、欠佳)。v文字描述。v诊断意义及建议(肯定、支持、可凝、排除及形态学描述等)。v报告日期及签名。3738正常骨髓象v有核细胞增生活跃。v粒细胞占40-60%。其中原粒2%,早幼粒细胞5%,中性中幼稚细胞约8%,晚幼粒约10%,中性杆状核粒细胞约20%,分叶核约12%,嗜酸性中幼粒约1%,嗜酸性晚幼粒2%,嗜酸性杆状核粒细胞3%,嗜酸性分叶核粒细胞5%,嗜碱性中幼和晚幼粒细胞罕见,嗜碱性杆状和分叶核粒细胞1%。39v粒红比例 2-4:1。40正常骨髓象v红细胞系统占20-25%,原红细胞1%,早幼红5%,以中、晚幼红细胞为主,各占10%。41v淋巴细胞占20-
13、25%,均为成熟淋巴细胞,原淋巴细胞罕见,幼稚淋巴细胞偶见。v单核细胞4%,均为成熟单核细胞,原单核细胞罕见,幼稚单核细胞偶见。42v浆细胞2%,均为成熟浆细胞,原浆细胞罕见,幼浆细胞偶见。v巨核细胞7-35个,原巨核细胞不见或偶见,幼巨核细胞0-5%,颗粒巨细胞占10-27%,产血小板巨核细胞占44-60%,裸核占8-30%。血小板易见,呈堆状存在。浆细胞增多浆细胞增多MM、浆白、巨球蛋白血症、重链病等、浆白、巨球蛋白血症、重链病等反应性浆细胞增多如慢性炎症、风湿性疾反应性浆细胞增多如慢性炎症、风湿性疾病、过敏性疾病、恶性肿瘤等病、过敏性疾病、恶性肿瘤等再性障碍性贫血、粒细胞缺乏等再性障碍性
14、贫血、粒细胞缺乏等巨核细胞增多巨核细胞增多ITP、Evans骨髓增殖性疾病骨髓增殖性疾病脾功能亢进脾功能亢进巨核细胞白血病巨核细胞白血病巨核细胞减少巨核细胞减少再生障碍性贫血、急性白血病、骨髓浸润再生障碍性贫血、急性白血病、骨髓浸润及急性感染、化学或药物中毒、放射病等。及急性感染、化学或药物中毒、放射病等。43v其他如组织细胞、内皮细胞、肥大细胞、脂肪细胞等偶见,分裂象细胞少见,不见寄生虫和异常细胞。44 正常骨髓象正常骨髓象46五五.常用血细胞化学染色检查常用血细胞化学染色检查v过氧化物酶染色(POX)v非特异性酯酶染色(NSE)v中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)v糖原染色(PAS)v酸性
15、磷酸酶染色(ACP)v特异性酯酶染色(SE)47 细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成的一门科学。以形态学为基础,结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质(酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。临床上用于:辅助判断急性白血病的细胞类型。辅助血液系统等疾病的诊断和鉴别诊断。观察疾病的疗效和预后。发病机制的探讨。48过氧化物酶染色(过氧化物酶染色(POX):):粒细胞和部分单核细胞中POX能分解H2O2而释放出新生氧,使四甲基联苯胺四甲基联苯胺氧化成联苯胺蓝,后者与亚硝基铁氰化钠结合,再进一步氧化形成稳定的蓝黑色物质,沉淀于酶活性的细胞质内。49v临床评价:
16、帮助鉴别急性白血病的类型:成熟中性粒细胞过氧化物酶活性变化活性增高:见于AA、感染(化脓性细胞感染)、AGL、CGL。活性减低:见于ALL、CLL、M5、MDS、放射病及退化性中性粒细胞。50类型POX注意急粒阳性,颗粒多而大M3与M5区别,前者POX强阳性急单阴性或弱阳性,颗粒少而细与异常组织细胞区别,前者弱阳性,后者阴性急淋阴性,阳性率3%小原粒与原幼淋区别51糖原染色糖原染色(PAS)又称过碘又称过碘-雪夫反应雪夫反应v过碘酸是氧化剂,使含有乙二醇的多糖类物质(糖原、粘多糖、糖蛋白及糖脂等)氧化,形成双醛基。醛基与雪夫试剂中的无色品红结合,使无色的品红变成紫红色化合物,定位于含有多糖类的
17、细胞内。52v临床评价:红细胞系统疾病:红血病、红白血病及MDS中幼红细胞可呈阳性;IDA、地中海贫血也可呈阳性,巨幼贫、溶贫、AA等呈阴性。白细胞系统疾病:主要用于辅助急性白血病的细胞类型等作用。53糖原染色糖原染色(PAS)又称过碘又称过碘-雪夫反应雪夫反应疾病类型PAS反应急性粒细胞白血病少数呈细颗粒状或均匀红色急性淋巴细胞白血病呈粗颗粒状或块状急性单核细胞白血病部分呈细颗粒状、弥散分布慢性淋巴细胞白血病呈粗颗粒状或块状恶性淋巴瘤呈块状或粗颗粒状54中性粒细胞碱性磷酸酶(中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)v成熟中性粒细胞碱性磷酸酶在pH9.6左右的碱性环境中,能水解基质液中的磷酸萘酚钠底物,
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