基因工程章末检测附答案.doc

章末检测1下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是()A表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得B表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点C借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用2某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法，将基因a与载体结合后导入马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。下列有关这一过程的叙述不正确的是()A获取基因a的限制酶的作用部位是图中的B连接基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的C基因a进入马铃薯细胞后,可随马铃薯DNA分子的复制而复制,传给子代细胞D通过该技术人类实现了定向改造马铃薯的遗传性状3以下甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是（)A甲方法可建立该细菌的基因组文库B乙方法可建立该细菌的cDNA文库C甲方法要以脱氧核苷酸为原料D乙方法需要逆转录酶参与4在判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中，不属于分子检测的是()A观察害虫吃棉叶是否死亡B检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带C检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带D检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带5右图表示细胞膜上乙酰胆碱（一种神经递质)受体基因的克隆技术操作过程，下列相关分析中正确的是(）A获得该mRNA的最佳材料是受精卵B构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌C完成过程必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA聚合酶D探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌,获得未被感染的细菌6应用基因工程技术诊断疾病的过程中，必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指（）A用于检测疾病的医疗器械B用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C合成珠蛋白的DNAD合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段7下列关于蛋白质工程的叙述，正确的是(）A将一种生物的基因转移到另一种生物体内,使生物表现出新的性状B干扰素是动物体内的一种蛋白质,可用于治疗病毒的感染和癌症C由于赖氨酸抑制天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性，所以赖氨酸产量难以提高D蛋白质工程能产生自然界已有的蛋白质8下图表示一项重要的生物技术，对图中物质a、b、c、d的描述,正确的是（)A通常情况下，a与d需要用同一种限制酶进行切割Bb能识别特定的核苷酸序列，并将A与T之间的氢键切开Cc连接双链间的A和T，使黏性末端处碱基互补配对Db代表的是限制性核酸内切酶，c代表的是RNA聚合酶9下列关于限制酶的叙述中，错误的是()A它能在特殊位点切割DNA分子B同一种限制酶切割不同的DNA产生的黏性末端能够很好地进行碱基配对C它能任意切割DNA，从而产生大量DNA片段D每一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列10现有一长度为1 000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoR 单独酶切后得到的DNA分子仍是1 000 bp，用Kpn 单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子,用EcoR、Kpn同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（）11下列获取目的基因的方法中需要模板链的是()从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因反转录法通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因A B C D12质粒是基因工程中最常用的载体,它存在于许多细菌体内，某细菌质粒上的标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因）是否转移成功。外源基因插入的位置不同,细菌在培养基上生长情况也不同，如图所示外源基因在质粒中可插入的位置有a、b、c三点。某同学根据实验现象对其插入的位点进行分析，其中分析正确的是（)实验现象实验推论在含青霉素培养基上生长情况在含四环素培养基上生长情况目的基因插入的位置A能生长能生长aB不能生长能生长bC能生长不能生长cD不能生长不能生长c13下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是(）A蛋白质工程操作的实质是改造基因B蛋白质工程在设计蛋白质结构时的依据是现有基因的脱氧核苷酸序列C蛋白质工程的基础是基因工程D蛋白质工程遵循的原理包括中心法则14科学家为提高玉米中赖氨酸含量，计划将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中104 位的氨基酸由天冬酰胺变成异亮氨酸,就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍。下列对蛋白质的改造，操作正确的是（）A直接通过分子水平改造蛋白质B直接改造相应的mRNAC对相应的基因进行操作D重新合成新的基因15基因工程技术也称DNA重组技术,其实施必须具备的4个必要条件是（）A工具酶、目的基因、载体、受体细胞B重组DNA、RNA聚合酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶C模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞D目的基因、限制性核酸内切酶、载体、受体细胞16在基因工程中,为将目的基因导入受体细胞常采用土壤农杆菌转化法,在土壤农杆菌中常含有一个Ti质粒。某科研小组欲将某抗虫基因导入某植物，下列分析错误的是(）ATi质粒含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因，是基因工程中重要的载体B用Ca2处理细菌是重组Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法C重组Ti质粒的土壤农杆菌成功感染植物细胞，可通过植物组织培养技术将该细胞培养成具有抗虫性状的植物D若能够在植物细胞中检测到抗虫基因，则说明将重组质粒成功地导入到了受体细胞17下图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法。下列相关叙述中正确的是（)A这三种方法都用到酶，都是在体外进行B碱基对的排列顺序均相同C图示a、b、c三种方法均属于人工合成法D方法a不遵循中心法则18某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗,开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图.下列有关叙述错误的是（)A步骤所代表的过程是反转录B步骤需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶C步骤可用CaCl2处理大肠杆菌,使其从感受态恢复到常态D检验Q蛋白的免疫反应特性,可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原抗体特异性反应实验19.2013年3月在上海和安徽首次发现H7N9禽流感病例，现在我国多地出现禽流感疫情，为此某研究小组为了研制预防H7N9禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图.下列有关叙述错误的是（)A。步骤所代表的过程是反转录B。步骤需使用限制酶和DNA连接酶C。步骤可用CaCl2处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态D.检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原抗体特异性反应实验20。甲、乙两图均为DNA测序仪显示的图像,已知甲图显示的碱基顺序为TCGAAT，则乙图显示的碱基顺序为()A。TCGCAC B。ACCGTG C.ATTCAG D。TCCGGA21.某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶（Amy）基因a,通过基因工程的方法，将基因a转移到马铃薯植株中，经检测发现Amy在马铃薯成熟块茎细胞中存在。下列说法正确的是(）A.基因a只有导入到马铃薯受精卵中才能表达B.目的基因来自细菌,可以不需要载体直接导入受体细胞C.基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢，开辟新的代谢途径D。目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯DNA分子的复制而复制，传给子代细胞并表达22下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中Pst、Sma、EcoR、Apa为四种限制性核酸内切酶.下列有关说法，正确的是( )A一种限制性核酸内切酶不只识别一种特定的脱氧核苷酸序列B表达载体构建时需要用到Sma、Pst限制性核酸内切酶C抗卡那霉素基因的主要作用是促进抗原基因在受体细胞表达D除图示标注的结构外表达载体中还应有启动子和终止子等23已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质（P1）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题。（1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的_进行改造。(2）以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰_基因或合成_基因。所获得的基因表达是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括_的复制；以及遗传信息在不同分子之间的流动，即:_.（3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过_和_,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物_进行鉴定。24将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如图所示(注:农杆菌中Ti质粒上只有TDNA片段能转移到植物细胞中)。(1）过程需用同种_酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用_培养基.（2)过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让_进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是_.（3）若过程仅获得大量的根，则应在培养基中增加_以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是_.（4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是_.种植转基因抗虫棉能减少_的使用,以减轻环境污染.25酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可生产食品和药品等。科学家将大麦细胞的LTP1基因导入啤酒酵母菌中,获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白,并酿出泡沫丰富的啤酒。基本操作过程如图所示，请据图回答下列问题:（1)该技术定向改变了酵母菌的性状，这种可遗传变异属_。（2）从大麦细胞中可直接分离获得LTP1基因，还可采用_方法获得目的基因.本操作中为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内，所用的载体是_。(3)要使载体与LTP1基因连接，首先应使用_进行切割。假如载体被切割后，得到的分子末端序列为AATTCG，则能与该载体连接的LTP1基因分子末端是_.AGCTTAA BTAATTCC CCTTTAG DAAATCT（4)切割完成后,采用_酶将载体与LTP1基因连接,连接后得到的DNA分子称为_。(5)此操作中可以分别用含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选,则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是_。（6）除了看啤酒泡沫丰富与否外，还可用什么方法检测LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表达？_。26下面是口蹄疫疫苗生产过程示意图,请据图回答下列问题:(1）首先从口蹄疫病毒中提取部分合成病毒蛋白的RNA,而不是用口蹄疫病毒的全部RNA,原因是合成病毒蛋白的RNA控制合成的病毒蛋白质,具有_特性，又不会使动物致病。以合成病毒蛋白的RNA产生病毒蛋白的DNA，需用到的工具酶是_。（2）构建基因表达载体所需要的工具酶是_.基因表达载体除目的基因外，还应包括_。(3)导入大肠杆菌前需先将大肠杆菌处理为_细胞。(4)为检测目的基因是否导入受体细胞,常常要借助载体上_的表达,更准确的方法是利用放射性同位素标记的_作探针与基因组DNA杂交。最后还要检测目的基因是否翻译成了病毒蛋白质，利用的技术是_。27科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组,并且在大肠杆菌体内表达成功。请据图回答下列问题：（1）图中DNA是以_为模板，_形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA,从而获得了所需要的基因.（2)图中代表的是_，在它的作用下将质粒（_DNA）切出_末端。（3）图中表示将_。表示_随大肠杆菌的繁殖而进行_。（4)采用蛋白质工程可以对胰岛素进行改造，使之起效时间缩短，保证餐后血糖高峰和血液中胰岛素高峰一致.如果你是科研工作者，请写出研制速效胰岛素的思路._。（5)下列关于蛋白质工程的说法不正确的是（)A蛋白质工程能将人抗体某些区段替代鼠单克隆抗体的区段，降低鼠单克隆抗体免疫原性B蛋白质工程可对酶的催化活性、底物专一性、抗氧化性、热变性、碱变性等加以改变C理论上通过对关键氨基酸的转换与增删是进行蛋白质工程的唯一方法D蛋白质工程的崛起主要是工业生产和基础理论研究的需要28通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题:(1）下列所示的黏性末端是由_种限制性核酸内切酶作用产生的.（2）利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第三步，即_。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA合成仪用化学方法直接_。(3）该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合，目前经常使用的载体是_.(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用的技术是_；其次还要检测_，方法同样是采用分子杂交技术；最后检测_,方法是 _杂交.29。有一种单基因遗传病1抗胰蛋白缺乏症，患者会出现肺气肿及其他疾病.注射1-抗胰蛋白酶可治疗该病。图甲表示获取人1抗胰蛋白酶基因的两种方法,图乙表示获取1抗胰蛋白酶的方法。据图回答:（1）图甲表示的是基因工程中的_步骤。完成a过程的酶的作用特点是_。（2)c过程需要的原料是_,遗传信息的传递方向是_。（3）图乙中的d表示_。(4）GEP(绿色荧光蛋白)基因的作用是_.30。转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如下图所示(至代表过程，A至C代表结构或细胞）：（1)在图中基因表达载体的构建过程中,为了使目的基因正常表达，目的基因的首端必须有_识别和结合的部位。若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端，应选择_进行连接。(2）将目的基因导入受体细胞的方法很多,在该题中涉及的方法是_，之所以要把目的基因插入Ti质粒的TDNA中，这是利用T-DNA_的特点。（3）过程的具体操作是：先用_处理农杆菌，使其处于感受态;再将含乙肝病毒表面抗原基因的重组Ti质粒溶于缓冲液中与经处理的农杆菌混合,完成转化过程。（4）图中和过程分别叫做_，将叶盘培养成草莓幼苗所依据的原理是_。（5)乙肝病毒表面抗原的基因能否在草莓植株体内维持稳定遗传的关键是_,通常采用_的方法进行检测。31.应用转基因技术可获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题.（1)要获得抗虫基因，可采用_等方法，基因工程的核心是_.（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常是_，原因是_。若用大肠杆菌储存目的基因，则需先将其处理为_细胞.（3)在培育转人生长激素基因牛的过程中，过程常用的方法是_.（4)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_.参考答案：1。【解析】人肝细胞中胰岛素基因不表达，通过人肝细胞mRNA反转录不能得到胰岛素基因，A项错误;基因表达载体的复制原点和启动子是不同的位点，基因表达载体的复制开始于复制原点,胰岛素基因的表达开始于启动子，B项错误;抗生素抗性基因可作为基因工程中的标记基因，可将含有目的基因的受体细胞筛选出来，C项正确；启动子在基因表达的转录中起作用，终止密码子在基因表达的翻译中起作用,D项错误。【答案】C2.【解析】限制酶和DNA连接酶的作用部位都位于，但两者作用相反.载体具有在宿主细胞中复制的能力，与目的基因结合后，目的基因也会在宿主细胞中一起复制。基因工程的目的就是定向改造生物的遗传性状。【答案】B3。【解析】甲方法是从细菌的DNA中直接提取，故可以建立该细菌的基因组文库；乙方法是由mRNA反转录的目的基因,故可以建立该细菌的cDNA文库。乙方法需要逆转录酶和脱氧核苷酸为原料。【答案】C4。【解析】A项属于个体生物学水平的鉴定,不是分子检测；B、C两项为分子检测，利用分子杂交技术，观察目的基因及目的基因转录形成的mRNA能否与DNA探针进行杂交形成杂交带；D项也为分子检测内容，利用抗原抗体杂交的原理，检测基因表达产物能否与特定抗体形成杂交带.【答案】A5.【解析】该受体基因在神经细胞中表达，获得该mRNA的最佳材料是神经细胞。构建基因表达载体最可能使用的载体是质粒。探针筛选的目的是检测是否存在cDNA。【答案】C6。【解析】基因探针是用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子.【答案】B7.【解析】蛋白质工程崛起的缘由是为了得到符合人类生产和生活需要的特定的蛋白质.如玉米生产过程中将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺变成异亮氨酸,就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸分别提高5倍和2倍。【答案】C8.【解析】b是限制性核酸内切酶，能识别特定的核苷酸序列并使DNA分子的每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，而不是使氢键断开;c是DNA连接酶,能连接两个DNA片段.【答案】A9.【解析】限制酶是基因工程的重要工具之一。每种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点上切割DNA分子.同一种限制酶切割不同的DNA产生的黏性末端能进行互补配对。【答案】C10.【解析】由题干条件可知用EcoR酶切后，并不能将DNA分为两段，故可判断为环状DNA,再根据“用EcoR、Kpn同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子”可得到答案D。【答案】D11.【解析】PCR利用的是DNA双链复制原理。即将双链DNA之间的氢键打开，变成单链DNA,作为聚合反应的模板链.反转录法则是以目的基因转录成的信使RNA为模板,在反转录酶的作用下，先反转录形成互补的单链DNA,再合成双链的DNA。则均不需要模板.【答案】D12。【解析】若质粒上插入的位置在c点，那么抗四环素基因和抗青霉素基因都没有被破坏，导入该重组质粒的细菌在含青霉素的培养基和在含四环素的培养基上均能生长。【答案】B13.【解析】蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程.它的目标是依据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计，最终用人工合成的方法合成相应的基因,而改造的基因须按照中心法则才能合成人类需要的蛋白质.【答案】B14.【解析】蛋白质工程的目的是对蛋白质进行改造，从而使蛋白质功能可以满足人们需求。而蛋白质功能与其高级结构密切相关，蛋白质高级结构又非常复杂,所以直接对蛋白质改造非常困难，而蛋白质是由基因控制合成的，对基因进行操作就容易得多。另外，改造后的基因可以遗传,如对蛋白质直接改造，即使成功也不能遗传.【答案】C15。【解析】基因工程是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因(目的基因）复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞（受体细胞）里，定向地改造生物的遗传性状。基因操作的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，基因进入受体细胞的运输工具是载体.【答案】A16.【解析】Ti质粒是基因工程中重要的载体，不含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因；用Ca2处理细菌可增加细胞壁的通透性，是重组Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法；转基因成功的植物细胞,可通过植物组织培养技术获得转基因植物.在植物细胞中检测到抗虫目的基因，说明目的基因已成功导入，但不能证明其能表达.【答案】A17。【解析】由图示可知a为反转录法获得目的基因,用到逆转录酶；b为直接从生物体获得目的基因，用到限制酶；c为用PCR技术扩增获取目的基因，用到Taq酶,且三种方法均在生物体外进行,故A正确。【答案】A18.【解析】由图可知,步骤所代表的过程是反转录；步骤需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶；步骤可用CaCl2处理大肠杆菌,使其细胞从常态转化为感受态;检验Q蛋白的免疫反应特性,可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原抗体特异性反应实验.【答案】C19。【解析】由图可知：步骤是由RNA合成DNA的过程,表示反转录,选项A正确；步骤是把目的基因与质粒连接,构建重组质粒的过程,该过程需使用限制酶和DNA连接酶，选项B正确；步骤可用CaCl2处理大肠杆菌,使其从常态转化为感受态，选项C错误;检验Q蛋白的免疫反应特性,可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原-抗体特异性反应实验，选项D正确.【答案】C20.【解析】由第一幅图给出的条件可知，从左到右看依次为ACGT，但解题时应从上向下看，这样就可得出乙图显示的碱基顺序为ACCGTG.【答案】B21.【解析】植物基因工程的受体细胞可以是受精卵，也可以是体细胞。目的基因需要构建基因表达载体才能导入受体细胞.基因a导入成功后，不会抑制细胞原有的新陈代谢。基因a进入受体细胞后，会整合到马铃薯细胞的DNA分子上,可以随着马铃薯DNA分子的复制而复制，并能传给子代细胞并表达。【答案】D22。【解析】限制酶具有特异性，即一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列并在特点的位点切割，A错误；用Sma酶切割会破坏目的基因，因此表达载体构建时需要用到EcoR、Pst限制性核酸内切酶，B错误；抗卡那霉素基因的主要作用是筛选含有目的基因的受体细胞,C错误；基因表达载体的组成包括启动子、标记基因、目的基因和终止子等，因此除图示标注的结构外表达载体中还应有启动子和终止子等，D正确。【答案】D23。【解析】本题考查蛋白质工程和基因工程的原理及操作流程。（1)由题干信息可知，改造蛋白质的功能可通过改变蛋白质的结构实现。(2)依据蛋白质工程的定义及题中信息可知，获得P1基因的途径有修饰现有（P）基因或合成新（P1）基因。中心法则的全部内容包括DNA的复制、RNA的复制、转录、逆转录和翻译。(3)蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相应的脱氧核苷酸序列。通过蛋白质工程合成的蛋白质还需要进行生物活性的鉴定即功能鉴定，看是否达到人们的需求。【答案】(1)氨基酸序列（或结构）（2)PP1DNA和RNA(或遗传物质）DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质（或转录、逆转录、翻译)(3）设计蛋白质的结构推测氨基酸序列功能24.【解析】(1）过程需用同种限制性核酸内切酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。筛选含重组质粒的农杆菌应使用选择培养基。（2）将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让TDNA进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，筛选出含TDNA片段的棉花细胞。（3）增加细胞分裂素浓度，使生长素用量与细胞分裂素用量的比值降低，有利于芽的分化；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是芽顶端合成的生长素向基部运输,促进下端生根。(4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是投放棉铃虫，看食用转基因棉的棉铃虫是否死亡。种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染.【答案】（1）限制性核酸内切选择(2）TDNA筛选获得TDNA片段的植物细胞（3)细胞分裂素浓度芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化（4）投放棉铃虫农药25。【解析】基因工程从变异角度分析应属于基因重组,获取目的基因可采用直接从物种中分离或人工合成等方法,常用的载体是质粒。【答案】（1）基因重组（2)人工合成质粒(3)限制酶A（4）DNA连接重组DNA(重组质粒)（5）能在含有青霉素的培养基上存活，但不能在含有四环素的培养基上存活（6）检验转基因啤酒酵母菌能否产生LTP1蛋白26.【解析】（1)病毒由核酸和蛋白质组成，其蛋白质外壳具有免疫特性，故口蹄疫疫苗生产过程只需提取口蹄疫病毒中控制合成病毒蛋白的RNA部分.以RNA为模板合成DNA的过程属于反转录,需要逆转录酶。（2）基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因。构建基因表达载体一般用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有黏性末端的切口，再用同种限制酶切割目的基因，产生相同的黏性末端。将切下的目的基因片段，插入质粒的切口处,在DNA连接酶的作用下使质粒与目的基因结合形成重组质粒。(3）将目的基因导入微生物细胞前，常用Ca2处理使其成为感受态细胞。（4）标记基因的表达可检测目的基因是否导入受体细胞,除此之外还可以用DNA杂交法和抗原抗体杂交技术进行检测.【答案】(1)抗原逆转录酶（2）限制性核酸内切酶和DNA连接酶启动子、终止子、标记基因(3)感受态（4）标记基因病毒蛋白基因(目的基因）抗原抗体杂交技术27。【解析】蛋白质工程的类型主要有两种：一是从头设计，即完全按照人的意愿设计合成蛋白质。从头设计是蛋白质工程中最有意义,也是最困难的操作类型,目前技术尚不成熟，但理论上可行。二是定位突变与局部修饰，即在已有蛋白质基础上，只进行局部的修饰。通过造成一个或几个碱基定位突变,以达到修饰蛋白质分子结构的目的.“从头设计的方法：确定蛋白质的功能蛋白质应有的高级结构蛋白质应具备的折叠状态应有的氨基酸序列应有的碱基序列，可以创造自然界不存在的蛋白质。蛋白质工程的崛起是因为天然蛋白质不能满足人类的需求,例如多数酶虽然在自然状态下有活性,但在工业生产中没有活性或活性很低。【答案】(1)原胰岛素mRNA反转录（2)特定的限制性核酸内切酶环状黏性（3）目的基因导入受体细胞重组DNA扩增（4）确定蛋白质的功能蛋白质应有的高级结构蛋白质应具备的折叠状态应有的氨基酸序列应有的碱基序列（5)C28。【解析】(1）限制性核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列,并在特定的位点切割磷酸二酯键。题图显示的黏性末端有4种，因此是由4种限制性核酸内切酶作用产生的。（2）基因工程操作步骤中的第三步是：将目的基因导入受体细胞.获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知,可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。（3)质粒是基因工程中经常使用的载体。(4)检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA，采用分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质,采用抗原-抗体杂交技术。【答案】(1)4(2)将目的基因导入受体细胞人工合成（3）质粒(其他合理答案也可）(4)DNA分子杂交技术目的基因是否转录出了mRNA目的基因是否翻译成蛋白质抗原-抗体29.【解析】(1)图甲中方法1是用限制酶切割目的基因，方法2是用逆转录法获取目的基因。限制酶的作用特点是识别特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。（2)逆转录是以mRNA为模板合成DNA，所以原料是四种脱氧核苷酸,遗传信息是从RNA到DNA。（3）d表示基因表达载体。（4）标记基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞。【答案】(1)目的基因的获取识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子（2)四种脱氧核苷酸RNADNA（3)基因表达载体（4)筛选含有目的基因的受体细胞30。【解析】本题考查基因工程及转基因生物的安全性的相关知识，意在考查对基因工程的理解及运用所学知识解决实际问题和识图的能力。（1)基因表达载体由启动子、目的基因、终止子和标记基因等组成，其中启动子是RNA聚合酶识别和结合位点；根据酶的来源不同,DNA连接酶分为两类：EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶，这二者都能连接黏性末端,但是T4DNA连接酶还可以连接平末端.（2)将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及的方法是农杆菌转化法.农杆菌中的Ti质粒上的TDNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。（3)图中过程是将重组质粒导入农杆菌，由于受体细胞是细菌,常用Ca2+处理使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，称为感受态细胞，以完成转化过程。（4)图中过程是让叶盘细胞脱分化形成愈伤组织,进而再经再分化形成幼苗，此过程叫做植物组织培养；原理是植物细胞的全能性。（5）乙肝病毒表面抗原的基因能否在草莓植株体内维持稳定遗传的关键是目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA上，通常采用DNA分子杂交的方法进行检测。在分子水平上，还可采用抗原抗体杂交的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原.【答案】（1）RNA聚合酶T4DNA连接酶（2)农杆菌转化法可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上（3)Ca2+(4）脱分化和再分化植物细胞的全能性(5)目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA上DNA分子杂交31.【解析】(1）获得目的基因的方法有从基因文库中获取目的基因、PCR技术扩增目的基因、人工合成目的基因等,基因工程的核心是基因表达载体的构建。（2）动物受精卵全能性最高，发育成完整个体最容易，要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常是受精卵。（3)是重组质粒导入动物细胞的过程,常用的方法是显微注射法。(4）基因表达载体的首端必须有启动子。【答案】(1）从基因文库中获得目的基因、PCR技术扩增目的基因、人工合成基因表达载体的构建(2)受精卵动物受精卵全能性最高（动物不能像植物那样，利用一个除受精卵以外的独立的体细胞直接培养成完整的个体)感受态(3)显微注射法(4）启动子