2021版生物二轮专题复习(江苏版)应用题组集训7-3-考点2-克隆技术-.docx

考点二　克隆技术

再悟高考
1．推断正误
(1)组织培育、细胞杂交、显微注射、核移植均为培育草莓脱毒苗所接受的技术(2022·广东，2改编) (×)
提示　只有组织培育为培育脱毒苗接受的技术。
(2)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性(2022·江苏，22C)(×)
提示　推断是否体现细胞全能性的依据是能否发育成新个体。
(3)去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理(2008·全国Ⅰ，5B) (√)
提示　前者用纤维素酶和果胶酶处理；后者用胰蛋白酶处理。
2．(2021·重庆卷，2)如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是 (　　)。

A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞
B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成
C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性
D．④是经筛选培育获得的能分泌特异性抗体的细胞群
解析　①是获得的已经免疫的B淋巴细胞，A项错误；胰蛋白酶使得组织块分散为单个细胞，B项错误；③同时具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性，C项错误；④是经筛选后获得的能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D项正确。
答案　D
3．(2022·福建卷，33)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。
(2)步骤②中，重组胚胎培育到________期时，可从其内细胞团分别出ES细胞。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以依据Rag2基因的________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有________________酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达状况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交试验。
解析　(1)核移植过程中，体细胞核移植前要除去受体卵母细胞的细胞核，若不去掉卵母细胞的细胞核，细胞里面就有两个细胞核，造成遗传物质不能稳定表达。
(2)囊胚期细胞开头消灭分化，分化为滋养层细胞和内细胞团细胞，其中后者具有发育的全能性，属于ES细胞。
(3)步骤③过程是将目的基因导入受体细胞(ES细胞)中，导入之前应构建基因表达载体。在生物体外可通过PCR技术扩增目的基因，其条件是模板DNA、依据Rag2基因的核苷酸序列设计的引物、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶等，另据题干可知，获得Rag2目的基因需要用HindⅢ和PstⅠ两种限制酶，所选择的载体上应具有HindⅢ和PstⅠ酶的酶切位点，以便目的基因和载体能够连接在一起。
(4)检测目的基因是否翻译出相应蛋白质时，应接受抗原—抗体杂交技术，即提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交，看是否有杂交带。
答案　(1)细胞核
(2)囊胚
(3)核苷酸序列　HindⅢ和PstⅠ
(4)蛋白质
创新猜测
4．(2022·南通二模)下图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，相关叙述正确的是 (　　)。

A．该途径依据的原理是植物细胞具有全能性
B．①过程中需把握好培育基中植物激素的比例
C．②过程需用肯定浓度的胰蛋白酶处理愈伤组织
D．③过程需使用固体培育基，有利于细胞增殖
解析　本工程不以生产完整植株为目的，只得到愈伤组织细胞，不满足全能性特点，A错误；①过程为脱分化过程，需把握好培育基中植物激素的比例，B正确；动物细胞工程才需用肯定浓度的胰蛋白酶处理组织，C错误；本试验需要利用细胞来生产产品，应使用液体培育基，便利添加养分物质和取出代谢产物，D错误。
答案　B
5．(2022·山东《考试大纲》调研卷)模型是对争辩对象进行的概括性描述，下图为表示细胞融合的过程模型，请据图回答：

(1)若该图表示植物细胞融合的过程，丁细胞称为__________。欲将丁细胞培育成植株，可选用________技术，这一过程的核心就是______和______两个阶段。
(2)若该图表示动物细胞融合的过程，丁细胞称为__________。过程①区分于植物细胞常用的诱导因素是__________。动物细胞培育时，合成培育基中除必要的养分外，通常需要加入__________等一些自然 成分。
(3)若该图表示制备单克隆抗体的部分过程，经过选择性培育的丁细胞称为____________。丁细胞的特点是______________________________________。
解析　(1)植物细胞融合获得的细胞称为杂种细胞。需要利用植物组织培育技术将杂种细胞培育成植株，这一培育过程的核心步骤就是脱分化和再分化。
(2)动物细胞融合获得的细胞称为杂交细胞。过程①诱导融合区分于植物细胞常用的诱导因素是灭活的病毒。动物细胞培育时，合成培育基中除必要的养分外，通常需要加入血清和血浆等一些自然 成分。
(3)制备单克隆抗体的过程中，经过选择性培育的丁细胞称为杂交瘤细胞，丁细胞的特点是既能快速大量繁殖，又能产生专一的抗体。
答案　(1)杂种细胞　植物组织培育　脱分化　再分化
(2)杂交细胞　灭活的病毒　血清和血浆
(3)杂交瘤细胞　既能快速大量繁殖，又能产生专一的抗体
6．利用现代生物工程技术可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”。如图是利用奶牛乳腺生产人血清白蛋白的图解，请回答下列问题：

(1)在上述过程中，常用______________酶将奶牛组织分散成单个细胞。在体外培育分散的动物细胞时，所需气体主要有______________。
(2)在上述过程中，常借助基因表达载体将人血清白蛋白基因导入奶牛受体细胞中，构建基因表达载体需要的酶有______________________；将人血清白蛋白基因导入奶牛受体细胞最常用的方法是_________________________。
(3)在上述过程中，用于核移植的去核卵细胞一般处于______期。动物体细胞经核移植可获得完整动物个体体现了______________________具有全能性。
(4)图中M应当包括早期胚胎培育、胚胎移植等过程。在培育奶牛早期胚胎的过程中，所用培育液成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等养分成分以及____________等物质。胚胎移植在胚胎工程中的意义在于________________________________。
解析　(1)在动物细胞工程中，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将动物组织分散成单个细胞。在培育动物细胞过程中，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培育液的pH。(2)在基因工程中，构建基因表达载体常用的两种工具酶是限制酶和DNA连接酶。将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射法。(3)在核移植过程中，作为受体细胞的去核卵细胞一般处于减数其次次分裂中期。动物体细胞经核移植可获得完整动物个体体现了动物体细胞核具有全能性。(4)哺乳动物胚胎培育需要“两盐”(无机盐和有机盐)、“两素”(激素和维生素)、“两酸”(核苷酸和氨基酸)和动物血清等。
答案　(1)胰蛋白酶(胶原蛋白)　O2和CO2
(2)限制酶和DNA连接酶　显微注射法
(3)MⅡ中(减数其次次分裂中)　动物体细胞核
(4)动物血清　提高优良母畜的繁殖率

简洁混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞
(1)杂种细胞：植物体细胞杂交过程中，两种细胞去掉细胞壁之后形成的原生质体融合，融合的原生质体消灭细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。
(2)重组细胞：体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞。
(3)杂交细胞：动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞。