活化部分凝血活酶时间(APTT)测定.doc

深圳市沙井人民医院检验科文件编号：SJ/QS-26-OP-XY-059版本版次：A/01临床血液作业指导书生效日期：2005.01.01第 1 页 ，共 2 页活化部分凝血活酶时间测定（APTT）1. 项目名称: 活化部分凝血活酶时间(Activated Partial Thromboplastin Time,APTT)2.检验目的2.1手术前的检测2.2 DIC的协诊2.3抗凝药物治疗监测2.4凝血因子检查2.5循环血液中抗凝物质和一些疾病协诊等3.检验原理：3.1检测原理:全自动血凝仪测定,散射光凝固法检测确定量的血浆样本（50l）经过一定时间（3min）温育后，加入部分凝血活酶时间反应试剂（50l），加温1min，加入0.025MCaCl250l，加温4min,采用波长660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中的浊度变化,从散射光光强度的测定可得凝集曲线，反应物凝固的时间即活化部分凝血活酶时间。3.2反应方法学溯源:37条件下,以鞣花酸激活因子和,以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板,在Ca2+参与下,观察贫血小板血浆凝固所需时间,即为活化部分凝血活酶时间,是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验.4.性能参数4.1重复性:CV2%4.2分析和计算参数:报告单位 秒(S)4.3样本量:50ul,试剂量:50ul激活剂,50ul CaCl24.4检验时间:在最长检验时间之内测出结果,标准设置最长检验时间:190秒4.5精密度范围:1.36.0%5原始样品系统:血浆6.容器和添加剂类型容器采用真空负压专用抗凝管,添加剂类型为0.109M枸橼酸钠7.试剂及配套品7.1激活剂:Cephaloplastin试剂(Dade Actin Activated Cephaloplastin Reagent)7.1.1商标:德灵(DADE BEHRING)7.1.2包装规格:102ml7.1.3货号:B4218-17.1.4成分:脑磷脂(从干燥兔脑粉中提取)加入含有缓冲液、稳定剂和防腐剂的1.010-4M的鞣花酸溶液7.1.5使用方法:液体试剂,直接使用7.1.6储存:未开封试剂28贮存到说明书上有效期，开盖后28有效期7天,不能冰冻。未被污染的试剂稳定期是：283年、18251年、372天;7.2氯化钙溶液(Calcium Chloride Solution)7.2.1商标:德灵(DADE BEHRING)7.2.2包装规格:1015ml7.2.3货号:ORHO377.2.4成分:0.025mol/L的氯化钙溶液7.2.5使用方法:液体试剂,直接使用.7.2.6储存:没开盖试剂放28存放至试剂瓶上有效期.开盖后28有效期7天.7.3清洗液(Clean I):用于测定过程中的吸样针冲洗7.3.1商标:希森美康(Sysmex)7.3.2包装规格:50ml7.3.3货号:GSA500A7.3.4成分:1%次氯酸钠及活性成分7.3.5使用方法;液体试剂,直接使用7.3.6储存:没开盖试剂放28存放至包装有效期,开盖后放于仪器内有效期仅存4小时7.4校准质控血浆(Ci-Trol)7.4.1商标: 德灵(DADE BEHRING)7.4.2货号:Level 1(Normai),291070 101ml Level 2(Abnormal),291071 101ml Level 3(Abnormal),291072 101ml7.4.3使用方法:1ml蒸馏水溶解置室温15分钟后使用7.4.4储存:室温:2h, 28:4h,冷冻分装保存:-202周,-700.55)或过小(0.20)可影响测定结果,这时枸橼酸钠的用量为V=0.00185V1(1.00-)100 (注:V-枸橼酸钠用量, V1-血量ml,-红细胞比积)有下列浓度的物质存在时,对APTT的干扰小于10%标本类型甘油三酯(mg/dL)血色素(mg/dL)结合胆红素（mg/dL）正常不正常780605505208361012.结果计算程序的原理由仪器测定反应物凝固的时间即为活化部分凝血活酶时间13.生物参考区间: 21.1-36.5 S（患者结果超过正常对照10S上有临床意义）14.患者检验结果的可报告区间21124秒15.警告/危急值APTT：20S 或80S16.实验室解释16.1APTT常用于内源性凝血系统（、因子）的筛选及肝素抗凝治疗的监测16.2 APTT延长：见于先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接触因子、缺乏、VWF等）；多种凝血因子缺乏（如严重肝病、维生素K缺乏、DIC、纤溶亢进等）；血液中有抗凝物质存在如凝血因子抑制物、狼疮抗凝物、华法林或肝素水平增高，F、F及F、F缺乏，大量输入库血。16.3 APTT缩短：见于DIC高凝期和妊娠高血压综合症等高凝状态以及血栓前状态、血栓性疾病。16.4 是监测肝素治疗的首选指标。要注意APTT测定结果必须与肝素治疗范围的血浆浓度呈线性关系，否则不宜使用。一般在肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的1.53.0倍为宜.16.5对内源凝血途径因子(、)缺乏较CT敏感(血小板异常不影响APTT)能检出:C小于25%的轻型血友病.对凝血酶原、纤维蛋白原缺乏则不够敏感,故APTT延长的最常见疾病为血友病.此时可进一步做纠正试验,即于患者血浆中加入1/4量的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆或正常血清(试剂参见凝血酶原消耗试验的纠正试验),再做APTT,如正常血浆和吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正,则为因子缺乏;如吸附血浆不能纠正,其余两者都能纠正,则为因子缺乏;如三者都不能纠正,则为病理性循环抗凝物质。17.安全性防护措施17.1在操作仪器时应按照仪器作业指导书进行操作,防止受伤、触电等17.2在进行维护和检查工作时,请带上橡胶手套,使用专用的工具和部件,在工作完成后,用消毒液清洗双手,以免发生感染17.3在处理血样时应小心谨慎,应始终戴上橡胶手套,以避免发生细菌感染,若样本溅入眼睛或者伤口,须用大量清水冲洗,并立即就诊17.4在处理废液以及装卸相关部件时,请勿接触废液.如果其中包含血样,可能导致感染发生.如果无意接触血液,首先用消毒液清洗,然后用肥皂清洗17.5在处理试剂时:如果试剂不慎落入眼睛,立即用大量清水冲洗,并接受治疗;如果不慎吞入试剂,立即向医生求助,喝入大量清水,并尽量呕出吞入试剂;如果试剂沾上皮肤或者手,用大量清水冲洗;在丢弃废液和消耗品时,请按照处理医疗、传染性、工业性废水的步骤进行处理,如果其中含有血样,可能导致细菌感染.18.变异的潜在来源18.1冷冻血浆可减低APTT对狼疮抗凝物以及对、HMWK、PK缺乏的灵敏度；室温下，F易失去活性，因此恰当的标本处理非常重要。18.2高脂血症可使APTT延长18.3抗凝剂：草酸盐、EDTA、肝素不适用于APTT检查18.4标本采集处理不当,如血与抗凝剂未充分混匀，出现凝块，有组织液混入,混匀时过分用力使标本溶血，造成结果变异。如果抽血过慢或不太顺利,可能激活凝血系统,试验结果将会显示凝血因子活性增高,如果采血时产生泡沫,可能导致纤维蛋白原和V因子及因子变性.18.5纤溶药物的影响（如双香豆素、链激酶、尿酶等），超剂量使用肝素。18.6FDP增加使凝固时间延长。18.7其他药物的影响（如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等）。18.8所有与标本接触的试管、吸管等均采用塑料或硅化处理的19. 参考文献19.1 叶应妩.王毓三等全国临床检验操作规程第三版，东南大学出版社.19.2 Sysmex公司Sysmex CA-1500全自动血凝仪操作手册 1998.6修订本.19.3熊立凡主编临床检验基础第三版,人民卫生出版社19.4APTT试剂使用说明书,20.附件20.1CA1500常规操作流程20.2APTT试剂使用说明书编写人签名复审人签名审批人签名生效日期姓 名:编写日期:姓 名:复审日期:姓 名:批准日期: