液相色谱仪操作规程教学资料.doc
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1、液相色谱仪操作规程精品资料高效液相色谱系统操作规程1. 目的规范高效液相色谱系统的使用和维护。2. 范围本规程适用于高效液相色谱系统的使用和维护。3. 职责质检室仪器分析员负责高效液相色谱系统的日常使用和维护。4. 系统组成本系统由多溶剂输送系统(有梯度控制器的高压输液泵)、Waters在线脱气机、自动进样器、紫外检测器、荧光检测器、色谱工作站/电脑等组成。5. 程序5.1. 准备5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相(应足够;流动相必须用0.45m滤膜过滤)、样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),更换合适的色谱柱(柱进出口位置应与流动相流向一致)和定量环。5.1.2.
2、 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通电源,依次液相色谱主机,待检测器自检结束显示测量状态时,打开打印机、电脑显示器、主机。5.2.1.2. 打开工作站在线软件,输入用户名和密码,按OK注册进入系统主界面。5.2.2. 更换溶剂,在工作站上,脱气运行。5.3. 平衡系统(分两种情况进行)5.3.1. 等度模式5.3.1.1. 每次以0.1ml/min的增量加大流速至1ml/min,以超纯水冲洗系统10min。5.3.1.2. 检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液,如漏液应予以排除。5.3.1.3. 观察泵
3、控制屏幕上的压力值,压力波动应在平均值的510%以内。如超出此范围,可初步判断为柱前管路仍有气泡。5.3.1.4. 压力波动平稳后,换检验方法规定的流动相比例冲洗系统。在检查基线稳定性前,让最少56倍柱体积的流动相通过系统。5.3.1.5.观察基线和压力变化。如果冲洗至基线漂移10-3Au/min,噪声为10-4Au数量级,且压力平稳时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。5.3.2. 梯度模式5.3.2.1. 按检验方法规定的条件冲洗平衡系统,并注意压力波动变化和排气泡。5.3.2.2. 在进样前运行12次空白梯度。5.4. 进样,运行自动进样,直至完成。5.5. 数据处理,运行离线工作站,
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