电泳分析仪在国内应用现状.docx
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- 电泳 分析 国内 应用 现状
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电泳分析仪在国内应用现状 (本溪钢铁集团总医院检验科117000) 【关键词】电泳分析仪 R446A2095-1752(2014)24-0367-02 1937年瑞典化学家Tiselius建立了蛋白质的界面电泳技术,成功分离了血清蛋白,并于1946年推出了第一台商品化的移届电泳系统,从此电泳分析所用设备随着科技的进步而不断推陈出新,特别是电泳所用支持介质由流动相改为固相后,电泳技术的应用得到了较快发展和普及[1]。目前电泳分析仪按其自动化程度大致分为两类:一类是半自动电泳分析仪;另一类是全自动电泳分析仪。 一、半自动电泳分析仪 半自动电泳分析仪的特点是电泳、染色、脱色和扫描是相互独立或部分独立的部分,需要操作人员将电泳好的电泳片取出人为地进行染色或扫描,不能实现人员的真正离机看护,如英国赛斯电泳系统、美国HELANNASPIFE系统、法国SEBIAHYDRASYS2系统和国产电泳系统大都属于此类产品。这类电泳仪成本较低,检测项目多,有的部分功能已程序化,使用灵活。 二、全自动电泳分析仪 1.美国HELANNAEPALYZER2全自动电泳分析仪 采用快速琼脂糖凝胶胶片,可进行多项目同批次连续电泳,仪器采用刀锋加样梳自动点样,点样时间和次数可设定,样品量20~30微升,每小时可处理80个样本,样品盘和电泳板均以轨道形式自动移行。处理过程是:点样→电泳→烘干→染色→烘干→脱色→烘干→扫描→打印报告,整个过程无需人为手动。各步骤的运行时间及所需温度需提前设定,电泳和扫描部分可连续也可独立使用,因而如果一次扫描结果不理想可以进行第二次扫描。此设备有5个冷却位,自动混合配制试剂,可同时处理4个不同项目,最多运行10块电泳凝胶板。样品板设有样品位和稀释位,电泳图谱和扫描波形图谱可同时打印在报告单上。 2.意大利INTERLABMICROTECH696PC全自动凝胶电泳仪 该设备也采用琼脂糖凝胶板,可进行同批次不同项目凝胶板的连续检测。样品点样由特殊的金属点样器完成,每个加样量可精确到1微升,样品槽内的样品量也需30微升。设备有2个干式三电极电泳槽,以真空负压方式固定胶片进行电泳,电泳片的传递是以机械臂的方式进行的,可重复扫描电泳片。实验所需条件如温度时间等可提前设定,检测速度最高可达每小时156样本。 3.日本常光CTE1000电泳分析仪 该设备是以无电渗的醋酸纤维膜为介质,点样次数可自动调整,样品量为30微升,检测速度为每小时100个样本,测定开始后35分钟即可得到第一个样本的检测数据,有日常质控图,但检测项目目前仅限于血清蛋白电泳,有较好的精确性[2]。运行过程为取膜→浸泡→点样→电泳→染色→脱色→干燥→扫描→打印报告(可带病理疑似提示),整个检测过程全自动完成。 三、毛细管电泳仪 毛细管电泳仪的检测原理是在内径为10~200微米的弹性石英熔硅毛细管柱内(内壁带有负电荷),配以可调的温度控制系统和带有正电荷的缓冲液,在高压电场下使样品的分子达到快速而高效分离。同时,使用特定波长的氘灯光源对蛋白质进行直接检测,可获得极好的准确度和精确度。根据筛分原理的不同可进行自由区带电泳(CZE)毛细管凝胶电泳(CGE)等电聚焦电泳(CIEP)及胶束毛细管色谱(MECC)等,其突出特点是灵敏度高,检测极限在10-12~10-13摩尔并可直接定量测定,速度快,自动化程度高,可连续进样,不需要对蛋白进行染色和脱色,每个测试可在20分钟内完成,如果连续检测每小时可达100个样本。样品用量仅需20微升。基本过程为毛细管本底清洗→填充缓冲液→冲注样品→高压电泳→浓度测定。该设备项目的开展受商品化的试剂限制,目前用于临床最多的项目是血清蛋白电泳检测,也可做尿蛋白、血红蛋白、免疫分型电泳等。这类设备有美国BACKMAN的PACE500和法国SEBIA的CAPILLARYS2。 以上介绍的设备是目前应用最广、最为先进的全自动电泳分析仪,其共同特点是可进行人机分离式操作,而且重复性比手工法更好,尤其适合大批量、多项目、连续的样本检测。不足之处在于不适合单一标本的随机检测,也不能直接定量和原始采血管直接上机检测(毛细管电泳除外)。因受厂家试剂研发项目速度的限制,目前还仅限于血清蛋白电泳和同工酶电泳及免疫固定电泳的临床应用,但我们不可否认这已经实现了电泳分析自动化的里程碑式的进步[3]。 Reference: [1]张秀明,李健斋,魏明竞,等.现代临床生化检验学[M].北京:人民军医出版社,2001.1179-1184. [2]岳志红,赵洁,贾玫.常光全自动电泳仪测定血清蛋白的方法学评价[J].中国实验诊断学杂志,2006,10(2):186-188. [3]沈佐君,白洁,丛玉隆.电泳技术在临床检验中的应用[J].中华检验医学杂志,2005,28(7):684-686. -全文完-展开阅读全文
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