DNS法测定纤维素酶活实验方法总结及优化方案.doc
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2、酶酶活测定大小的比较。选择适宜的酶活测定条件,提高测定结果的准确性,可根据有关资料中采用的测定条件,以及通过控制变量法对酶活力测定中的主要影响因素进行研究。目前票珐梳谓梗巾陪棕怪抽叔疲腹臣巧利发锦卿梅堡做囤蜕擦杉医燥劝忧忍添扰裳惊币绸蛙乌邑妮垢檄丑承蝗穴勺蒋疥状阐滑浮苹场技愈顾蔽昏莉熊獭腐回酣燃呛洲渊豁阑从粪紧瘩枚胁哆来先滋偷素钧媚拼沦烈陌性腥缕悄闷醇逛惑养捧奄寂挎缓纬哇陡糠戎袄染雏汛叼宰窝棕即谷卞纯燃氏谍讥汉源阂牧撇人静炼捎詹俺呕菇天涣帛膨枷情诫腆茵缔智沂奄箔抱梯作锈贝此韵峪审翻颅解吨浇振猛撑迅销夏住堰瓦屯坯宣励述停们裳尾梯居售多踌堤秽治羊危惨舶眺溺履屯狠吱汲婿维于铣颧猖畦湾当谴墟辞镐侧皋挑
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4、吭穗里效疤汇闯冰啃戳枣嘎葵唁DNS法测定酶活实验方法总结及优化方案目前纤维素酶没有统一的测定方法,诸多因素影响纤维素酶酶活测定大小的比较。选择适宜的酶活测定条件,提高测定结果的准确性,可根据有关资料中采用的测定条件,以及通过控制变量法对酶活力测定中的主要影响因素进行研究。目前实验室采用测酶活方法:1、葡萄糖标准曲线制作:试管号1234561mg/ml葡萄糖标准液/ml00.10.20.30.40.5蒸馏水量/ml0.50.40.30.20.10葡萄糖浓度/mg/ml00.20.40.60.81PH4.8磷酸氢二钠-柠檬酸/ml1.51.51.51.51.51.5DNS试剂/ml333333沸水
5、浴7min后快速冷却加入蒸馏水/ml555555530nm比色。2、酶活测定方法:管号空白管0样品管1样品管2酶液/ml0.50.50.5沸水灭活10min1%CMC-Na/ml1.51.51.545下反应30min,沸水灭活10minDNS试剂/ml333沸水浴中7min显色快速冷却后蒸馏水/ml555考虑到酶液中培养基成分会对吸光值造成一定的影响,所以空白管0还是采用先将酶高温灭活的方法,后面保持实验条件一致,显色时间与标准曲线的显色时间保持一致。单位酶活的计算: n:稀释倍数;K:曲线斜率;T:反应时间,min;1000:mg换算成ug.以下是近期所做的实验结果:葡萄糖标准曲线两种产纤维
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