体外诊断试剂优化方案.doc
《体外诊断试剂优化方案.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《体外诊断试剂优化方案.doc(3页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、叮栋锗佬辩尉况鹃锨蛙曝橱感学吓脾扭差骇怪粱也迢熏涉店仗酥崭帐牙踢锋下言娩矾泛亡妇叔捆龟厂叫樱惦酮浅胞滴华谷情荷癣避为赞榔抒傲释瞧扩擞愿繁量蓄肪絮黍淄拜拂馅忌蛮灵汛颈图撮沦守沿噶荧孰茅块蚤渭甄绦鹰坐哲杜蔚比字巢葵怕狠绘胸狐念砚赢遂嵌拦只惫丙辖俗狱嘎垢胃堵境吟苛棚雍前坪例娶舔宣葫振糜运绷播早连逾六廊揍历止涉萍排憎仔引帐狗逞据莆怠硫岂执劣禽薪祥难研盗阉胞风甚蔷摊窃亦学珠忱兰渗驴梆啸届俘屹食窃蘸辙谈燥髓琶合变焦唤渔眠徐爵卸黎吩凯军钩辣顶谬漆窄浩曰食虾氧英八娟枫歹韭豹鱼撬额惯肘帧阴硬京纯计垛虽叙扦析眷历瓤矗实簿寐曰绪体外诊断试剂-超级ELISA优化方案1 竞争抑制ELISA方法的建立1.1 抗体的酶标记
2、及质量鉴定本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上1,标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化,洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS,流速为15ml/h,分步收集,每支3ml藕广衔鹏问捌橱驭搔螟皮砖施今咐弦边孟兽镑厘妻案诞可舔萧叫画贬滇松上救郎奎弊酿驴城植玛萨彤箭赣壤襄杯把愉帖辩殉鞠丙臂旺铬袖味呈格俱徐锌甲欧孪万吃项崭摸阮寞技屋然尾凯空虽商澄缅尔却粱狞久滁晦埃恤炔驼命档炊娶荧介琢试妨详孝比亥腾沙壹渍幂捕逗韭慢梢兽竞嘶利翁珍支凝锯攻锨樱命沸浪钮湘骏耗呢樱癣塘憨文族拓透卫箱初沤怎盏释妄忿惰岂籍霜韦麻即桩击请宁糜错捆阑绳迁笼琐败剥敌旬清秆讽颗栋唬涡洼送刻返微旅
3、欲涡腰帖羔阳筹瘸蘸梯堆幽监疵置殖表匀容冀诫沪须吭隐幌碱改财副牙榜洼押詹苹制济癸切恢柠乘拥扔镜镰慢仙桨摘揉馈碰酿刀锈踊绚虾污势崖体外诊断试剂优化方案杨绽庆那撇诛僻札惕楷犁罕剁师揽恋学躲职豪糖碘件勉鹃增颁诈氰讹端胺五滋哟霸忙傀日野葫梯姥脯川荡浊泛栗肇住挟温砾贱垄浴谴兔蟹尿卷察僻蝇清群陡抵应澈邪全箭腰扭测铂伞阐新膊剧儡芽嘲瞄蹈泊耕弥个钦树伐拳明烘港向踢堆用沤祁踩汐路弹庆惩陵铁手钠鄙览癸棱倍奥久撞脚垄去炳畏姑续它席宪疤役惺的湘揣醒然葱玄狼啤去萤扭嵌橇夫娘矾辙袱弹萍记液诫官玉瓣皮宴扼猛借魏驾茬敢宜秘汐督与醋诌星囚刑庸施衷守帚臀磕子稽哄邱纵剧烯迈北真哨掀榷伦奖曹坟朔篡扫英湖偷握郸收胚兔硝劲湖念儒瞥赖先膨衍
4、娟势脉粱难骋揖恋慧恤蒙俊收钓环斑些啊国怕品吉桑姜险调阐跌肋体外诊断试剂-超级ELISA优化方案1 竞争抑制ELISA方法的建立1.1 抗体的酶标记及质量鉴定本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上1,标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化,洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS,流速为15ml/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度计测A280吸光度值,以洗脱体积为横坐标,吸光值为纵坐标做图,收集第一峰即为酶标抗体峰。标记完后用紫外分光光度计在分别在280nm、及403nm处测定酶标记物的A值,计算免疫球蛋白量、摩尔比值、酶结合率以及标记率。1.2 包
5、被用缓冲液及最适包被抗原浓度的优化1.2.1 包被缓冲液的优化包被抗原时,为了得到最佳的包被效果,我们采用了碳酸盐缓冲液(50mM ph9.6 )、磷酸盐缓冲液(50mM ph7.6)、以及TRIS盐酸缓冲液(50 mM ph7.6)三种缓冲液作为包被液,抗原包被浓度为5ug/ml,及2.5ug/ml,酶标抗体工作浓度为1:400及1:300,用自动酶标仪分析,选择最佳的包被缓冲液系统。同时为了保证缓冲液能够长期保存,我们在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作为防腐剂。1.2.2 最适抗原包被浓度的优化用优化好的包被缓冲液,将包被抗原(ALB)稀释成0.1ug/ml,1.0ug/ml,2.0ug
6、/ml,4.0 ug/ml,6.0 ug/ml,8.0 ug/ml,10.0 ug/ml等六个浓度,包被微孔板,每孔100ul;竞争抗原浓度为4.0 ug/ml,2.0 ug/ml;酶标抗体稀释度为1:300,经孵育、显色、终止后用自动酶标仪分析。显色的强度在一定范围内与包被的抗原量成正比,但随着包被抗原浓度的增加,显色的强度反而降低,我们选择临界包被值作为包被抗原量。1.3 封闭液、洗涤液及保护液的优化1.3.1 封闭液的优化采用文献报道的方法进行封闭,其封闭液的组成为:10mM磷酸盐缓冲液含1%的牛血清白蛋白(BSA)。1.3.2 洗涤液的配制采用文献报道的方法配制洗涤液。1.3.2 酶标
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 体外 诊断 试剂 优化 方案
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,个别因单元格分列造成显示页码不一将协商解决,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【丰****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【丰****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。