年产300吨硫酸链霉素工业盐发酵车间的工艺设计样本.doc
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1、课程设计 题目:年产300吨硫酸链霉素工业盐发酵车间工艺设计课程名称: 发酵工厂工艺设计概论 学 院: 班 级: 学 号: 指导老师: 姓 名: 四川理工学院 二零 12 年 9 月13日目录1.序言.32.设计任务书.53.工艺设计说明3.1项目背景和开发意向.63.2生产菌种及发酵基础原理.63.3基础数据.73.4参考数据.84.工艺步骤及方案说明论证.94.1发酵工艺.94.2链霉素发酵条件及中间控制.104.3提取工艺.114.4工艺步骤简图.125.物料衡算及能量恒算. .145.1物料衡算.145.2热量衡算.155.3水用量计算.176.发酵车间设备选型计算.196.1发酵罐设
2、计.19 6.1.1发酵罐选型及尺寸.196.2设备结构工艺设计.20 6.2.1 空气分布器.20 6.2.2 挡板. 20 6.2.3电机设计及轴功率计算.20 6.2.4搅拌器设计.22 6.2.5冷却面积计算和冷却管设计.22 6.2.6 PH测定.25 6.2.7消泡. 25 6.2.7消泡.25 6.2.8观察窗口.25 6.2.9液面高度显示安装.25 6.2.10封头连接方法.25 6.2.11密封方法.257. 对本设计评述.268. 厂房平面图.289.参考文件.29 1前 言 硫酸链霉素(Streptomycin Sulfate)关键成份是链霉素,链霉素 硫酸链霉素化学结
3、构式(Streptomycin)是瓦克斯曼Waksman S.A.)于 1944 年从灰色链霉菌(Streptomyces,griseus)培养液中分离出来一个碱性抗生素。链霉素是一个 相当强有机碱,也是一个多糖类化合物。其分子结构是由链霉肌、链霉糖和 N-甲基-L-葡萄糖胺三部分以苷键相联结而成。链霉素碱稳定性尤其差,工业产品关键是其硫酸盐形式, 即硫酸链霉素。 链霉素对结核杆菌有强大抗菌作用,其最低抑菌浓度(MIC)通常为 0.5 mg/L。它对很多革兰氏阴性菌(G-)如大肠杆菌、肺炎杆菌、肠杆菌属、沙门菌属、布鲁菌属等也具抗菌作用。链霉素对革兰氏阳性菌(G+)抗菌活性较差。链霉素游离碱为
4、白色粉末。大多数盐类也是白色粉末或结晶,无嗅,味微苦。链霉素在中性溶液中能以三价阳离子形式存在,所以可用离子交换法进行提取。其水溶液比较稳定,但其稳定性受PH值和温度影响较大。其硫酸盐水溶液在 PH=4-7,室温下放置数星期, 仍很稳定,如在冰箱中保留三个月内活性无改变。 现在抗生素生产关键是利用微生物发酵来进行,少数采取化学合成方法,当然也有采取化学法或生化法半合成。对于链霉素可由灰色链霉菌发酵生产。双氢链霉素可由湿链霉菌产生,但通常以半合成方法生产。 通常认为链霉素是诊疗结核杆菌感染首选药品,除此以外,还用于诊疗革 兰氏阴性菌所引发泌尿道感染、结核性脑膜炎,鼠疫,肠道感染,肺炎,败血症,百
5、日咳等。链毒素缺点是轻易产生耐药性;长久使用对第八对脑神经有毒害除了医用外,也有报道将链霉素用于农牧业。例中国新疆某生产建设兵团农场自 1985 年起应用链霉素诊疗菜类瓜类和粮食等作物病害, 取得很好效果; 链霉素还可用于猪肺炎, 雏鸡白痢疾、 和鸡, 鸭, 鹅巴氏杆菌感染等诊疗。 中国有些厂家将生产链霉素作为农用出口,效益很好。 2设计任务书四 川 理 工 学 院制药工程课程设计任务书 学院 专业 班级 学生姓名 学号: 指导老师: (署名)系主任 (署名)院长 (署名)设计时间: 一、设计任务1. 题目:年产300吨硫酸链霉素工业盐发酵车间工艺设计2. 条件:年产量为300吨。十二个月按3
6、00个工作日算。二、设计内容(一)、设计说明书,内容包含:1、目录2、题目及条件(任务书)3、工艺设计说明书4、工艺步骤及方案选择5、物料衡算及能量衡算6发酵车间设备选型计算7、设计评述8、参考文件(二)、绘图绘制带控制点工艺步骤图或车间平面部署图或主体设备图3工艺设计说明3.1硫酸链霉素生产背景和开发意向 生产硫酸链霉素项目可行性研究汇报经过对项目科学深入市场需求和供给分析、未来价格估计、资源供给、建设规模、工艺路线、设备选型、环境影响、节能减排、投资估算、资金筹措、盈利能力等方面 科学研究,从市场、技术、经济、工程等角度对项目进行调查研究和分析比较,并对项目建成以后可能取得财务、经济效益及
7、社会环境影响进行科学估计,为项目决议提供了公正、可靠、科学性投资咨询意见。3.2生产菌种及发酵基础原理 3.2.1 硫酸链霉素生产介绍 在链霉素发酵中,我们采取中国比较常见灰色链霉菌及其变种。该菌除了分泌链霉素外,还产生别抗生素如放线菌酮对酵母和真菌杀菌作用强,因毒性大不能用于临床。灰色链霉素孢子柄直而短,不呈螺旋。孢子量多,呈椭圆球形。气生菌丝和孢子全部呈白色,单菌落生长丰满,呈梅花形或馒头形,直径3-4mm。基质菌丝透明,在斜面背后产生淡棕色色素。菌种采取沙土管或冷冻干燥保藏。 链霉素是由链霉胍、链霉糖和N甲基L一葡萄糖胺组成三糖苷,属于氨基糖苷类抗生素。链霉胍是在1,3-位置上带有2个孤
8、基l,3去氧青蟹肌醇,去掉2个脒基后称为链霉胺。链霉糖是带有支链5,脱氧五碳糖,在第3碳上有1个醛基。N-甲基-L-葡萄糖胺是在第2碳上-NH2被甲基化(-cH3NH)L一葡萄糖胺。这三糖连接糖苷键全部是型糖苷键。3.2.2 硫酸链霉素合成示意图 由D-葡萄糖和NH3合成链霉素大致路径图13.3基础数据生产规模:300吨/年产品规格:成品效价为800单位/mg生产天数:300天/年接种量:15%倒罐率:1%发酵周期:8天 天天放罐:2罐 发酵装料系数:70%发酵液收率:95% 提炼总收率:70%平均发酵水平:25000单位/ml种子培养基配比(g/L):牛肉膏 6%,葡萄糖 4%,KH2PO4
9、 1%,MgSO4 1%生产培养基配比(g/L):葡萄糖4%,黄豆饼粉0.8%,玉米浆1.5%,(NH4)2SO4 0.5%,豆油0.2%,KH2PO4 0.01%,CaCO3 0.04%3.4参考数据罐体高径比H/D:13搅拌桨直径和罐体直径之比Di/D: 1/31/2挡板宽度和罐体直径之比Wb/D :1/81/12(4块挡板)最下层搅拌桨高度和罐体直径之比:0.81.0相邻两层搅拌桨距离和搅拌桨直径之比:12.5发酵条件:转数350r/min ,温度28,pH7.2(400L发酵罐)冷却水进出口温度分别为25、30黏度:38cP4工艺步骤及方案说明论证4.1发酵工艺 4.1.1斜面孢子培养
10、将砂土管(或冷冻管)菌种接种到斜面培养基,经培养后即得原始斜面。原始斜面质量要求通常为:菌落分布均匀,密度适中,颜色雪白,但菌落丰满,。再从原始斜面丰满单菌落接种至斜面上,长成后即得生产斜面,斜面上菌落应为白色丰满梅花形和馒头形,后面为淡棕色色素,排除多种杂型菌落。经两次传代,可达成纯化目标,排出变异菌株。其质量还应经过摇瓶试验来进行控制。合格孢子面存在低温冷库(04)内备用。4.1.2 摇瓶种子培养 生产斜面菌落接种到摇瓶种子培养中,经过培养基即得摇瓶种子。链霉素发酵常常使用摇瓶种子来接种种子罐。种子质量以菌丝阶段、发酵单位、菌丝粘度或浓度、糖氮代谢、种子液色泽和无菌检验为指标。摇瓶种子能够
11、直接接种子罐,也能够在扩大培养,用培养所得子瓶来接种。药瓶培养培养基成份为黄豆饼粉、葡萄糖、硫酸铵、碳酸钙等。黄豆饼粉质量和葡萄糖用量对种子质量全部有影响。4.1.3 种子罐扩大培养 种子罐培养是用来扩大种子量。种子罐培养可为23级,依据发酵罐体积大小和接种量来确定。第一级种子罐通常采取摇瓶种子接种,23级种子罐则是逐层转移,接种量通常全部为10%左右。种子质量对后期发酵影响甚大,种子必需符合各项质量要求(糖氮代谢、菌浓和菌丝阶段、效价和无菌要求),方能转罐。所以在培养过程中,必需严格控制好罐温、通气搅拌和泡沫,以确保菌丝生长良好,得到合乎要求种子。4.2 链霉素发酵条件及中间控制4.2.1溶
12、氧影响及控制链霉素产生菌一灰色链霉菌是一个高度需氧菌。它在整个代谢过程中以葡萄糖做为关键碳源,只有以氧做为最终电子受体时方能取得大量能量,来满足菌体生长、繁殖和合成链霉素需要.物质代谢和能量代谢是相辅相成。据文件记载19,空气中,氧在培养液中饱和浓度(1 a tm, 25 )大约只有0.2毫克分子(O2)/升,而链霉素发酵液中菌体摄氧率在1050毫克分子(O2)/升小时。所以向发酵液中快速地补充溶解氧.是链霉素发酵中关键问题11 。对溶氧水平有较大影响原因关键有:a、菌体代谢是否旺盛。b、培养液粘度:过高粘度会影响氧传输,即影响氧由气相溶解于液相之中。c、补料:补糖后糖代谢加紧,补入10秒钟后
13、溶氧即显著下降,但经3040分钟后又逐步恢复到补前水平。这种改变当补糖量超出1.0%时较显著。当补无机氮源使氨基氮增加l0mg/100ml以上时,亦有这种改变。d、罐压:试验证实罐压对溶氧影响较空气流量对溶氧影响更为显著。在菌体生长前期,空气流量在一定范围内增减对溶氧几乎没有什么影响,而罐压改变则溶氧改变显著。在培养前期,通常罐压每升高或降低0.lkg/cm2溶氧浓度就升高或降低4%左右;在培养中、后期,罐压每升高或降低0.lkg/cm2溶氧浓度就升高或降低3%左右。但罐压不能控制过高,超出一定程度对菌体生长、代谢就要产生不良影响。e、空气流量:体积氧传输系数中Vs为空气在罐中直线速率,它和空
14、气流量是等效。从提升KLa角度看,应尽可能增大Vs,但超出一定程度后溶氧浓度不再上升,反而会造成泡沫上升,发酵中间产物未被利用即被带出而造成不良后果,甚至使搅拌器周围充满气泡从而使搅拌失去作用,造成溶氧下降。从价值工程原理出发,应确定一个最适空气流量vs,即不使通气量过剩,又满足灰色链霉菌对氧需求。f、搅拌:搅拌对溶氧浓度影响最大。在培养过程中如停止搅拌、溶氧浓度快速下降几乎到0,此时假如增加空气流量,增大罐压全部无济于事。同时对于不一样搅拌桨形式和速度对溶氧也会产生很大影响。机械搅拌能损坏菌丝体,对发酵液过滤不利,采取空气搅拌器则克服了这一缺点,提升了罐利用率。采取大直径小浆叶搅拌器,在合适
15、增加转速下,能得较高吸氧率。另外将涡轮式改为多棒式搅拌器,可降低功率消耗近二分之一。 4.2.2 温度 灰色链霉菌对温度敏感。据报道,z-38菌株对温度高度敏感:250时,发酵单位为1180毫克/升/118小时;27时,,2041毫克/升/118小时;29时,2194毫克升/104小时,而31 时则为414毫克/升/72小时。故认为链霉素生产适宜培养温度为28.5左右。有些人认为不一定在2431范围,应随菌株不一样而适宜温度有所改变。4.2.3 pH值 pH值直接影响到发酵过程中多种酶活动,影响菌体对基质代谢速度,甚至改变菌体代谢路径及细胞结构。菌体发育生长和抗生素合成有不一样适宜pH值。发酵
16、过程中pH值必需给予控制,才能符合菌体生长和抗生素合成需要。影响pH值原因有生化反应过程特征,和发酵过程环境变量,如温度。另外,作为发酵过程氮源(NH4)2S04和碳源糖等补料加到发酵液中也会影响pH值。适合链霉菌菌丝生长pH约为6.57.0,适合于链霉素合成pH约为6.87.3,pH低于6.0或高7.5,对链霉素生物合成不利。pH对链霉素发酵影响很大,故很多国家为了正确控制pH值,使用pH自动控制装置。这么,可提升发酵单位,又能够降低培养基中碳酸钙用量,在发酵液预处理时,还可降低中和用酸量。4.3 提取工艺 经四级或三级发酵生物合成链霉素。发酵液用水稀释,草酸酸化至pH30左右,加热至758
17、0C,经过离心分离或板框过滤,除去大量不溶性菌丝体、酸性蛋白、钙镁离子、培养基残渣等杂质,冷却至15以下,再用NaOH中和得到符合离子交换工艺要求澄清链霉素原液。这一过程在生产上称为发酵液预处理。原液中链霉素在水溶液中离解成三价阳离子,应用钠型弱酸性阳离子交换树脂110树脂或大孔D一152树脂进行吸附,洗脱后成为链霉素洗脱液,在这一步提取过程中使水溶液中链霉素得到富集,含量由不到1浓缩到20,同时,经过离子交换树脂选择作用,除去绝大部分无机离子、色素、蛋白及可见固形物等。链霉素提取液经大孔伯胺基吸附树脂D303树脂经过Schiff反应除去双氢链霉糖、链霉胍、链霉胺等不含醛基链霉素同系物,再经强
18、酸性阳离子交换树脂125树脂和弱碱性阴离子交换树脂703树脂组成混合床脱盐中和得到提纯液。提纯液先经药用活性炭脱色处理,吸附色素和细菌内毒素,经减压蒸发,在45以下浓缩,链霉素含量由10左右浓缩到45。最终为了深入提升成品色级和确保细菌内毒素及热原合格,加入一定量药用活性炭脱色处理得到符合质量要求成品浓缩液。成品浓缩液经过石棉板除菌过滤,喷雾干燥得到白色或类白色无菌粉末,分装出厂。 4.4硫酸链霉素生产工艺步骤图菌种斜面孢子培养摇瓶种子培养种子罐培养空气粗过滤空气压缩机两级冷却气液分离过滤除菌原料预处理水解过滤醪液灭菌发酵发酵液发酵液预处理初步纯化精制成品分装出厂稀释草酸酸化加热至7580过滤
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