中性粒细胞碱性磷酸酶检验的诊断意义.docx

中性粒细胞碱性磷酸酶检验的诊断意义

R329.2+6A1672-5085（2012）19-0215-02
【摘要】目的讨论中性粒细胞碱性磷酸酶检验的诊断意义。方法对采集到的样本进行检验。结论中性粒细胞碱性磷酸酶的临床检验结果对细菌感染性疾病和病毒感染性疾病的鉴别、妇科疾病的鉴别诊断具有一定的参考价值，但对于除了结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎患者以外的其他脑膜炎患者的疾病诊断提供重要依据。
【关键词】中性粒细胞碱性磷酸酶检验诊断
中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophilicalkalinephos-phatase，NAP)是一种中性粒细胞胞内水解酶，属一种含锌的金属酶类，它主要见于成熟中性粒细胞、网状细胞和吞噬细胞。其他细胞(嗜酸性、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、巨核细胞、浆细胞、红细胞、血小板中)皆为阴性反应。有研究表明，NAP活性随中性粒细胞发育成熟有递增的趋势。
一、检验方法
临床测定中性粒细胞碱性磷酸酶的方法有组织细胞经化学染色后，在光镜下按Kapl0五级半定量法和测其酶活力的生化定量法。目前临床上NAP染色仍常采用Gomeri钙-钴法(硫化钴染色法)，NAP阳性率为镜检l00个成熟中性粒细胞，计数其中阳性反应的细胞数，以%表示。NAP积分计算方法为镜检100个成熟中性粒细胞，若全部细胞充满硫化钴颗粒，呈黑色团块，甚至盖核则判为“++++”，计4分；若胞浆内充满黑色颗粒，但颗粒之间有空隙，或者是胞浆内有3/4面积充满了致密的黑色颗粒沉淀则判为“+++”，计3分；若胞浆面积的l/2呈黑色或灰黑色颗粒沉淀(或者是全胞浆呈均匀灰色，无颗粒)则判为“++”，计2分，若胞浆面积的l/4呈黑色，或灰黑色颗粒沉淀，或者是全胞浆呈均匀浅灰色，无明显颗粒则判为“+”，计1分；若胞浆内无灰色或黑色沉淀则计0分。正常人NAP阳性率和积分都较低，一般阳性率为4%～56%，积分为7～51分。
由于NAP染色所采用的Gomeri钙-钴法是一种酶促反应，且此酶反应所需时间长，受技术因素影响大(如试剂pH、标本保存温度与时间、温浴时间等)，如在某些环节掌握不当，往往可致染色失败，所以不同的实验室有不同的正常值，各实验室应找出稳定的操作方法，以排除其影响因素，根据自身实验条件而建立参考范围且实验过程中应注意质量控制。
另外，测定NAP的标准操作程序中要求采集新鲜血液标本直接制备血涂片进行染色，但由于目前多数医院已使用抗凝全血标本进行全血细胞计数和细胞形态学检查，故有人对新鲜血标本和抗凝全血标本进行对比研究，发现利用EDTA抗凝全血制备的血涂片进行中性粒细胞碱性磷酸酶染色，其阳性率及积分均与新鲜血的染色结果接近，而用枸橼酸钠抗凝血和肝素抗凝血标本染色结果与新鲜血标本有非常大的差异，故建议临床上可用EDTA抗凝血替代新鲜血制备血涂片进行中性粒细胞碱性磷酸酶染色。但是也有研究表明，EDTA-K2对NAP有明显的抑制作用，且标本保存时间愈长影响愈大，加上不同保存温度对NAP结果也有较大影响，所以就要求我们尽量使用新鲜标本，最好在30min内涂片染色，或者4°C冰箱保存，尽快涂片，否则会影响实验结果。
当各种原因(大量糖皮质激素的应用、细菌感染等)导致中性粒细胞活化后，其中性粒细胞碱性磷酸酶活性增加，导致碱性磷酸酶染色阳性率和积分升高，因此它可以作为中性粒细胞功能的标志酶之一。NAP活性改变受到体内多种因素的影响或调节，如肾上腺皮质激素、ACTH、雌性激素、糖代谢、锌离子、基因等。
二、临床意义
(一)细菌感染性疾病和病毒感染性疾病的鉴别
对于临床上考虑感染性疾病的患者，除外了影响检验NAP结果的因素外，若NAP阳性率和积分升高，则考虑为细菌感染性疾病，若NAP阳性率和积分减低则提示为病毒感染性疾病。但是有研究发现，肾综合征出血热患者在发热期NAP明显升高，至恢复期明显降低，但仍高于正常。这是由于有文献报道肾综合征出血热病毒可侵犯人体内脏的血管内皮细胞和实质细胞，造成各种血细胞中颗粒改变，致使NAP活性增加，推断肾综合征出血热患者的NAP活性升高可能与病毒感染、病毒血症造成血细胞反应代谢增加或激素的变化有关。
(二)妇科疾病的鉴别诊断
1．盆腔包块或腹痛的鉴别诊断感染性炎症的妇科疾病NAP积分显著增高，如盆腔炎、盆腔脓肿、巴氏腺脓肿。因此临床上对于盆腔包块性质不明或腹痛原因不明的女性患者，若测得其NAP积分大于l00分时，应高度怀疑盆腔炎、盆腔脓肿等感染性疾病。由于有研究发现子宫肌瘤患者NAP积分也明显高于正常对照，其差异有显著意义，所以对于NAP升高的妇科患者，应通过妇科B超检查快速明确有无子宫肌瘤的可能。其他妇科疾病如卵巢囊肿、功血、子宫内膜癌、卵巢癌和宫颈癌等，虽然NAP积分也可高于正常值，但其升高不明显。
2．妊娠妇女末梢血中性粒细胞碱性磷酸酶活性有研究发现，妊娠妇女末梢血NAP活性有统计学意义上的明显升高，但是当患者出现妊高征或合并感染时，其NAP活性升高的会更加明显。因此正常妊娠妇女NAP活性的增高，不能认为是病理表现，而是一种正常的生理反应。但是当妊娠妇女的NAP活性显著增高时，则较大程度上提示有病理性的可能，应考虑是否存在妊高征或合并感染。由于NAP活性的检测具有操作方便和方法可靠的特点，所以对于妊娠妇女进行NAP活性的检查，对预防疾病具有一定的实用价值。
3．糖尿病患者中性粒细胞碱性磷酸酶活性由于糖尿病患者血中的中性粒细胞的黏附、趋化、吞噬和杀菌能力均不足，将其与葡萄糖和胰岛素一起培养可恢复其趋化性提示中性粒细胞功能与糖代谢有关。有研究发现，糖尿病患者，无论是l型糖尿病还是2型糖尿病，其NAP活性明显升高。这是因为1型糖尿病患者空腹及餐后胰岛素分泌不足，2型糖尿病患者胰岛素分泌相对不足及胰岛素分泌第一时相减弱都会出现物质代谢紊乱，导致糖原合成减低，分解代谢加速，致使外周组织为了适应粒细胞吞噬和代谢所需，粒细胞糖酵解加强，引起细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的相对增高，由于糖原的不断消耗，粒细胞分解加速，NAP活性增强。另外，由于NAP是一种含锌的金属酶，有人认为NAP活性与细胞锌含量有关，锌是NAP的激活剂，主要靠胃肠黏膜内锌载体蛋白吸收，糖尿病患者蛋白质代谢呈负氮平衡，影响锌载体蛋白合成，进而影响肠道对锌离子的吸收，导致尿锌增高，血及发锌含量降低，由于肠锌吸收障碍，摄入的锌离子通过胞饮作用进入粒细胞激活NAP，使其活性升高。
(三)脑脊液NAP的测定
对于各种脑膜炎患者，进行脑脊液的NAP活性测定对于鉴别诊断是十分有意义的。化脓性脑膜炎患者其脑脊液的NAP活性明显升高，而结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎患者其脑脊液的NAP活性无明显变化。
三、总结
中性粒细胞碱性磷酸酶的临床检验结果对细菌感染性疾病和病毒感染性疾病的鉴别、妇科疾病的鉴别诊断具有一定的参考价值，但对于除了结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎患者以外的其他脑膜炎患者的疾病诊断提供重要依据。
参考文献
[1]郑丽梅,徐国洁,葛晓军.rhG-CSF对急性粒细胞白血病化疗后粒细胞缺乏患者NAP活性的影响[J].实验与检验医学.2011年01期.
[2]沈亚文,王仲泉,邓宽国.标本采集方法对中性粒细胞碱性磷酸酶染色结果影响的观察[J].临床和实验医学杂志.2003年02期.

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