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β-防御素2在溃疡性结肠炎中的表达及意义

【中图分类号】R656.9【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）23-0190-02
【摘要】目的研究β-防御素2在溃疡性结肠炎中的表达及其与病情严重程度的相关性，探讨β-防御素2在溃疡性结肠炎的诊断及严重程度判断中的临床意义。方法应用免疫组织化学的方法检测60例溃疡性结肠炎粘膜组织标本，并根据病情严重程度分为3组，轻度26例、中度20例、重度14例，以及15例正常结肠粘膜组织标本中β-防御素2的表达。结果正常结肠粘膜组织标本中β-防御素2表达较弱；β-防御素2在轻、中、重度溃疡性结肠炎粘膜组织中的阳性表达率分别为38.46%(10/26)、75.00%(15/20)及92.85%(13/14)，并随病情严重程度增高而增高(P<0.05)。结论β-防御素2在溃疡性结肠炎中具有重要的意义。
【关键词】溃疡性结肠炎β-防御素2免疫组织化学
溃疡性结肠炎是一种非特异性结肠炎症,病变主要累及结肠黏膜和黏膜下层。但其病因和发病机制尚不明了,其发病可能与环境、遗传、感染、免疫、精神及过敏等因素有关,近年来其发病率明显上升,已引起国内外广泛关注。故从分子生物学角度探讨其发病机制及进展程度已经成为国内外近年来研究的热点及重点问题，为临床工作者提供一个诊断及评估其严重程度的参考。
1资料与方法
1.1资料
收集2008年9月到2010年6月我院内镜室取材及病理证实为溃疡性结肠炎的标本60例。并根据2000年成都全国慢性炎症性肠病学术研讨会制定的诊断标准,分为轻度(26例)、中度(20例)、重度(14例)三组。标本蜡块来源于我院病理科。患者均有详细的临床资料和内镜检查记录。男女比例为1.7:1；年龄为18～68岁。15例正常结肠粘膜组织标本为病理证实我正常的病例。所有标本均经10%福尔马林固定,石蜡包埋，3μm厚连续切片。
1.2方法
1.2.1EnvisionSystem免疫组织化学（IH）检测步骤
脱蜡至水后按免疫组化EnvisionSystem法操作。一抗兔抗人β-防御素2多克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司;二抗和S-P试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。染色以PBS代替一抗,设立阴性对照。
1.2.2图像采集设备
视野采图及测量采用BI2000高清晰图象处理系统软件。
1.2.3免疫组化染色结果判断
结果判定采用在400倍镜下随机采集10个视野，采用双项积分法行阳性细胞计数:(1)细胞阳性率:<5%，0分;5%～25%，1分;26%～50%，2分;51%～75%,3分;>75%,4分。(2)染色强度:淡黄色，1分;黄或深黄色，2分;褐或棕褐色，3分。两者计分相乘>1分为阳性。
1.3统计学方法
统计学处理用SPSS13.0统计软件进行分析，采用X2检验，检验水准取0.05，P<0.05，认为有统计学意义。
2结果
在正常结肠粘膜组织标本中β-防御素2表达较弱。溃疡性结肠炎粘膜组织中β-防御素2的表达为位于胞核的棕黄色颗粒，在轻、中、重度溃疡性结肠炎粘膜组织中的阳性表达率分别为38.46%(10/26)、75.00%(15/20)及92.85%(13/14)（X2=5.284,P=0.022），其差异有统计学意义，详见表2-1。
β-防御素2在正常结肠粘膜组织和不同严重程度溃疡性结肠炎粘膜中的阳性表达表2-1
3讨论
溃疡性结肠炎近年来国内外的发病率呈上升趋势，其发病原因一般认为主要与遗传、免疫、环境等因素有关。目前大多数研究认为与免疫反应异常有关，尤与肠粘膜局部免疫反应的异常关系密切[1]。各种细胞因子、炎性介质的相互作用形成复杂的甚至有自身放大作用的细胞因子网络，促进炎症反应，导致黏膜损伤，在溃疡性结肠炎的发生发展中起着十分重要的作用[2]。
防御素的表达异常可能与多种疾病的发病相关，其中与胃肠道疾病有一定联系。多数文献报道溃疡性结肠炎患者体内防御素水平发生了变化，从而推测防御素的异常表达可能是溃疡性结肠炎发病的重要因素之一。本研究旨在探讨防御素与溃疡性结肠炎的关系。
β-防御素2在正常状态下表达很少,而在受到炎性刺激时,β-防御素2则大量表达,发挥防御作用。通过研究发现β-防御素2在正常结肠粘膜组织中的表达较弱，均低于病变组的表达，且具有统计学意义，这说明β-防御素2的表达与溃疡性结肠炎的活动有关，这与目前国内外研究一致；本研究还显示，在不同病情严重程度的溃疡性结肠炎粘膜组织中β-防御素2的表达也不尽相同，在轻度溃疡性结肠炎粘膜组织中的表达明显低于高度溃疡性结肠炎粘膜组织中的表达，并且随着严重程度的增高而增加，具有统计学意义，这说明溃疡性结肠炎活动性越强，也就是严重程度越大，β-防御素2的表达越高，也就越能保护肠道组织，所以临床上可以通过检测β-防御素2来判断溃疡性结肠炎的严重程度[4]。
综上所述，本研究结果表明β-防御素2参与了溃疡性结肠炎的发生和发展过程，是溃疡性结肠炎发病过程中起保护作用的一个重要参与因素。β-防御素2不仅能保护肠道不受外来病原体的侵害，还对溃疡性结肠炎患者结肠粘膜的炎症反应有抵抗和修复作用。随着对β-防御素2与溃疡性结肠炎关系研究的不断深入，不仅为我们临床上诊断溃疡性结肠炎提供了一个依据。而且在治疗上防御素作为一种内源性抗菌肽，是一种理想型的新型药物，可利用基因工程技术大量制备，为溃疡性结肠炎的临床治疗提供新的方向。
参考文献
[1]欧阳钦,苗新普.炎症性肠病评估指标的临床应用[J].中华消化杂志2009,29(3):209-212.
[2]李慕然，姜葵，张庆瑜.溃疡性结肠炎患者结肠勃膜HBD-2和NF-KB及IL28的表达[J].国际消化病杂志2008，28(4)：340-343.
[3]吴小平，欧阳春晖.防御素与炎症性肠病[J].世界华人消化杂志,2008,16(8):3204-3207.
[4]常玉英，欧阳钦.溃疡性结肠炎勃膜中β防御素2与肿瘤坏死因子和白细胞介素印的表达及相互关系[J].中华消化杂志，2008,47(l):11-14.

-全文完-