发酵工程复习题.doc
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1、第一篇 微生物工业菌种与培养基一、选择题2实验室常用的培养细菌的培养基是( )A牛肉膏蛋白胨培养基B马铃薯培养基 C高氏一号培养基D麦芽汁培养基3在实验中我们所用到的淀粉水解培养基是一种( )培养基A基础培养基B加富培养基C选择培养基D鉴别培养基7实验室常用的培养放线菌的培养基是( )A 牛肉膏蛋白胨培养基B马铃薯培养基 C高氏一号培养基D麦芽汁培养基8酵母菌适宜的生长pH值为( )A5.0-6.0B3.0-4.0C8.0-9.0D7.0-7.59细菌适宜的生长pH值为( )A5.0-6.0B3.0-4.0C8.0-9.0D7.0-7.510.培养下列哪种微生物可以得到淀粉酶、蛋白酶、果胶酶、
2、多肽类抗生素、氨基酸、维生素及丁二醇等产品。A 枯草芽孢杆菌 B 醋酸杆菌 C 链霉素 D 假丝酵母二、是非题1.根据透明圈的大小可以初步判断菌株运用底物的能力( )2.凡是影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制性基质。( )3.在最适生长温度下,微生物生长繁殖速度最快,因此生产单细胞蛋白的发酵温度应选择最适生长温度。( )4.液体石蜡覆盖保藏菌种中的液体石蜡的作用是提供碳源( ).5.种子的扩大培养时种子罐的级数重要取决于菌种的性质、菌体的生长速度、产物品种、生产规模等( )6.碳源对配制任何微生物的培养基都是必不可少的( )7.亚硝基胍能使细胞发生一次或多次突变,特别适合于诱发营养缺陷
3、型突变株,有”超诱变剂”之称.9.参与淀粉酶法水解的酶涉及淀粉酶、麦芽糖酶和纤维素酶等。( )三、填空题1.菌种扩大培养的目的是提高菌种使用率,减少生产成本。2.进行紫外线诱变时,规定菌悬液浓度:细菌约为 106个ml,放线菌为 ,霉菌和酵母为 106107个ml. 紫外线(波长240-250nm)的作用机制重要是形成胸腺嘧啶二聚体以改变DNA生物活性,导致菌体死亡和变异。3.培养基应具有微生物生长所需要的六大营养要素是_ 碳源_、_氮源_、_能源_、_水_、_无机盐 _和_生长因子 _。4.碳源物对微生物的功能是_提供能源 _和_组成菌体细胞成分的碳架,微生物可用的碳源物质重要有_葡萄糖_
4、_、_蔗糖 _、_麦芽糖 _、_乳糖 _、_ 淀粉_等。5.工业发酵常用的有机氮源重要有_蛋白胨 _、_黄豆饼粉 _、_尿素_、_酵母粉 _、_玉米浆 _等。7.常用的纯种分离方法有平板划线, 平板稀释, 施加选择性压力分离法 三种.9.在微生物研究和生长实践中,选用和设计培养基的最基本规定是_目的明确_、_营养协调 _、 物理条件适宜 _、_价廉易得 _和_化学条件适宜 _。10.液体培养基中加入CaCO的目的通常是为了_中和微生物生长过程中不断产生的酸_。11.在运用平板的生化反映进行分离时,生长圈法所用的工具菌是一些 营养缺陷型菌株 ,抑菌圈法所用的工具菌是一些 抗生素 的敏感菌.13.
5、分离放线菌时,可以在样品的菌悬液中加几滴10%的酚,以克制 细菌 的生长,分离酵母菌时,可在培养基中添加一定量的 抗生素 以克制细菌的生长.14.培养基按用途分可分为孢子培养基 、种子培养基、发酵培养基 和补料培养 四种类型。15.制备淀粉水解糖的方法有化学法 、酶解法 、和生物发酵法 。四、名词解释1.培养基:是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都具有碳水化合物、含氮物质、无机盐(涉及微量元素)以及维生素和水等。3.次级代谢产物:是指微生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、对该生物无明显生理功能,或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质五、问答题1. 什么是前体?前
6、体添加的方式?答:前体指某些化合物加入到发酵培养基中,能直接彼微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去,而其自身的结构并没有多大变化,但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。前体使用时普遍采用流加的方法。2.简述菌种保藏的基本原理和菌种保藏方法。答:基本原理:根据微生物的生理生化特性,人为地发明条件,使微生物处在代谢不活泼,生长繁殖受到克制的休眠状态,以减少菌种的变异。保藏方法:1斜面保藏法。2穿刺保藏法。3沙土管干燥保藏法。4真空冷冻干燥保藏法。5液氮保藏法。6悬液保藏法。7低温保藏法。3. 微生物工业用的菌种有哪几大类,能否举出各类中常用的工业微生物名称和其反映产物。答:类型:1细菌,
7、乳酸杆菌,产生乳酸。2放线菌,红霉素链霉菌,产生红霉素。3霉菌,青霉,产生青霉素。酵母,啤酒酵母,产生啤酒。5. 在大规模发酵的种子制备过程中,实验室阶段和生产车间阶段在培养基和培养物选择上各有何特点?答:实验室阶段培养物选择的原则:种子能扩培到一定的量和质,获得一定数量和质量的孢子/菌体。培养基的选择应当是有助于菌体的生长,对孢子培养基应当是有助于孢子的生长。在原料方面,实验室种子培养阶段,规模一般比较小,因此为了保证培养基的质量,培养基的原料一般都比较精细。生产车间阶段培养物的选择原则最终一般都是获得一定数量的菌丝体。培养基选择一方面考虑的是有助于孢子的发育和菌体的生长,所以营养要比发酵培
8、养基丰富。在原料方面:不如实验室阶段那么精细,而是基本接近于发酵培养基,这有两个方面的因素: 一是成本二是驯化。6.依据不同的分类方法,培养基有哪几种类型?答:按组成成分:1合成培养基,2天然培养基; 按状态分:固体,半固体,液体;按用途分:孢子,种子,发酵。7、淀粉酶可以通过微生物发酵生产,为了提高酶的产量,请你设计一个实验,运用诱变育种方法,获得产生淀粉酶较多的菌株,(1)写出重要实验环节。(2)根据诱发突变率和诱变不定向性的特点预期实验结果。答案:(1)重要实验环节:将培养好的菌株分两组,一组用一定剂量的诱变剂解决,另一组不解决作对照。配制含淀粉的培养基。把诱变组的菌株接种于多个含淀粉的
9、培养基上,同时接种对照组,相同条件培养。比较两种菌株菌落大小,选出透明大的菌株。(2)预期实习结果:由于诱变率低,诱变组中大多数菌落周边的透明圈大小与对照组相同。由于诱变不定向性,诱变组中很少数菌落透明圈与对照组相比变大或变小。第二篇 发酵设备一 选择题1.当内径为500mm的发酵罐中的挡板宽度为50mm时,则满足全挡板条件的挡板块数为A 5 B 3 C 6 D 42、机械搅拌发酵罐中的档板宽度一般为 A 0.1-0.12D B 0.3-0.4D C 1-1.2D D 0.2-0.3D二.是非题1.对生物进行液体深层培养的反映器称为发酵罐( ).2.标准式发酵罐的罐高与罐体直径比为5.4.(
10、)3.嫌气发酵罐在结构上比需氧发酵罐简朴得多,但一般须安装水力喷射洗涤装置( )三.填空题1.常用的需氧发酵罐有 机械搅拌通风式发酵罐 、 空气带升环流式发酵罐 、 高位塔式发酵罐 、 自吸式发酵罐 等,其中 机械搅拌通风式发酵罐 作为通用式发酵罐而占据主导地位。2.发酵罐中的搅拌器按液流形式可分为 轴向流 和 径向流 两种,圆盘涡轮式搅拌器使用比较广泛,圆盘上的搅拌叶一般有 箭叶式 、 平叶式 、 弯叶式 三种。3.酒精发酵罐一般为 圆筒 形,底盖和顶盖为碟形或锥形,国内外啤酒厂使用较多的是 圆筒体锥底 形发酵罐。4、填写下图空气除菌设备流程图中各部分的设备名称:1 粗过滤器 ,2 空气压缩
11、机 ,4 冷却器 ,8 加热器 9 空气过滤器 。5、下图为标准通用式发酵罐的几何尺寸比例图,其中H/D= 1.7-4 , d/D= 1/2-1/3 W/D= 1/8-1/12 , B/D= 0.8-1.0 . 四.名词解释1、机械搅拌发酵罐:也称标准式或通用式发酵罐,它是运用机械搅拌器的作用,湿空气和发酵液充足混合,并溶解在发酵液中,以保证微生物的生长繁殖所需要的氧气。2、气升式发酵罐:是应用最广泛的生物反映设备。这类反映器具有结构简朴、不易染菌、溶氧效率高、能耗低等优点。 有多种类型,常见的有气升环流式、鼓泡式、空气喷射式等。3、自吸式发酵罐:是一种不需要空气压缩机,在搅拌过程中自吸入空气
12、的发酵罐。五.简答题(见P85之146)1. 机械搅拌发酵罐中,搅拌器的搅拌作用是什么?答:将空气打坏成小气泡,增长气液接触界面,提高氧的传质速率,同时使发酵液充足混合,液体中的固体物质保持悬浮状态。2. 机械搅拌发酵罐的基本结构涉及哪些部件?答:罐体,搅拌器,挡板,轴封,冷却装置,消泡器,变速装置,空气分布装置3. 判断下图分别为什么种生物反映器?请简述其操作原理。 外循环帯升式发酵罐:操作原理:运用空气喷嘴射出的高速空气,将空气泡分割成细泡,与上升管的发酵液密切接触,由于上升管的发酵液轻,加上压缩空气的喷流动能,因此使上升管的液体上升,罐内液体下降而进入上升管,形成反复的循环。自吸式:运用
13、带有固定导轮的三棱空心叶轮的搅拌器,运用其叶轮向前旋转时,叶片与三棱形平板内空间的液体被甩出去而形成局部真空,于是将罐外空气通过搅拌器中心的吸入管而被吸入罐内,并与高速流动的液体密切接触,形成细小的气泡分散在液体之中,气液混合流体通过导轮即转子流到发酵液主体。4、简述好氧发酵过程所需使用哪些设备?答:5、简述通风机械搅拌发酵罐的基本结构有哪些?答:罐体,搅拌器,挡板,冷却装置,空气分布装置,轴封,变速装置,消泡器第三篇 发酵工艺过程的控制一、选择题1微生物分批培养时,在延迟期( )A 微生物的代谢机能非常不活跃 B 菌体体积增大C 菌体体积不变 D 菌体体积减小2. )一般情况下,运用酵母菌发
14、酵生产酒精时,投放的适宜原料和在产生酒精阶段需要的必要条件分别是 (A) 玉米粉和有氧 (B) 大豆粉和有氧 (C) 玉米粉和无氧 (D) 大豆粉和无氧3发酵过程中,不会直接引起pH变化的是( )A营养物质的消耗 B微生物呼出的COC微生物细胞数目的增长 D次级代谢产物的积累4、在好氧发酵过程中,影响供氧传递的重要阻力是( ) A氧膜阻力 B气液界面阻力 C液膜阻力 D液流阻力5. 酵母菌培养过程中的生长曲线如图所示:a、b、c、d分别表达不同的生长时期,其中适于作为生产用菌 种的时期是( )AaBb Cc Dd6在实际生产中,对数期的长短取决于()培养罐的大小 接种量的大小 培养基的多少 代
15、谢产物合成的多少 A. B C D7通过影响微生物膜的稳定性,从而影响营养物质吸取的因素是() A.温度 B. pH C.氧含量 D前三者的共同作用8. 工业上运用谷氨酸棒壮杆菌大量积累谷氨酸,应采用( )。 A加入葡萄糖的投放量 B加大菌种的密度 C改变菌种细胞膜通透性 D改变培养基碳源很氮源的比例9、温度对发酵的影响,不对的的是 A.温度过高,发酵周期缩短,产量减少. B 温度不影响生物合成的途径 C 温度能影响菌种对营养物质的吸取. D 菌体生长和产物合成所需的最适温度不一定相同10、下列关于微生物对氧的需求叙述对的的是( ) A 产甲烷杆菌属于厌氧呼吸,但氧的存在不影响其生存。 B 链
16、球菌进行厌氧呼吸,不能接触空气 C 黄色短杆菌在空气充足时才干产生谷氨酸 D 谷氨酸棒状杆菌是厌氧呼吸二、是非题1.分批培养时,细菌一方面经历一个适应期,此期间细胞处在代谢活动的低潮,所以细胞数目并不增长。( )2.最适的生长繁殖温度就是微生物代谢的最适温度。( )3. 最低温度是指微生物能生长的温度下限。最高温度是指微生物能生长的温度上限。( )4、连续培养达成恒定期,比生长速率等于稀释率,即=D。()5.发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢产物的形成都与搅拌速度有关。()6、机械搅拌是提高溶氧系数行之有效的普遍采用的方法三、填空题1.一条典型的生长曲线至少可分为_延迟期_、_对数期_、_稳定期
17、_和_死亡期 _四个生长时期。2. 按投料方式分,发酵过程可分为 分批发酵 ,分批发酵 , 连续发酵 三种类型,按菌体生长与产物形成关系分为 生长相关型 , 部分相关型 , 生长不关型 三种类型.3影响pH值变化的因素有 培养基的成分和微生物的代谢 。4.连续培养与单批培养相比,其优点有 提高设备运用率、 提高产量 _、 便于自动控制 、 便于分期控制 ;而缺陷重要是_菌种退化_,另一方面是_易遭杂菌污染 。5.通常,放线菌最适pH值的范围为_ _,酵母菌的最适pH范围为_ _,霉菌的最适pH范围是_ _。 五、简答题1. 影响微生物需氧的因素有哪些?如何调节通气搅拌发酵罐的供氧水平?答:因素
18、:细胞浓度直接影响培养液的摄氧率,在分批发酵中摄氧率变化很大,不同生长阶段需氧不同,对数生长后期达最大值。培养基的成分和浓度显著影响微生物的摄氧率,碳源种类对细胞的需氧量有很大影响,一般葡萄糖的运用速度比其他的糖要快。如何调节:一般认为,发酵初期较大的通风和搅拌而产生过大的剪切力,对菌体的生长有时会产生不利的影响,所以有时发酵初期采用小通风,停搅拌,不仅有助于减少能耗,并且在工艺上也是必须的。但是通气增大的时间一定要把握好。2. 泡沫对发酵有哪些有益之处,哪些有害之处?答:益处:气体分散,增长气液接触面积。 坏处:引起逃液,导致损失;发酵液体积减少影响收率;增长杂菌污染机会;使菌体量减少;妨碍
19、菌体呼吸,导致代谢异常,导致菌体提前自溶。3. 发酵过程温度的选择有什么依据?答:(1)根据菌种种类和生长阶段选择;(2)根据培养条件选择;(3)菌生长快,维持在较高温时间要短些,菌生长慢,维持在较高温时间可以长些。5. 发酵中泡沫形成的因素是什么?常用的消泡剂有哪几类?答:因素:(1)由外界引起的气流被机械地分散形式;(2)发酵过程中微生物代谢及培养基的成分产生的气体集结而成的。分类:天然油脂,高级醇类,脂肪酸和脂类,聚醚类,硅酮类。6. 发酵操作方式可分为分批、流加和连续三种,试述三种方法的优缺陷。答:一、分批发酵优点:操作简朴,周期短,染菌机会减少和生产过程,产品质量易于控制。缺陷:产率
20、低,存在基质克制问题,出现二次生长现象,对基质敏感的产物,或者次级代谢产物,抗生素,不适宜用分批发酵。二、流加发酵优点:1能维持适当的发酵条件2减缓代谢有害物的不利影响3避免快速运用碳源的阻遏效应。缺陷:没有物料取出,产物的积累最终导致比生长率的下降,有物料的加入,增长了染菌的机会。三、连续发酵优点:设备运用率高,单位时间产量高,容易控制,可及时排除发酵过程中的有害物质。缺陷:由于长时间不断向发酵系统加入物料,增长染菌几率,连续发酵时间长,容易产生菌种突变。7. Monod方程中,Ks的意义是什么? 答:Ks为称作饱和常数的系统常数(g基质/L),其值为此系统可达成的最大比生长速率值的半数(即
21、1/2max值)。8. 深层过滤的对数穿透定律。答:进入滤层的微粒数与穿透层的微粒数之比的对数是滤层厚度的函数。9. 某菌株的比生长速率为0.15h-1,试求该微生物的倍增时间。10. 氧从气相传递到细胞内要克服哪些阻力,其中最大阻力是哪一个。答:气膜传递阻力;气液界面传递阻力;气液界面通过液膜的传递阻力;液相主体的传递阻力;细胞表面的传递阻力;固液界面的传递阻力;细胞内的传递阻力;细胞壁的阻力;反映阻力。其中最大最大阻力是气液界面的传递阻力。11. 描述供氧与耗氧平衡方程式。答:CcQo2=KLa(C*-CL)12.简述温度对微生物生长和发酵的影响。答:任何微生物的生长温度均在一定范围内,可
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