T-A克隆操作规程.doc
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5、验证。3、连接短暂离心载体和对照插入DNA ,使沉于管底。取新的经灭菌处理的0.5ml eppendorf管,按以下连接体系加入各种物质,胶回收产物量视电泳结果和吸光度而定,用无菌水补足体积到10 L。用枪混匀后在微量离心机上将液体全部甩到管底,于14-16保温8-24小时或4过夜。 16S胶回收产物X uL2X Rapid ligation buffer5.0 LT-Vector1.0 LT4 DNA ligase1.0 LddH2O(3-X) uL4、转化1)、取足够量的冰制成冰盒,从-80冰箱拿出大肠杆菌JM109高效感受态置于冰盒中5 min使其融化,轻轻摇晃混匀。3uL 连接产物2)
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