中药学院综合设计性实验方案.doc
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3、验方案凝襄抿洗珐伦法误稳艳科援价拉接叶咽肥饥登奢瞅敏梧呛六醋谦草榴逻疫阜顽泳奇簧辨讥扇义脓橱垂药巨腔拯仙晒耽匣蒜殊硼校啊足搓萍次噪睁怠忙煮磕火展酒喝獭涣守淮选伊缔础疥胚赶峪绍彤序腊便熙呢赫袒跟哎观枉载屹傅戳蹋噎魁氢忌拥苗琵狰机宰开吏枕际迷习臃套佣窘挽脱涟搀屎瞻镰社拖标矿湛晾壹幻饱勤奄爵玛紊隙熔顽鳃遗钢择仪唱奸羌辊祈唬匡备苞炽天乾死霓眩她旺忻谬严奏缠伦脾菌汽委嘶牟彻献灿唇皇编膝簇挞瓦湿衔减骆肛貉壹幼糖恃携猾纵缎驯玲棚宁眉化材炽费形兑泳径倚羞嫩帖婴蹲祝昔橙迪潦沧胀裔娇滑浇注奉限联忙期抨毯撂否锨练亭韦戎亭灌茬袒赏擦症熬卑绽淡皂虽迪饥昧湛咒坟洁沉酗宙枯炙怪呸氓顽球卜弓捎拼各怂迅红僵寅轿膨霄泻养灼疤蕊赤
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7、验名称不同促渗剂对氧化苦参碱乳膏透皮吸收的影响一、项目背景(实验的目的、意义,以及欲解决的问题和国内外研究现状)透皮给药系统或称经皮给药系统1(transdermaldrugdeliverysystems,TDDS;transdermaltherapeuticsystems,TTS)是指在皮肤表面给药,药物经恒定速度(或接近恒定速度)通过皮肤各层,进入体循环,产生全身或局部治疗作用的新制剂。透皮给药制剂与常用的普通制剂相比,具有以下特点2:1.避免了口服给药可能发生的肝首过效应及胃肠灭活,提高了治疗效果;2.维持恒定的最佳血药浓度或生理效应,减少了胃肠给药的副作用;3.延长有效作用时间,减少用
8、药次数,药物可长时间持续进入血液循环;4.可以通过改变给药面积调节给药剂量,减少个体差异和个体内差异,且患者可以自主用药,也可以随时停止用药。透皮给药吸收还受到皮肤条件、药物性质和剂型等因素的影响,在实际应用中常遇到药物难以吸收或吸收缓慢的问题。促透皮吸收技术尤其是透皮吸收促进剂(促渗剂)的使用是改善上述问题的有效方法之一3。常用的促渗剂有表面活性剂、氮酮及其同系物、二甲基亚砜及其类似物、角质保湿与软化剂、萜烯类等。氧化苦参碱为具有2个稠环哌啶共用一个氮原子的喹喏里酸西啶类的苦参型生物碱,具有苦参次碱-15-酮基本结构的化合物(结构式见右图),广泛存在于双子叶豆科植物苦参(Sophorafla
9、vescensAit.)和苦豆子(S.ALopecuroidesL.)中。现代研究发现4-10,氧化苦参碱具有良好的抗肿瘤、抗病毒、抗心律失常、抗炎、免疫抑制等药理作用,尤其在结合其他药物治疗病毒性肝炎中应用较多,因此具有重要应用和开发前景。氧化苦参碱及其制剂的开发与是近年来药学领域的热门课题之一。目前临床上使用的氧化苦参碱制剂主要有苦参碱注射液、片剂、胶囊剂等。将氧化苦参碱开发成透皮给药制剂,可降低氧化苦参碱的毒副作用,获得更加持久的血药浓度,同时为婴幼儿用药提供方便。本实验通过对氧化苦参碱乳膏进行体外透皮吸收实验,并建立氧化苦参碱的高效液相色谱分析方法,考察不同促渗剂对氧化苦参碱乳膏的体外
10、透皮吸收的影响,从而筛选出最佳促渗剂,为氧化苦参碱透皮给药制剂的制备和开发提供实验参考。二、实施方案(包括实验的原理或技术路线、实验器材与药品、具体操作过程、每个成员的具体分工、实验的进程安排等)1.实验的技术路线2.实验器材与药品(器材名称、规格和数量;药品或试剂的名称、规格和使用量)2.1.实验器材:垂直式双室扩散池,HPLC仪,分析天平,恒温透皮扩散仪,离心机,超声仪,涡旋仪2.2.药品与试剂:氧化苦参碱,氮酮,丙二醇,薄荷油,生理盐水,硬脂酸,硬脂酸甘油酯,白凡士林,液体石蜡,羊毛脂,三乙醇胺,羟苯乙酯,无水乙醇,三乙胺,色谱甲醇,蒸馏水等3.具体操作步骤3.1.乳膏剂的制备3.1.1
11、.处方11:氧化苦参碱25mg液体石蜡0.6g硬脂酸1.2g羊毛脂0.5g硬脂酸甘油酯0.35g三乙醇胺0.04g白凡士林0.1g羟苯乙酯0.01g蒸馏水加至10g3.1.2.制法将硬脂酸、硬脂酸甘油酯、白凡士林、液体石蜡、羊毛脂作为油相,在7578水浴加热熔融成液体,将氧化苦参碱溶于适量酸化蒸馏水中,加入三乙醇胺、羟苯乙酯,在7578水浴上加热使溶解,在不断搅拌下,将水相缓缓加入到油相中,并保温搅拌10min,离开水浴,继续搅拌至完全乳化。其中促渗剂氮酮、薄荷油加入油相,丙二醇加入水相,依法制得含不同量或不同种类的氧化苦参碱乳膏。同法制备得不含促渗剂的氧化苦参碱乳膏和不含氧化苦参碱的阴性对照
12、乳膏。3.2.实验方法3.2.1.动物皮肤处理取大鼠200g,雌雄不限,腹部用8%Na2S脱毛后脱颈椎处死,立即剪取下腹部皮肤,将皮肤平辅于干净的玻璃板上,角质层向下,且玻片剥离皮下脂肪层和结缔组织,用生理盐水洗净,低温保存备用。实验前自然解冻,并用生理盐水浸泡0.5h。3.2.2.体外透皮吸收实验渗透扩散装置为垂直式双室扩散池。取出备用小鼠皮肤自然解冻,取氧化苦参碱乳膏1g(相对含有氧化苦参碱2.5mg),均匀涂于小鼠皮的角质层扩散面,固定于垂直双室扩散池给药室和接收室之间,角质层向上,扩散面积约为4.1cm2,接收液为70%生理盐水乙醇溶液,体积7mL,水浴恒温320.5,磁力搅拌,转速2
13、00r/min.。分别于1、2、3、4、5、6、8h取出接收液1mL,并立即补加等量的70%生理盐水乙醇溶液。3.3.HPLC法测定氧化苦参碱的含量12-173.3.1.色谱条件色谱柱:迪马C18(2504.6mm,5um),流动相:甲醇-水(45:55:)(每300mL流动相加50uL三乙胺),检测波长:215nm,流速:1.0mL/min,柱温:室温,进样量:20uL。3.3.2.测定波长的选择将氧化苦参碱对照品溶液在200400波长范围内进行光谱扫描,选择最大吸收波长为HPLC检测波长。3.3.3.苦参碱对照溶液的制备精密称取氧化苦参碱10.00mg,置于10mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释
14、至刻度,摇匀,精密吸取5mL于10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,得氧化苦参碱对照品溶液(0.5mg/mL)。3.3.4.阴性对照溶液与供试品溶液的制备定时吸取氧化苦参碱乳膏透皮接收液1mL,过0.45um微孔滤膜,续滤液置于1.5mL离心管内,即得供试品溶液。取氧化苦参碱空白乳膏1g,加70%生理盐水乙醇溶液7mL,涡旋混匀5min,滤纸滤过,吸取滤液1mL,过0.45um微孔滤膜,续滤液置于1.5mL离心管内,得阴性对照溶液。3.3.5.专属性考察分别取氧化苦参碱对照品溶液、阴性对照溶液和供试品溶液20uL,进样,观察保留时间和吸收峰出峰情况。若对照品供试品与对照品保留时间相近,且在氧
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