菌种室作业规程-Microsoft-Word-文档.doc
《菌种室作业规程-Microsoft-Word-文档.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《菌种室作业规程-Microsoft-Word-文档.doc(18页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、氨基酸生产作业规程赖氨酸菌种室1.目的与原理 1.1目的:通过菌种的优化及扩大培养为发酵车间提供优质菌种。1.2原理:菌种筛选过程:赖氨酸生产菌属于细菌菌属,以裂殖方式繁殖。1.3反应方程式:无2.工艺流程2.1工艺简述:赖氨酸菌种培育是将优质菌种通过摇瓶进行扩大培养。2.2 工艺流程图2.2.1菌种流程方框图活化平板冻存管复筛初筛分离钢瓶三角瓶3.工艺参数和原辅料质量标准3.1 平皿制作工艺参数项目单位标准值平皿干燥灭菌温度180时间min120平皿培养基灭菌温度120时间min20平皿培养温度37时间小时24冷藏43.2钢瓶接种工艺参数项目单位标准值钢瓶硅胶管(一次灭菌)灭菌温度123灭菌
2、时间min30钢瓶灭菌(二次灭菌)温度123时间min60钢瓶冷藏温度43.3菌种活化工艺参数项目单位标准值紫外灯灭菌min30菌种冷冻温度-85消毒酒精含量%75平皿培养时间小时24温度373.4菌种培养工艺参数项目单位标准值三角瓶干燥灭菌时间min120-180温度180培养基时间min20温度120消毒新洁尔灭含量%0.1摇床培养转速rpm/min190温度37时间小时74.设备一览表设备编号设备名称规格型号设备位号主/辅机 生 产厂家2-22-HH-003中型压力蒸汽消毒柜工作压力0.21MPa山东新华医疗器械股份有限公司2-22-HH-004卧室圆形压力蒸汽灭菌器工作压力0.14MP
3、a张家港市华菱医疗设备制造公司2-22-HH-005电热恒温鼓风干燥箱SFe-01B400*400*450湖北省黄石市恒丰医疗器械有限公司2-22-HH-006电热恒温鼓风干燥箱SFe-01B400*400*450湖北省黄石市恒丰医疗器械有限公司2-22-HH-007电热恒温鼓风干燥箱SKFe-01400*400*450湖北省黄石市医疗器械厂2-22-HH-008生化培养箱SP-01型湖北省黄石市恒丰医疗器械有限公司2-22-HH-009生化培养箱SP-01型湖北省黄石市恒丰医疗器械有限公司2-22-HH-010生化培养箱LRH-150上海益恒实验仪器有限公司2-22-HH-011生化培养箱L
4、RH-150上海益恒实验仪器有限公司2-22-HH-012恒温培养振荡器ZHWY-211B上海智诚分析仪器制造有限公司2-22-HH-013恒温培养振荡器HWY-2112上海智诚分析仪器制造有限公司2-22-HH-014恒温培养振荡器SKY-211C2-22-HH-015恒温培养振荡器SKY-211C2-22-FL-007低速大容量多管离心机LXJ-11B上海安亭科学仪器制造有限公司2-22-Q-007净化台ZHJH-1118上海智诚分析仪器制造有限公司2-22-Q-008净化台ZHJH-1118上海智诚分析仪器制造有限公司2-22-Q-009净化台江阴净化设备厂2-22-Q-010全自动小型
5、发酵罐KF-2.5L2-22-Q-011全自动小型发酵罐KF-2.5L2-22-Q-012全自动小型发酵罐KF-2.5L2-22-HD-005冰柜BD/C-2585江苏白雪电器股份有限公司2-22-HD-006冰柜BD/C-2585江苏白雪电器股份有限公司2-22-HD-007冰柜BD/C-2585江苏白雪电器股份有限公司2-22-HD-008冰柜BC/BD-275SB青岛海尔特种电冰柜有限公司2-22-HD-009电冰箱BCD-210N210L苏州三星电子有限公司2-22-HD-010电冰箱BCD-210N210L苏州三星电子有限公司2-22-HD-011电冰箱KK23E-16TI228L西
6、门子冰箱厂2-22-HD-013分体落地式空调KFR-71LW/E广东美的制冷设备有限公司2-22-HD-014分体落地式空调KFR-71LW/E珠海格力电器股份有限公司5.操作规程 5.1平板制作操作规程5.1.1无菌平板准备:将完整无破损的平板洗净,烘干,放入平皿桶(正面朝上)。将平皿桶出气孔打开,再放入烘箱中于180度干烘灭菌2小时,灭菌完毕排气孔关闭。5.1.2平皿配制:按照配方配制培养基,准确称量,在将药品放入烧杯,先用冷水将其搅匀,后加热直至溶剂完全溶解为止,溶解彻底后用30%NaOH将溶液PH调至7.2-7.3。无菌检测平板用10%KOH调节PH至7.20.2,定容。5.1.3培
7、养基分装:将配制好并调完PH值的培养基装在500ml三角瓶中,培养基体积不要超过300ml,然后塞好棉塞,用铝箔纸包好。5.1.4灭菌:将准备好的培养基于120度20分钟灭菌。5.1.5平板:将干热灭菌完的平皿桶从烘箱取出,提前放入无菌室通无菌空气并打开无菌室紫外灯照射30分钟,抗生素需要提前从冰箱中拿出解冻。5.1.6倒平板:当灭菌完毕的培养基冷却的60度以下时,将装有培养基的三角烧瓶用新洁尔灭擦拭。菌种平板应先用无菌吸管加入相应的抗生素(抗生素体积提前计算),按照一个方向摇匀。30ml/平皿(菌种平板)倒入培养基。无菌检测平皿按20ml/平皿倒培养基。5.1.7保存:倒完平板后,打开紫外灯
8、,等到平板冷却凝固后(1小时)再进入无菌室将屏蔽倒置平皿桶中,放培养箱中37C培养24小时,取出无菌检测平皿放入无菌室中保存。菌种平板则放入4C冰箱中保存。5.2 钢瓶接种操作规程5.2.1钢瓶准备:5.2.1.1将硅胶管上需要夹夹子的地方缠上橡胶带,以防损坏硅胶管。5.2.1.2钢瓶试漏,将钢瓶口与接口接好,通入0.2Mpa的空气(或氧气)进行试漏若无气泡冒出,则说明钢瓶密封完好,若有气泡出现,需要重新处理后再次试漏,直至无气泡冒出为止。5.2.1.3将钢瓶内装上水,硅胶管放在水中于123C30min进行第一次灭菌,灭菌完毕将硅胶管从水中拿出,钢瓶内水倒掉。5.2.1.4钢瓶包扎:将钢瓶内加
9、热20ml蒸馏水,检查钢瓶口橡皮垫是否完好,将硅胶管插入钢瓶内,瓶口用铝箔纸和纱布包好,另一头先用灭菌的棉花做棉塞,再用牛皮纸包好,硅胶管卷到瓶上待灭菌。5.2.1.5将包扎好的钢瓶123C60min进行二次灭菌,灭菌完毕后,对钢瓶进行检查,传入无菌室备用。5.2.2钢瓶接种:5.2.2.1钢瓶接种时,先用新洁尔灭喷洒,百级及缓冲,提前1小时打开无菌风,紫外线30分钟灭菌。5.2.2.2进无菌室前,先用肥皂彻底洗手,在缓冲间更换无菌服,戴口罩,进风淋室用无菌风吹3分钟后进百级,进百级后用新洁尔灭浸泡双手及手腕3分钟,进行消毒。5.2.2.3将培养好的盛有菌种培养液的三角瓶传入百级。5.2.2.
10、4拿入无菌室的三角瓶必须先用新洁尔灭洗瓶灭菌,然后对瓶口进行灼热灭菌,及时按灭棉塞火源,传入净化台备用。5.2.2.5每三个三角瓶并入一个钢瓶内,并瓶时,尽量将三角瓶口余钢瓶隔远一点,防止瓶口相撞。5.2.2.6三角瓶倒入钢瓶后,对每个钢瓶做好平板检测。5.2.2.7将准备好的钢瓶放入4C冰箱保存,经检测平板无染菌后,方可拿到车间使用。5.3 菌种活化操作规程5.3.1菌种活化前,打开无菌风、紫外灯照射30min。5.3.2检查菌种冻存管有无松动、破损。5.3.3菌种从-85拿出时必须自然解冻,不能直接加热,不能水浴加热。5.3.4活化用平板提前拿出检查有无染菌,并用75%酒精纱布擦拭一遍。提
11、前使平板达到常温。5.3.5进行无菌室前,先用肥皂彻底洗手,在缓冲间更换连帽无菌室,带好口罩。进风淋室用无菌风吹3分钟进百级室,进百级后用0.1%新洁尔灭浸泡双手3分钟,进行消毒,再用新洁尔灭擦拭超净台。5.3.6用75%的酒精擦拭冻存管,小心将冻存管拧开,用无菌吸管吸取0.07-0.1ml菌液到平板上,所有平板吸完后,用灭菌的玻璃棒进行涂布,涂布在平板上画圈,保证涂布均匀。5.3.7活化时小心谨慎,若吸管和玻璃棒碰到其他地方应重新换一个,以防染菌。5.3.8涂布完成后将平板在超净台上静止2分钟后放入,倒置放入培养箱培养。培养温度为37、培养时间为24hr。5.3.9培养箱要提前打开并专用,不
12、得与其他杂菌培养平板混用,确保培养箱温度正确.5.4 菌种扩大培养操作规程5.4.1 三角瓶准备5.4.1.1将洗净、干燥的2L三角瓶,先检查是否有破损,然后用棉花蘸水做好棉塞,棉塞一定要结实不能松软。5.4.1.2做好棉塞的三角瓶,置于烘箱中180干热灭菌2小时,至棉塞发黄。5.4.2三角瓶的配制5.4.2.1仔细检查已经准备好的三角瓶,检查三角瓶及瓶口是否有裂纹,棉塞是否合格。5.4.2.2按照配方配制三角瓶培养基,配制过程要精心,将各种物料加入后,调PH,定容(配制过程中,先用热水溶解物料,再加水调PH,定容)。5.4.2.3将三角瓶棉塞顺时针旋转拿出,放好,三角瓶棉塞一一对应,不要混淆
13、,用75%的酒精纱布清理干净三角瓶瓶口的残留棉花。5.4.2.4将培养基倒入检查好,干净的三角瓶中(500ml/个)用酒精纱布清理瓶口培养基,旋入棉塞,盖上铝箔,准备150ml三角瓶一个,做好棉塞留样,检测。5.4.2 灭菌5.4.2.1将装好培养基的三角瓶灭菌12020min.5.4.2.2灭菌完毕,仔细检查三角瓶有无破损、裂纹,棉塞松动等问题后,传入百级无菌室。5.4.3 三角瓶接种5.4.3.1先用0.1%新洁尔灭喷洒超净台和无菌间,开启无菌风和紫外线30分钟,并提前将抗生素1、2、3拿出冷冻室,常温解冻后传入无菌室备用。5.4.3.2接种时将活化后的平板拿入无菌室,用75%酒精小心擦拭
14、,仔细检查平板是否有染菌,否则不准使用。5.4.3.3进无菌室前,先用肥皂彻底洗手,在缓冲间更换连帽无菌服,带上口罩,风淋3分钟,进行消毒,再用新洁尔灭擦洗超净台。5.4.3.4用0.1%新洁尔灭擦洗1、2、3瓶及三角瓶外壁后,放入超净工作台。5.4.3.5将抗生素1、2、3摇匀,用无菌吸管移取7ml、7ml、17.5ml上述溶液于无菌三角瓶中摇匀,再用无菌吸管按无菌操作分别向每个三角瓶中加入混合 抗生素2.3ml.5.4.3.6平板菌种接种过程:用75%酒精擦洗接种环及接种棒,检查丝棒的接口是否拧紧。接种环没有问题,将接种环及棒的金属部分烧好后,接种环放入三角瓶内冷却。5.4.3.7用接着环
15、再平板表面刮取菌种后接入三角瓶,接种环若遇到瓶口,平板外沿及其他可能染菌的地方,都应将接种环重新烧过。若无上述情况为安全起见,应每接三个三角瓶左右,将接种环重新烧过。5.4.3.8接种时,左手将倾斜一定的角度,右手握棉塞注意拿好,防止掉落或碰到台面,还要注意接种环、手与瓶口的距离,避免碰到瓶口。5.4.4三角瓶培养5.4.4.1将接种后的三角瓶放入恒温摇床,不要让其晃动,设定温度37转速190rpm/min进行培养,确保摇床温度、转速正确、准确。5.4.4.2不定时对摇瓶进行巡视,确保三角瓶在正常的温度、转速下培养。5.4.4.3三角瓶培养7小时左右,传入百级室准备倒钢瓶。6.异常情况处理规程
16、6.1染菌6.1.1平皿染菌,将平皿培养基刮入不锈钢锅内进行加热灭菌。6.1.2三角瓶染菌,将三角瓶放入高压锅内进行灭活处理,灭菌温度123时间30min。6.1.3钢瓶染菌,将钢瓶放入高压锅内进行灭活处理,钢瓶用5%的NaOH进行一次加热温度123时间30min灭菌。6.2紧急停电6.2.1如在操作过程中,突然停电,由当班人员立即把运转设备关闭,并迅速通知分厂值班人员及生产调度,来电后,未接到分厂通知,任何人不得开启任何带电的设备。 6.3紧急停蒸汽6.3.1如在操作过程中突然停蒸汽,由当人员立即关闭蒸汽总阀并记录好灭菌时间,并及时通知分厂及生产调度,待来蒸汽后,必须经过分厂的同意方可使用。
17、6.5紧急停水6.5.1如在操作过程中突然停水,由当班人员立即关闭正在水洗的器皿,并迅速通知分厂及生产调度,需要用的设备,严禁开启,以防烧坏机器。来水后,必须经过分厂通知后方可用水。7.菌种室岗位职责菌种岗位工序的主要岗位划分:主任、班长、操作7.1菌种室主任岗位职责7.1.1岗位任职资格:7.1.1.1劳动法、工会法等相关国家法律法规;7.1.1.2员工奖惩条理暂行规定、现场管理制度等公司和分厂相关管理规定和规章制度;7.1.1.3本工序安全生产作业指导书中的目的、原理、反应方程式、工艺流程图、安全因素、安全注意事项、岗位职责、工艺质量控制指标、及设备工作参数和性能;7.1.1.4安全生产工
18、艺操作规程;7.1.1.5具有较高水平的菌种培养经验,负责平皿的活化及上摇瓶。7.1.1.6会使用高压锅,熟知各种试剂的配制;7.1.1.7具有较强的保密意识。7.1.1.7.1保质、保量地完成菌种筛选任务;7.1.1.7.2搞好卫生区域和设备卫生;7.1.1.7.3积极参加培训,努力提高自身素质,适应丰原发展;7.1.1.7.4遵章守纪,服从分配;7.1.1.7.5严格执行保密规定。7.1.1.8履行职责标准:(1) 带领班组人员努力提高菌种质量,定期进行菌种的分离、筛选,保证为发酵提供优质高产的菌种;(2) 抓好现场管理工作,提高无菌意识;认真执行分厂各项管理制度,搞好安全文明生产;(3)
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 菌种 作业 规程 Microsoft Word 文档
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,个别因单元格分列造成显示页码不一将协商解决,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【天****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【天****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。