2016届高三生物第二轮复习课前诊断卷10.doc
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4、生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答:(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、_、将目的基因导入受体细胞、_。(2)A过程需要的酶有_和_。(3)要把重组质粒导入土壤农杆菌,首先必须用_处理土壤农杆菌,使土壤农杆菌转变为_态,然后将_在缓冲液中混合培养完成转化过程。(4)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后,将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过C_和E_。如要确保再生植株中含有抗虫基因,可在C过程的培养基中加入_。(5)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是_。这需要通过检测才能知道,检测采用的方法是_。2(2015福建高考)GDNF是
5、一种神经营养因子,对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如下图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是_。(2)构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的_限制酶进行酶切。(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有3种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式,选择Hpa酶和BamH酶对筛选得到的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如上图2所示。图
6、中第_泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的_与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时,需进行_培养以得到更多数量的细胞,用于神经干细胞移植治疗实验。3我们日常吃的大米中铁含量极低,科研人员通过基因工程等技术,培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻,改良了稻米的营养品质。下面为培育转基因水稻过程示意图,请回答:(1)在上述工程中,铁结合蛋白基因称为_,获取该基因后常用_技术进行扩增。(2)构建重组Ti质粒时,通常要用同种限制酶分别切割_和_。将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用_处理农杆菌,使重
7、组Ti质粒易于导入。(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时,通过培养基2的筛选培养,可以获得_;培养基3与培养基2的区别是_。(4)检测培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻_。4为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表达)。请回答:(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,_(填“需要”或“不需要”)启动子。(2)步骤中,用Ca2处理大肠杆菌,使之成为_细胞,然后
8、导入重组载体。实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这些细菌不含有_基因。(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。根据上述原理可以初步判断_(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与_形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。考点二克隆技术5马铃薯是种植广泛的农作物,病毒侵染后导致产量大幅下降,培育脱毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答:(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒,因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中,经过人工培养获得脱毒苗。培养基
9、中添加_(填激素名称),诱导离体细胞经过_和_完成组织培养过程,从而形成脱毒苗。为监控脱毒苗的质量,可采用_的方法检测病毒的蛋白质。(2)研究人员研究了茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响,实验结果如右图。实验结果表明,茎尖越小,_,因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为_mm。6科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄马铃薯杂种植株,为了便于杂种细胞的筛选和鉴定,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质,其培育过程如下图所示:(1)植物体细胞杂交依据的生物学原理有_。(2)过程常用的酶是_,细胞融合完成的标志是_。(3)植物原生质体融合过程常利用化学
10、试剂_诱导融合,在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察,根据细胞膜表面荧光的不同可观察到_种不同的原生质体,当观察到_时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。(4)过程和过程依次为_,过程中的培养基常添加的植物激素是_。(5)若番茄细胞内含m条染色体,马铃薯细胞中含n条染色体,则“番茄马铃薯”细胞在有丝分裂后期含_条染色体。若杂种细胞培育成的“番茄马铃薯”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于_植株。7右图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养),请据图回答下面的问题:(1)OA段的培养称为_培养,AB段可能发生了_现象,需
11、要用_酶处理,以使组织细胞分散开来。(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,动植物细胞都要进行_,不同的是植物细胞还要进行_。(3)为制备单克隆抗体,需将_注射到小鼠体内,以此获取_细胞,同时可选取图中_点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞,所选取细胞的细胞膜上的_比正常细胞显著减少。为筛选出能够产生单克隆抗体的杂交细胞,可用_培养基达到目的。8下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答相关问题:(1)图示方法是_技术的应用,该技术的基础是_技术。(2)操作所用的成纤
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