DD二聚体测定标准操作程序.doc
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1、文件编号制定日期文件版次正文页数附件份数第一版5D-二聚体测定作业指导书修订记录修订日期版次页次修订内容第一版全部发行章批准审核编制制定部门检验科文件持有部门:检验科临检室D-二聚体测定(分析仪器法)1 实验原理:免疫比浊法当混合标本中含有D-二聚体时,聚苯乙烯颗粒包被到单克隆抗体(DD5),与交联纤维蛋白降解产物(D-二聚体)的交联区域结合。交联区域呈立体结构,有两个单克隆抗体表位。总之,一个单克隆抗体就能触发凝集反应,随后检测浊度的增加。仪器在575nm处通过对浊度改变的监测,将吸光度转换成浓度值,由此获得样本中D-二聚体的量。2 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血
2、。2.2 3.8(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。3 标本存放1小时内(3000r/min15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,28保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70不超过6个月),只能冻融1次,在37迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。4 标本运输:低温条件下运输。5 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。6. 实验材料:6.1 德国Dade Behring Marburg 公司D-Dimer PLUS乳胶试剂, 用4mlD-二聚体PLUS复溶液溶解一瓶D二聚体PLUS试剂,室温(1525)放置约5
3、分钟,并不时混匀。将试剂放于仪器相应的试剂位置上。未开封试剂28贮存到说明书上有效期,复溶试剂28保存不超过2天,室温保存不超过5天。6.2 D-Dimer PLUS加速剂:用5ml蒸馏水溶解,室温(1525)放置约15分钟,并不时混匀。将试剂放于仪器相应的试剂位置上。使用前,轻轻振荡试剂。未开封试剂28贮存到说明书上有效期,复溶试剂28保存不超过5天。6.3 D-Dimer PLUS复溶液:液体。用于溶解D-二聚体PLUS 乳胶试剂。未开封试剂28贮存到说明书上有效期,开瓶后试剂28保存不超过12周。6.4 Dade D-二聚体质控血浆I/II.用蒸镏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分
4、装。复溶后,室温保存2小时,284小时。7. 仪器设备:7.1 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪7.2 仪器厂家:日本Sysmex公司7.3 仪器型号:Sysmex CA-15007.4 仪器技术参数:7.4.1 速度: 最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2 试剂位:36个,具冷藏功能。7.4.3 样本位:50个,可自动连续添加。7.5 仪器校准程序:7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂批号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)8. 操作步骤:8
5、.1 检查前准备:8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。8.1.2 添加足够反应杯(不能超过警告线)。8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。8.2 开机先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。8.3 输入工作清单:从主菜单选Work List出现第一架样本工作清单输入画面,选ID No Entry输入第一个样本号按相应实验项目名称键D-D,并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项(PT、APTT、Fbg、TT)”,可按Profile #1组合选项选择,选中项目相应位置标
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