不同干燥方式的九制何首乌对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用.pdf

药学与临床研究药学PharmaceuticalandClinical Research研究不同干燥方式的九制何首乌对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用任娟,姜誉弘,刘史佳，俞南京中医药大学附属医院江苏省中医院药学部，南京2 10 0 2 9凡，庞会明摘要目的：探究不同干燥方式的九制何首乌对D-半乳糖诱导衰老小鼠的影响。方法：将50 只ICR小鼠随机分成空白组、模型组、阳性对照组、九蒸九晒制首乌组、九蒸九烘制首乌组，每日腹腔注射D-半乳糖(0.5gkg)构建小鼠衰老模型,造模同时给药，持续12 周。应用Morris水迷宫实验方法测定小鼠的空间记忆和学习水平，计算各组小鼠胸腺、脾脏指数，检测小鼠血清及脑、肝、肾匀浆中超氧化物歧化酶(SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛(MDA)水平，检测小鼠肝肾功能水平。结果：与空白对照组相比，模型组空间记忆和学习能力明显降低，体质量、脏器指数明显下降，血清以及全脑、肝、肾匀浆中SOD、G SH-Px 水平明显下降，而MDA水平显著上升，血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、肌酐、尿素水平显著性上升；药物干预组与模型组相比，空间记忆和记忆水平明显改善，体质量、脏器系数显著增加，改善D-半乳糖诱导的氧化应激，提高SOD、G SH-Px 水平，抑制MDA含量的升高，肝肾功能趋于正常。两种干燥方式的给药组小鼠的指标相当，无明显差异。结论：不同干燥方法的九制何首乌的水煎液对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗衰老作用，且两种方法的抗衰老作用无显著差异。关键词九制何首乌；晒干；烘干；抗衰老；D-半乳糖中图分类号R943.1文献标志码A文章编号16 7 3-7 8 0 6(2 0 2 4)0 2-10 9-0 6中药何首乌来源于蓼科植物何首乌（PolygonumMultiflorumThunb.）的干燥块根。生品能够解毒消肿、润肠通便、截疟，制后具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨的功效。本草纲目记载，自宋朝嘉靖初，七宝美髯丹上进皇帝服用，世宗肃皇帝服用有效，连生黄嗣，何首乌应用开始广泛，其中何首乌的炮制为黑豆汁九蒸九晒2 。自宋朝开始至今，制何首乌常为补益身体、延年益寿之物，现代研究发现何首乌中含有卵磷脂、葱醌衍生物、二苯乙烯苷等多种成分，制后磷脂类成分和糖的含量增加，在抗衰老、抗肿瘤、保护神经等方面具有显著效果3-。关于何首乌炮制的本草记载有本草汇言“制非九次，勿寝其毒，非黑豆，勿杀其势”，本草正义“必以九蒸九晒方能味厚人阴、填塞善守”，“九蒸九晒”又称“九蒸九曝”是将蒸晒结合并反复运用，使何首乌最大限度发挥疗效并减轻其毒副作用7-9。九*基金项目国家中医临床研究基地（江苏省中医院)开放课题项目(D2019SZ14);江苏省中医药科技发展专项(2 0 2 0 ZX11)作者简介任娟，女，副主任中药师E-mail:*通信作者庞会明，女，主任中药师E-mail:收稿日期2023-10-13修回日期2 0 2 4-0 2-0 6蒸九晒法常受限于气候、温度、湿度等自然条件的影响，出现制药周期长、药材因未及时晒干而发霉变质等问题；药典中只是规定何首乌清蒸、黑豆汁拌匀后蒸或炖，切片干燥，没有涉及炮制的次数，九蒸九晒法逐渐被弃用。本实验炮制九制何首乌时，将干燥方式从传统的“晒干”改为“烘干”，即“九蒸九晒”改为“九蒸九烘”，通过比较两种干燥方式得到的九制何首乌对D-半乳糖衰老模型小鼠抗衰老作用的差异，来探讨用“九蒸九烘”的可行性，为后续九制何首乌大规模生产和分析鉴定提供理论基础。衰老的重要决定因素是活性氧自由基过量直接引起氧化应激和促炎反应，导致蛋白质氧化、脂质过氧化以及线粒体和DNA损伤；同时，活性氧自由基会直接或间接损害内源性抗氧化系统，如超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px),并且最终分解产物如丙二醛（malondialdehyde，M D A）可以直接或间接地与蛋白质、核酸、磷脂或其他物质结合，不仅破坏细胞内物质结构和细胞功能，也会损害正常组织细胞的渗透压，进而导致重要器官1092024Apr;32(2)不同干燥方式的九制何首乌对D一半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用的代谢紊乱并最终导致机体衰老。D-半乳糖致衰老模型具有与自然衰老相似的特征，是当前最常用的衰老模型-1。维生素E能对抗自由基的过氧化作用，可以抗衰老，作为保健品和药品已经得到广泛应用，本实验选用维生素E作为阳性对照，观察九制何首乌的抗衰老作用15,16 。1仪器与材料1.1实验仪器M200ProNanoQuant型全波长微孔板检测仪(瑞士帝肯公司）;58 0 4R型多功能冷冻离心机（德国艾本德股份公司）;F6/10型手持组织匀浆机（上海弗鲁克科技发展有限公司）;FA1004型天平（青岛聚创世纪环保有限公司）;HCPF-9162型干燥/培养两用箱（上海跃进医疗器械有限公司）；SW22型水浴锅（北京优莱博技术有限公司）。1.2药物与试剂何首乌由贵州同德药业股份有限公司提供，经江苏省中医院主任中药师姚毅鉴定为蓼科植物何首乌的干燥根。D-半乳糖（批号WXBD1291V，西格玛，浙江联硕创先生物科技有限公司）、维生素E（批号2 10 42 4，浙江医药有限公司）、MDA检测试剂盒（批号0 8 0 52 12 2 0 2 14）、总S0D活性检测试剂盒（碧云天生物技术有限公司，批号11152 12 2 0 513）、总GSH-Px检测试剂盒（批号0 7 2 2 2 12 2 0 2 2 8）、BCA蛋白浓度测定试剂盒（批号0 92 2 2 12 2 0 30 7），均购自碧云天生物技术有限公司。1.3实验动物选取SPF级ICR雄性小鼠50 只，6 周龄，体重1820g，由斯贝福生物技术有限公司提供，许可证号SCXK（京）2 0 19-0 0 10，自由饮水饮食。2实验方法2.1何首乌的炮制品水煎液制备取黑豆1kg,加水适量,置锅内煮约4h,熬汁约1.5kg，豆渣再加水煮约3h，熬汁约1kg，合并得黑豆汁约2.5kg，备用。九蒸九晒法制备：取10 kg首乌块，用黑豆汁拌匀，放置蒸锅中蒸透无白心，不少于24h，阳光下自然干燥。晒干后的药物用蒸锅中原液拌匀，继续蒸2 4h，阳光下自然干燥，同上操作，共9次。九蒸九烘法制备：首乌块同法蒸透后，烘房50 干燥8 10 h，干燥后药物用蒸锅中原液拌匀，继续蒸2 4h，烘房50 干燥8 10 h，同上操作，共9次。取10 0 g的制首乌分别加5倍量的水煎煮两次，合并煎液浓缩至2 50 mL水煎液7。1102.2造模和给药将50 只小鼠适应性饲养1周，随机分为空白组、模型组、维生素E组、九蒸九晒组、九蒸九烘组，每组10 只。用生理盐水将D-半乳糖配成50 mg?mL溶液，模型组和药物组每天腹腔注射D-半乳糖0.5gkg，空白组注射等量生理盐水,连续12 周。每日注射结束后给药，用大豆油将维生素E配制成2 0 mgmL-1溶液,阳性对照组灌胃维生素E(0.1gkg);九蒸九晒制首乌组、九蒸九烘制首乌组灌胃相应的水煎液，给药剂量2 gkg。空白组和模型组灌胃等量的生理盐水，连续12 周。行为学实验从第12 周开始进行8。2.3Morris水迷宫实验2.3.1定位航行实验在第四象限水下2 cm处放人圆形平台，将小鼠于每个象限规定的人水点面向池壁放人水中,9 0 s内,到达平台的小鼠放其回饲养笼，未到达平台的小鼠，人为将其放置在平台上记忆30 s。小鼠找到平台的时间为逃避潜伏期。实验于第12 周第2 天开始，周期为4d，记录各小鼠的逃避潜伏期。2.3.2空间探索实验第6 天撤走平台，将小鼠面向池壁，从平台对面象限同一地点轻轻放人水中，90s内，记录各小鼠在第四象限的停留时间。记录平台位置区域穿过的次数192.4检测指标每周末给小鼠称重，最后1天给药后禁食，次日乙醚麻醉后摘眼球取血,低温分离血清,测定血清中SOD、G SH-Px、M D A 水平，及天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT)、碱性磷酸酶（al-kaline phosphatase,ALP)、肌酐(creatinine,CREA)、尿酸(uric acid,UA)值。低温下摘取全脑、肝、肾,并以1:9 比例加入预冷的生理盐水中，用匀浆机反复匀浆制成10%组织匀浆,4下以12 0 0 0 rmin=离心10 min,取上清液，按照试剂盒说明书检测SOD、GSH-Px、M D A 含量18 2.5统计学方法采用GraphPad Prism进行分析，数据以(xs)表示，多组间比较采用单因素方差分析、FishersLSD检验，两组间比较采用t检验,P0.05表示有统计学意义。3结 果3.1各组小鼠体质量的变化实验持续12 周的过程中，由于操作上的失误和药学与临床研究药学Pharmaceuticaland Clinical Research研究小鼠互相撕咬受伤，导致最后每组小鼠数量减少，空白对照组、模型组、维生素E组、何首乌九蒸九烘组、何首乌九蒸九晒组的小鼠数量分别为7、6、8、8、9只。由表1和图1可知，从第2 周开始，与空白组比较，模型组小鼠体质量增速缓慢；与模型组比较，组别第0 周第1周第2 周第3周第4周 第5周 第6 周第7 周第：周第9 周第10 周第11周第12 周26.8130.96 34.9436.44 37.6839.2440.4540.62 41.33 42.7442.8243.0244.99 空白组72.0726.8530.71 30.85 32.4833.43 34.68 35.0236.02 35.3236.5537.17 37.17 38.83模型组61.1627.04 30.9533.61 35.15 36.63 38.0639.14 39.79 40.5341.8942.43 43.36 44.83 维生素E组827.2131.7534.4436.61 37.8339.5940.41 41.5940.41 41.6942.70 42.70 44.40 九蒸九烘组827.0931.8634.1035.9236.8238.5339.3340.0440.5141.2642.0342.0343.81 九蒸九晒组9注：与空白组比较，P0.01；与模型组比较，P0.05，*P 0.0 1。50模型组45维生素E组一九蒸九烘组40(3）353025200图1小鼠体质量变化（n依次为7,6,8,8,9）注：与空白组比较,耕p0.01;与模型组比较,P0.05,*P0.01。3.2行为学实验结果由表2 和图2 可知，在定位航行实验中，与空白组比较，每天模型组小鼠的定位航行潜伏期均显维生素E组和给药组小鼠增长速度显著提高，九蒸九晒与九蒸九烘组小鼠体质量变化幅度相当。随着时间的增加，各组与模型组小鼠体质量差异呈增大趋势，模型组小鼠逐渐表现出皮肤松弛、行动迟缓、活动减少等衰老特征。表1小鼠体质量变化g（x s)】1.631.962.332.43#2.181.750.990.680.831.24.*#开241.842.54#1.10*1.11*2.09*2.56*1.031.25*空白组九蒸九晒组*#682.172.33#1.45*2.79*1.311012/W2.192.82#1.622.933.21*1.71*1.71*组别n第2 天空白组722.18 4.95模型组6 53.1310.86#35.8210.79#25.6911.69#20.08 9.03#维生素E组8 31.8 8 6.0 6*2 1.0 98.50*14.50 4.11*9.8 8 3.6 4九蒸九烘组8 34.8 48.53*19.7 2 3.6 8*14.8 13.51*10.8 8 2.94*九蒸九晒组934.6 7 7.13*2 3.0 6 6.10*17.56 5.0 411.36 3.33注：与空白组比较，P0.05，P 0.0 1；与模型组比较，P0.05，*P0.01。807#60（）402.512.35#1.65*2.353.031.63*3.40*1.57表2水迷宫定位航行逃避潜伏期（s,x土s）第3天17.79 3.6613.07 2.52口空白组口模型组维生素E组九蒸九烘组#九蒸九晒组#4.013.19#2.35*3.03*2.06*2.613.32#2.30*3.13*2.12*2.603.19#2.25*3.081.76*第4天9.61 2.702.653.203.13#2.51*2.36*3.08*3.60*1.76*1.78*第5天3.05著性增加(P0.05)。与模型组比较,每天维生素E组和给药组小鼠的定位航行潜伏期均显著缩短(P0.05）。九蒸九晒与九蒸九烘组小鼠的每天定位航行潜伏期无显著性差异。由表3和图3可知,在空间探索实验中,与空白组比较，模型组小鼠在目标象限的滞留时间显著减少,穿梭平台区域的次数也显著减少(P0.05)。与模型组比较，维生素E组和给药组小鼠在目标象限的滞留时间显著增加,穿梭平台区域的次数也显著增多(P0.05)。九蒸九晒与九蒸九烘组小鼠在目标象限的滞留时间和平台区域穿梭次数均无显著性差异。3.3各组小鼠脏器指数变化胸腺和脾脏是重要的免疫器官,其脏器指数可在一定程度上反映小鼠的免疫功能。与空白组比较,模型组小鼠的胸腺、脾脏指数均显著下降(P200图2 水迷宫定位航行实验(n依次为7,6,8,8,9)注：与空白组比较，#P0.05,耕P0.01；与模型组比较，*P0.05,*P0.01。表3水迷宫空间探索实验（xs）目标象限停留时间平台区域穿梭次数组别n空白组7模型组6维生素E组8九蒸九烘组8九蒸九晒组9注：与空白组比较，P0.01;与模型组比较，P0.05，P 0.0 1。0.05)。与模型组比较,维生素E组和给药组小鼠的胸腺、脾脏指数均显著上升(P0.05)。九蒸九晒与111第2 天30.55 6.8816.49 2.47#23.43 2.78*22.55 3.42*20.70 2.37*第3天(s）第4天3.58 1.291.22 0.34#2.250.92*2.020.62*2.03 0.72*第5天（次）2024Apr;32(2)不同干燥方式的九制何首乌对D一半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用40-3020100图3水迷宫空间探索实验（n依次为7,6,8,8,9)(A）目标象限停留时间；(B)平台区域穿梭次数注：与空白组比较,p0.01;与模型组比较，P0.05,*P0.01。九蒸九烘组小鼠的胸腺、脾脏指数相当，无显著性差异。见表4和图4。表4脏器指数的比较（xs）组别n空白组7模型组6维生素E组8九蒸九烘组8九蒸九晒组9注：与空白组比较，P0.01；与模型组比较，P0.01。3.4各组小鼠SOD、G SH-PX、M D A 水平与空白组比较,模型组小鼠血清及脑、肝、肾组织105000(r-Tu.nu)Xd-HSO8(r-Tu.n)aos6-4-20A(）420九胸腺指数(%)0.13 0.030.05 0.01#0.10 0.02*0.07 0.01*0.08 0.016B九九脾脏指数（%）0.41 0.030.27 0.02#0.40 0.05*0.36 0.06*0.37 0.05*A40003000-2000100000.50.40.30.20.10图4脏器指数的比较(n依次为7,6,8,8,9注：与空白组比较，P0.01；与模型组比较，P0.05，P 0.0 1。匀浆液中的SOD、G SH-Px 水平显著性下降，MDA水平显著性上升(P0.05)。与模型组比较,维生素E组与各给药组小鼠血清及各脏器匀浆液中SOD、G SH-Px水平显著上升,MDA水平显著下降(P0.05)。九蒸九晒与九蒸九烘组小鼠血清中SOD、G SH-Px、M D A 水平相当，无显著性差异。见表5 6 和图5 6。表5血清中SOD、G SH-Px、M D A 水平（xs）SOD组别n(UmL-)空白组77.83 1.26模型组64.92 0.33#维生素E组87.03 1.27*九蒸九烘组86.95 1.14*3 619.08 579.62*九蒸九晒组96.55 1.01*3517.86 542.86*注：与空白组比较，P0.01；与模型组比较，P0.05，*P 0.0 1。B(i-Tu.oum)vaN拼口空白组口模型组口维生素E组九蒸九烘组九蒸九晒组#胸腺100780-604020-0脾脏GSH-Px(mUmL-l)3811.02 456.732.394.12 169.81#3489.95 541.76*MDA(mol mL-)28.49 18.5274.25 9.97#33.49 18.68*44.15 23.41*43.78 24.62*C模型组维生素E组九蒸九烘组图5血清中(A)SOD、(B)G SH-Px、(C)M D A 水平(n依次为7,6,8,8,9)注：与空白组比较,耕P0.01;与模型组比较，P0.05,*P0.01。表6 脑、肝、肾中SOD、G SH-PX、M D A 水平（xs）SOD(Umgprot-)组别n空白组72.540.68模型组60.91 0.12#维生素E组882.10 0.41*九蒸九烘组8 1.7 30.35九蒸九晒组9 1.9 10.6 5注：与空白组比较，P0.01；与模型组比较，P0.05，*P 0.0 1。3.5各组小鼠肝肾功能部分生化指标的影响与空白组比较，模型组小鼠ALT、A LP、A ST、112维生素E组九蒸九烘组九蒸九晒组CSH-Px(mUmgprot-l)MDA(molmgprot)脑肝13.97 2.134.65 1.267.58 1.07#1.640.20#16.102.52#12.81 2.743.38 1.44*39.1911.68126.4835.46*40.61 8.10*3.28 0.68*0.200.06*0.28 0.15*11.82 1.373.11 1.24*30.53 6.57*108.92 21.27*32.63 6.50*3.60 0.86*0.28 0.11*0.44 0.16*11.522.27*3.050.38*27.314.38*114.1431.48*30.29 3.75*3.58 0.93*0.28 0.07*0.40 0.15*CREA、U A 水平显著性上升(P0.05);与模型组比较，维生素E组与给药组小鼠ALT、A LP、A ST、肾62.1920.18脑149.0918.5565.92 7.43#肝62.62 22.6419.65 1.63#6.13 0.91#0.38 0.07#0.76 0.08#肾42.831.17脑0.19 0.050.28 0.14肝肾药学与临床研究药学PharmaceuticalandClinical Research研究口空白组口模型组口维生素E组九蒸九烘组九蒸九晒组20-A(iao.dau.n)aos(aodau.nu)Xd-HSO15-102007150100B(raodau.our)vaw8764C50脑CREA、U A 水平显著下降(P0.05)。九蒸九晒与九蒸组别n空白对照组7模型组6阳性对照组8九蒸九烘组8九蒸九晒组9注：与空白组比较，P0.01；与模型组比较，P0.01。4讨论目前的结果显示，与正常组相比，模型组重复注射D-半乳糖可明显影响小鼠的空间记忆和学习能力，而且显著降低这些关键的抗氧化酶(SOD、GSH-Px）水平，并显著加重脂质过氧化，表现为MDA的积累,尤其是在肝脏和肾脏等代谢快的器官中,表明小鼠肝脏和肾脏发生了氧化损伤。同时,与正常组相比,模型组小鼠伴随着肝脏和肾脏组织的氧化损伤，血清ALT、A ST 和ALP,CREA和UA显著高于正常组小鼠。以上结果均表明本研究成功建立了D-半乳糖诱导的小鼠衰老模型。结果还显示，与模型组比较，阳性对照维生素E组和九制何首乌组小鼠的体质量明显优于模型组，空间记忆和学习能力显著改善，胸腺和脾脏的脏器指数升高,免疫功能得到改善；血清和脑、肝、肾组织抗氧化指标SOD和GSH-Px升高，MDA下降，机体氧化损伤得到改善，肝肾功能也进一步改善。本实验中九制何首乌表现出与维生素E具有相似的抗衰老作用，但是两种干燥方式的九制何首乌组小鼠的各指标没有显著差异。我国进人人口老龄化社会以来，老龄化带来的社会负担和经济负担越来越受到人们的关注，延缓衰老从而提高老年人生活质量具有重要的科学意义和社会价值。中医药是中华民族的伟大瑰宝，在延缓衰老上，中医药有其独特的优势，上述实验结50#0肝肾图6 脑、肝、肾中(A)SOD、(B)G SH-Px 及(C)MDA水平(n依次为7,6,8,8,9)注：与空白组比较,P0.01;与模型组比较,P0.05，*P 0.0 1。表7 肝、肾功能的比较（xs）ALT(UL-I)ALP(UL-)32.006.9835.57 8.6661.83 16.09#64.67 8.66#37.13 6.83*41.88 8.04*42.38 7.61*45.00 10.85*45.78 8.05*46.44 7.38*2#0脑肝九烘组小鼠各指标水平相当，无显著性差异。见表7。AST(UL-)CREA(molL-)75.43 10.288.40 1.31131.17 16.77#14.88 3.58#95.25 16.0910.45 2.02*101.88 16.58*10.86 2.24*104.00 16.57*11.08 2.19*果也表明九制何首乌能明显改善衰老模型小鼠的氧化损伤，同时体质量、免疫功能、肝肾功能都得到一定程度的改善。综上所述，两种干燥方式炮制的九制何首乌都具有抗衰老作用，且体内抗衰作用无显著性差异，后续可结合临床应用进行更全面的分析，使九制何首乌在抗衰老上得到更好的应用，传统炮制方法得到传承和发展。参考文献1 国家药典委员会.中华人民共和国药典：2 0 2 0 年版一部S。北京：中国医药科技出版社，2 0 2 0:18 3.2 李时珍。本草纲目新校注本M.刘衡如，刘山勇，校注。北京：华夏出版社，2 0 0 8：43，8 7 7-8 0.3 任红微，魏静，高秀梅，等何首乌及其主要化学成分药理作用及机制研究进展J.药物评价研究，2 0 18,41(7):1357-62.4徐东川，杨宗统，苏敏。何首乌的现代药理作用及机制研究进展。西安文理学院学报，2 0 2 2，2 5(2)：7 9-8 3.5王亭，龚千锋何首乌炮制后化学成分及药理作用的研究进展 中国实验方剂学杂志，2 0 17,2 3(2):：2 2 0-6.6王浩，杨健，周良云，等。何首乌化学成分与药理作用研究进展J中国实验方剂学杂志，2 0 19，2 5(13):192-205.7倪朱谟。本草汇言M郑金生，雪燕，杨梅香，点校.北京：中医古籍出版社，2 0 0 5：2 6 0-2.8 张山累本草正义M.太原：山西科学技术出版社，2013.113#肾脑肝UA(molL-)99.57 20.12165.50 17.78#109.88 16.15*136.00 11.86*130.44 17.52*肾2024Apr;32(2)不同干燥方式的九制何首乌对D一半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用9】高涵，刘史佳，庞会明，等。基于靶标循环放大策略的双色荧光传感体系探索何首“九蒸九晒”炮制过程中不同蒸制次数对肾细胞的减毒作用J中草药，2 0 2 2,53(8):2383-9.10】姜誉弘，姚毅，刘史佳，等.基于HPLC指纹图谱结合多元统计分析不同炮制方式对九制女贞子化学成分的影响 药学与临床研究，2 0 2 2，30(4)：2 8 9-93.11 金宙，姜凡，郑钰凡，等细胞衰老机制及药物干预作用研究进展J中国老年学杂志，2 0 2 2，42(19)：4851-6.12 洪晶，张娅俐，闫莎莎，等.D-半乳糖诱导衰老小鼠模型研究进展J中国比较医学杂志，2 0 2 3，33(3):136-42.13 KONG SZ,LI JC,LI SD,et al.Anti-aging effect ofChitosan oligosaccharide on D-galactose-induced sub-acute aging in mice.Marine Drugs,2018,16(6):181-94.14 AZMAN KF,ZAKARIA R.D-Galactose-induced ac-celerated aging model:an overview J.Biogerontology,2019,20(6):76382.15刘湘，敖凯，高艺苇，等。维生素E对围绝经期和绝经后妇女健康的影响.国际妇产科学杂志，2 0 2 4,51(1):93-8.16】李莹，吴云凤维生素E临床应用研究进展 江苏卫生保健，2 0 2 3，2 5(5)：30 6-9.17 姜誉弘，刘史佳，任娟，等.九蒸九晒和九蒸九烘干燥工艺对何首乌化学成分的影响J中国药业，2 0 2 3,32(17):39-44.18 赵芷含，庞博，高慧。五味子及其不同炮制品对D-半乳糖诱导衰老小鼠的影响 中成药，2 0 2 1，43(3):769-73.19 曾凡，薛傲，伊金月，等.金肾气丸改善D-半乳糖诱导衰老大鼠学习记忆能力的代谢组学研究药物分析杂志，2 0 2 0,40(12)：2 149-56.Anti-Aging Effects of Nine-Time Processed Polygonum Multiflorum Thunbwith Different Drying Methods on D-Galactose-Induced Aging Mice*REN Juan,JIANG Yuhong,LIU Shijia,YU Fan,PANG HuimingDepartment of Pharmacy,Affliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine&Jiangsu ProvinceHospital of Chinese Medicine,Nanjing 210029,ChinaABSTRACT Objective:To explore the effects of nine-time processed Polygonum Multiflorum Thunb withdifferent drying methods on D-galactose-induced aging mice.Methods:Fifty ICR mice were randomly di-vided into blank control group,model group,positive control group,nine-time repeated steaming and sun-drying group,and nine-time repeated steaming and stove-drying group.Aging model was establishedthrough intraperitoneal injection of D-galactose(0.5 gkg)every day.Mice in each group were intragastri-cally administered with drugs respectively for 12 weeks.For mice in each group,Morris water maze exper-iments were used to test their spatial memory and learning ability;the indexes of thymus and spleen werecalculated;the levels of superoxide dismutase(SOD),glutathione peroxidase(GSH-Px)and malondialdehyde(MDA)in serum and homogenates of whole brain,liver and kidney were determined;liver and kidneyfunctions were detected.Results:Compared with the normal control group,the model group showed signifi-cant decrease in spatial memory,learning ability,body mass and organ index;the levels of SOD andGSH-Px in serum and homogenates of whole brain,liver and kidney decreased significantly,while theMDA levels increased significantly;the serum levels of ALT,ALP,AST,CREA and UA increased marked-ly.Compared with the model group,the drug intervention groups significantly improved spatial memory andlearning ability,significantly increased body mass and organ index,improved oxidative stress induced byD-galactose,increased SOD and GSH-Px levels,inhibited the increase of MDA contents,and normalizedliver and kidney functions.The indexes of mice between the groups of two drying methods were similarwith no significant difference.Conclusion:The water decoction of nine-time processed Polygonum Multiflo-rum Thunb with different drying methods has anti-aging effects on D-galactose-induced aging mice,andthere is no significant difference in anti-aging effects between the two drying methods.KEY WORDS Nine-time processed Polygonum Multiflorum Thunb;Sun-drying;Stove-drying;Anti-aging;D-galactose114