灯盏花胶囊对高脂联合STZ诱导2型糖尿病肾病小鼠的治疗作用研究.pdf
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1、云南民族大学学报(自然科学版),():收稿日期:基金项目:云南省科学技术厅 云南中医药大学应用基础研究联合专项()作者简介:刘青云(),男,硕士研究生 主要从事临床药学研究通信作者:杜义斌(),男,主任医师,硕士生导师 主要从事老年肾脏病防治研究灯盏花胶囊对高脂联合 诱导 型糖尿病肾病小鼠的治疗作用研究刘青云,杜欣烨,曲杨,段艳蕊,杜义斌,(云南中医药大学 中药学院,云南 昆明 ;云南中医药大学 第一附属医院,云南 昆明 ;昆明理工大学 生命科学院,云南 昆明 ;云南大学附属医院,云南 昆明 )摘要:探讨灯盏花胶囊对糖尿病肾病()模型小鼠的疗效 随机抽取雄性 小鼠 只为正常对照,剩余 只饲喂高
2、糖高脂饲料 周后,采用腹腔注射链脲佐菌素复制 模型;将 只成模小鼠随机分为模型对照、阳性苯那普利()以及灯盏花胶囊低()、中()、高剂量组(),每组 只;各组动物连续给药 周,正常和模型组灌胃等容积纯水 检测各组小鼠空腹血糖()、尿蛋白及血清中甘油三酯()、总胆固醇()、低密度脂蛋白()、白蛋白()、肌酐()、尿素氮()和胰岛素()水平;染色观察各组小鼠肾脏组织病理学变化 结果显示模型组小鼠给药期间血糖及尿蛋白水平缓慢升高,末期肾功能受到损害,血肌酐及尿素氮明显上升,病理检查发现肾小球明显肥大,系膜区扩张,基膜增厚;各组给药 周后,小鼠 、尿蛋白及血清中 、水平和肝肾指数较模型组明显降低(),
3、明显提升(),肾组织病变较模型组有所减轻 本研究表明灯盏花胶囊可以明显改善高糖高脂饮食联合链脲佐菌素诱发的 型糖尿病肾病小鼠的肾脏损害,一定程度保护肾功能,延缓肾功能减退关键词:灯盏花胶囊;糖尿病肾病;高糖高脂;链脲佐菌素;尿蛋白中图分类号:文献标志码:文章编号:()糖尿病肾病(,)是糖尿病重要的微血管并发症之一,其主要特征是出现尿蛋白逐渐的增加和肾功能逐渐降低,最终导致肾功能衰竭形成终末期肾病(,),因此糖尿病肾病是评估糖尿病患者的预后的重要因素 近年来,全球 发病率迅速上升,已成为糖尿病致死的主要原因,是全世界所面临的日益严重的健康问题及公共卫生问题 尽管控制血糖、血压以及肾素 血管紧张素
4、 醛固酮系统仍是目前西医治疗 的常规方法,但相关药物作用单一,仅能延缓 向终末期肾病发展,并不能阻止甚至逆转其进程,更无法有效预防 的发生 ,且长期服用还潜在一定的安全性风险 因此,临床仍迫切需要寻求更好的治疗措施,以阻止糖尿病向 发展,延缓 进程,改善预后,降低死亡率 越来越多的证据表明,中医药由于强调整体观和辨证论治,且多途径、多靶点等特点,在治疗 方面具有独特的优势灯盏花胶囊是根据云南名医李琦教授治疗慢性肾脏疾病经验方制成的院内制剂,临床实践表明其对慢性肾功能衰竭患者具有较好治疗效果,总有效率为 ,其作用与尿毒清相当 本研究采用高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素诱发小鼠 型 模型,探究灯
5、盏花胶囊对其的保护作用,为深入研究及临床运用提供实验依据 材料雄性 小鼠 只,体重 ,来源于斯贝福(北京)生物技术有限公司,许可证 (京)高糖高脂饲料购自于鼠一鼠二生物科技有限公司,普通饲料来源于苏州双狮实验动物饲料科技有限公司 胆固醇(酶比色法)、甘油三酯(比色法)、高密度脂蛋白(酶比色法)、低密度脂蛋白(直接法)、尿素氮(比色法)、肌酐(酶法)、(双缩脲法)及空腹胰岛素检测试剂盒(比色法)等,均由罗氏公司提供 血糖试纸条,艾康生物技术(杭州)有限公司生产 尿蛋白检测试剂盒购自南京建成生物试剂有限公司 灯盏花胶囊,粒,每日 次,每次 粒,由云南省中医医院监制,江阴天江药业有限公司生产 方法
6、造模及分组照文献 并稍作改良 只雄性 小鼠适应性饲养 周,随机抽取 只作正常对照,饲喂普通饲料;其余饲喂高糖高脂饲料,自由摄食和饮水 周后,造模小鼠以 剂量腹腔注射 (临用前以 柠檬酸 柠檬酸钠缓冲液配制成 的溶液),后测定空腹血糖,对 者同剂量重复注射 末次注射后,测定所有小鼠空腹血糖,以 、体重 者为 型糖尿病成模标准,并继续喂饲高糖高脂饲料 将 只成模(成模率 )小鼠随机分为模型对照、阳性对照苯那普利()及灯盏花胶囊低()、中()、高()剂量组,每组 只 给药及检测收集各组动物给药前 尿液测定尿蛋白()分别于每日上午按剂量灌胃给药 次,正常对照和模型组给予同容积溶媒(纯水),连续 周 给
7、药期间每日观察动物一般状况,每周 次测定空腹血糖及体重,每 周用代谢笼收集 尿液测定尿蛋白 末次给药后,禁食不禁水 ,取血、取材测定各指标 一般状况观察给药期间,每日观察各组小鼠的尿量、饮水量、进食量、被毛及精神状态,每周称取体重 次 指标检测末次给药 周后,禁食不禁水 ,称取体重,用试纸测定 后,内眦取血,离心 ,分离血清检测甘油三酯()、总胆固醇()、低密度脂蛋白()、白蛋白()、肌酐()、尿素氮()、空腹胰岛素()取血后脱颈椎处死小鼠,摘取肝、肾称重,计算脏器系数,并取左肾于 福尔马林溶液中固定,常规脱水、浸蜡、包埋,制备组织切片,脱蜡,苏木精 伊红()染色,光镜下观察肾脏组织形态 结果
8、 对一般状况的影响与正常动物相比,模型组小鼠出现多食、多饮、多尿及明显的活动减退和虚弱现象,并随给药时间而逐渐加重;与模型组相比,各给药组小鼠多食、多饮、多尿及虚弱现象得以明显改善 由表 可知,给药前各模型组体重大致均衡,均明显高于正常对照组();给药期间,正常组体重增长缓慢,模型组体重则缓慢下降,各给药组体重均有不同程度增长,其中阳性对照及灯盏花胶囊中、高剂量组自第 周起及低剂量组第 周时的体重均明显高于模型对照组()表 对体重的影响(,)时间正常模型阳性低剂量中剂量高剂量给药前 周 周 周 周 周 周 注:与正常组相比,;与模型组相比,云南民族大学学报(自然科学版)第 卷 对血糖的影响由表
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