动物细胞工程复习.ppt
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1、动物细胞工程专题复习动物细胞工程专题复习1动物细胞培养动物细胞培养2动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液10代代细胞细胞部分细胞部分细胞“癌变癌变”,遗传物质改变,无遗传物质改变,无限传代限传代动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成动物体最终培养成动物体50代细胞代细胞原原代代培培养养传代培养传代培养细细胞胞贴贴壁壁剥离、分瓶剥离、分瓶细胞株细胞株细胞细胞细胞系细胞系1 1、过程:、过程:3细胞细胞悬浮悬浮液液1010代代细胞细胞5050代代细胞细胞无限传无限传代代原代培养原代培养传
2、代培养传代培养细胞株细胞株细胞系细胞系如何界定原代培养和传代培养;细胞株和如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系?细胞系?多数组织细胞固定在表面多数组织细胞固定在表面生长和分裂。生长和分裂。随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变遗传物质改变4几个有关概念:几个有关概念:原代培养:原代培养:从机体取出后立即培养的细胞从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的为原代细胞。培养的第第1 1代代细胞与细胞与传传1010代代以内以内的细胞称为原代细胞培养。的细胞称为原代细胞培养。传代培养:传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞
3、悬浮液,分装到两个或两个以配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。5细胞株:细胞株:原代细胞一般传至原代细胞一般传至1010代左右细胞生长代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40504050代,这种传代细胞为细胞株。代,这种传代细胞为细胞株。细胞系:细胞系:细胞株传代至细胞株传代至5050代后又出现细胞生长代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代使其在培养条件下可以无限制
4、传代,这种传代细胞为细胞系。细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别:细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。易传代培养。61 1、无菌、无毒:、无菌、无毒:2 2、全部的营养物质:、全部的营养物质:3 3、适宜的温度和、适宜的温度和PHPH值:值:4 4、必要的气体条件:、必要的气体条件:(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)保证细胞顺利的保证细胞顺利的生长增殖生
5、长增殖36.5+36.5+(-)0.50.5度度,7.2-7.4,7.2-7.4O O2 2和和COCO2 2(95%95%空气和空气和5%CO5%CO2 2)2 2、条件:、条件:维持培养液的维持培养液的PH7 3 3、应用:、应用:大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体)干扰素、单克隆抗体)作为基因工程中的受体细胞作为基因工程中的受体细胞培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性判断某种物质的毒性用于生理、病理、药理等方面的研究,用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据为治
6、疗和预防疾病提供理论依据8细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植株植株培养结果培养结果获得细胞获得细胞或或细胞产物细胞产物快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动物葡萄糖、动物血清血清蔗糖、植物激蔗糖、植物激素素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较91.1.动物细胞工程技术的基础是(动物细胞工程技术的基础是()A A、动物细胞融合、动物细胞
7、融合 B B、胚胎移植、胚胎移植 C C、动物细胞培养、动物细胞培养 D D、核移植、核移植2.2.下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是(下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是()A A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中D D、培养至、培养至5050代后的传代细胞称为细胞株代后的传代细胞称为细胞株C CB B 103.3.下列关于动物细胞培养的叙述中,错误的是(
8、下列关于动物细胞培养的叙述中,错误的是()A A、用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组、用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组织织B B、将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单、将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞个细胞C C、在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离,、在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离,制成悬浮液制成悬浮液D D、动物细胞培养只能传、动物细胞培养只能传5050代左右,所培养的细胞会衰代左右,所培养的细胞会衰老死亡老死亡D D 114.4.下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答:下图是动物细胞培养的基本过程示意图
9、。请据此回答:(1 1)容器)容器A A中放置的是动物器官或组织。它一般取自中放置的是动物器官或组织。它一般取自 _。(2 2)容器)容器A A中的动物器官或组织首先要进行的处理是中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ,然后用,然后用 酶处理,这是为了使细胞酶处理,这是为了使细胞分散开来,这样做的目的是分散开来,这样做的目的是 (3 3)培养首先在)培养首先在B B瓶中进行,瓶中的培养基成分有瓶中进行,瓶中的培养基成分有 _等。等。幼龄动物或胚胎的组织或器官幼龄动物或胚胎的组织或器官剪碎组织剪碎组织 胰蛋白胰蛋白 使细胞与培养液充分接触使细胞与培养液充分接触 葡萄糖、氨基酸、水、无机盐、促生长
10、因子葡萄糖、氨基酸、水、无机盐、促生长因子与微量元素和动物血清与微量元素和动物血清 12在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到第养到第 代,到这时的培养称为代,到这时的培养称为_。为了把为了把B B瓶中的细胞分装到瓶中的细胞分装到C C瓶中,用瓶中,用 处理处理然后配置成然后配置成 ,再分装。,再分装。在在C C瓶中正常培养了一段时间后,发现细胞全部死亡,瓶中正常培养了一段时间后,发现细胞全部死亡,原因是原因是 10 10 原代培养原代培养 胰蛋白酶胰蛋白酶 细胞悬液细胞悬液 细胞没有发生癌变细胞没有发生癌变 13核移植技术和克
11、隆动物核移植技术和克隆动物14 1.1.概念:概念:将动物的一个细胞的细胞核,移将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的入一个已经去掉细胞核的卵母细胞卵母细胞中,使其中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。最终发育成动物个体。核移植核移植(难度高)(难度高)受体细胞:受体细胞:MM期的期的卵母细胞卵母细胞胚胎细胞核移植:胚胎细胞核移植:体细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度低,细胞分化程度低,恢复全能性容易恢复全能性容易用核移植的方法得到的动物用核移植的方法得到的动物称为克隆动物称为克隆动物原理:动物体细胞核的全能性。
12、原理:动物体细胞核的全能性。15取供体细胞取供体细胞取卵母细胞取卵母细胞 供体细胞培养供体细胞培养培养到培养到 M中期中期 卵母细胞去核卵母细胞去核 供体细胞供体细胞注入去核的卵母细胞注入去核的卵母细胞 供体核进入受体卵母细胞供体核进入受体卵母细胞 重组胚胎重组胚胎 代孕母牛代孕母牛 生出与供体遗传物质基本相同的个体生出与供体遗传物质基本相同的个体2.2.过程:过程:163.3.克隆动物的研究意义:克隆动物的研究意义:1.1.克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白2.2.改良动物品种改良动物品种 3.3.治疗人类疾病,作为供体治疗人类疾病,作为供体4.4.保护
13、濒危动物保护濒危动物4体细胞核移植技术存在的问题:体细胞核移植技术存在的问题:1.1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型过大,异常肥胖,发育困难,免疫失调等。过大,异常肥胖,发育困难,免疫失调等。2.2.成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。171.1.下列哪下列哪项属于克隆(项属于克隆()A A将鸡的某个将鸡的某个DNADNA片段整合到小鼠的片段整合到小鼠的DNADNA分子中分子中 B B将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤
14、将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞细胞 D D将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系D D2.2.(多选)美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用(多选)美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应器器,成功地在实验室里培育出新的动脉血管,这种血管的成功地在实验室里培育出新的动脉血管,这种血管的外形和功能都与真的血管一样外形和功能都与真的血管一样,这一研究成果是生物组织这一研究成果是生物组织培养领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中,正培养领域的重大进展
15、。下列关于以上技术的叙述中,正确的是(确的是()A A属于属于“克隆克隆”B B可能要利用去核卵细胞可能要利用去核卵细胞C C关键是激发血管细胞的全能性关键是激发血管细胞的全能性 D D关键是激发血管细胞发育成血管的潜能关键是激发血管细胞发育成血管的潜能ABDABD183.3.从母羊甲的体细胞中取出细胞核,注入到母羊乙去掉从母羊甲的体细胞中取出细胞核,注入到母羊乙去掉核的卵细胞中,融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎,再植核的卵细胞中,融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙的子宫内,出生小羊的大多数性状入到另一只母羊丙的子宫内,出生小羊的大多数性状()A A、难以预测、难以预测 B B
16、、像甲、像甲 C C、像乙、像乙 D D、像丙、像丙4.4.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生复生”将不再将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生复生”野驴的方法是野驴的方法是 ()A A将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体化、再分化,培育成新个体B B将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体体C C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,取出野
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