免疫检测常用方法和运用.pptx
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1、免疫检测常用方法和运用免疫检测常用方法和运用免疫检测常用方法和运用第1页l免疫学检测方法是应用免疫学理论设计一系列测定抗原、抗体、补体、细胞因子等免疫相关物质及微量物质如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药品浓度、微量元素、毒品等试验方法。免疫检测常用方法和运用第2页l这些方法所含有特异性好、敏感性高、简单、快速和稳定特点为临床上确定诊疗、分析病情、调整改疗方案和判断预后等提供有效试验依据,使它们在临床应用深入普及和推广。免疫检测常用方法和运用第3页凝集反应(agglutination)l颗粒性抗原(细菌、细胞等)与对应抗体,或可溶性抗原(亦可用抗体)吸附于与免疫无关载体形成致敏颗粒与对应抗体(或抗
2、原),在有适量电解质存在下,形成肉眼可见凝集小块。免疫检测常用方法和运用第4页凝集反应分类l直接凝集反应l间接凝集反应l抗人球蛋白试验(Coombs试验)免疫检测常用方法和运用第5页直接凝集反应l颗粒性抗原(细菌、细胞等)与对应抗体在有适量电解质存在下,形成肉眼可见凝集小块。l常见应用是血型判定免疫检测常用方法和运用第6页血型判定示意图免疫检测常用方法和运用第7页间接凝集反应l将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小颗粒性载体表面,然后与对应抗体(或抗原)作用,在适宜电解质存在条件下,出现特异性凝集现象称间接凝集反应(indirectagglutination)或被动凝集反应(assiveagg
3、lutination)。免疫检测常用方法和运用第8页间接凝集反应l常见载体微球有些人O型血红细胞、绵羊或家兔红细胞、聚苯乙烯乳胶、活性炭/甲苯胺红、明胶颗粒等免疫检测常用方法和运用第9页间接凝集反应l正向间接凝集反应l反向间接凝集反应免疫检测常用方法和运用第10页正向间接凝集反应l用抗原致敏载体以检测标本中对应抗体免疫检测常用方法和运用第11页正向间接凝集反应 胶乳凝集试验l所用载体颗粒为羧化聚苯乙烯胶乳,是一个直径约为0.8m大小圆形颗粒,带有负电荷,可物理性吸附蛋白分子。l将溶血素O 吸附在羧化聚苯乙烯胶乳颗粒上检测抗”O”。l将变性IgG包被于羧化聚苯乙烯胶乳颗粒上检测RF。免疫检测常用
4、方法和运用第12页正向间接凝集反应 RPR/TRUST试验l血浆反应素试验(RPR)所用载体颗粒为活性炭颗粒l甲苯胺红不加热血清反应素试验 (TRUST)所用载体颗粒为甲苯胺红颗粒免疫检测常用方法和运用第13页正向间接凝集反应 RPR试验免疫检测常用方法和运用第14页正向间接凝集反应 TRUST试验免疫检测常用方法和运用第15页正向间接凝集反应 明胶颗粒凝集试验l所用载体为人工合成惰性明胶颗粒l梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)l肺炎支原体抗体检测(MP-Ab)免疫检测常用方法和运用第16页正向间接凝集反应 TPPA试验免疫检测常用方法和运用第17页正向间接凝集反应 TPPA试验免疫检测常用方
5、法和运用第18页正向间接凝集反应 MP-Ab试验免疫检测常用方法和运用第19页正向间接凝集反应 MP-Ab试验免疫检测常用方法和运用第20页正向间接凝集反应 MP-Ab试验免疫检测常用方法和运用第21页正向间接凝集反应 MP-Ab试验l检测肺炎支原体总抗体(IgM,IgA IgG)l以滴度方式汇报检测结果(1:80 1:80、1:160、1:320)免疫检测常用方法和运用第22页反向间接凝集反应l用已知特异性抗体致敏载体以检测用已知特异性抗体致敏载体以检测标本中对应抗原。标本中对应抗原。免疫检测常用方法和运用第23页抗人球蛋白试验(Coombs试验)l抗人球蛋白抗体参加间接血凝试验,用于检测抗
6、红细胞不完全抗体l分类:直接Coombs试验 间接Coombs试验 免疫检测常用方法和运用第24页直接Coombs试验免疫检测常用方法和运用第25页间接Coombs试验免疫检测常用方法和运用第26页凝集反应总结一、直接凝集反应 血型判定二、间接凝集反应 胶乳凝集试验 ASO/RF1正向间接凝集反应 RPP/TRUST 明胶颗粒凝集 TPPA/MP2反向间接凝集反应三、抗人球蛋白试验 直接/间接Coombs试验 免疫检测常用方法和运用第27页酶联免疫吸附试验(ELISA)l 使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。l 使抗原或抗体与酶连接成酶标抗原或抗体,且既保留其免疫活性又保留酶
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