内膜系统专业知识培训专家讲座.pptx
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1、内膜系统专业知识培训第1页光镜下结构光镜下结构细胞膜细胞膜细胞质细胞质细胞核细胞核电镜下结构电镜下结构膜相结构膜相结构非膜相结构非膜相结构细胞膜细胞膜内质网内质网高尔基复合体高尔基复合体线粒体线粒体溶酶体溶酶体过氧化物酶过氧化物酶核膜核膜核糖体核糖体中心粒中心粒微管微管微丝微丝中间纤维中间纤维细胞质基质细胞质基质核仁核仁染色质染色质核基质核基质真核细胞基本结构真核细胞基本结构内膜系统专业知识培训第2页内膜系统:内膜系统:内膜系统:内膜系统:指位于细胞质内,在指位于细胞质内,在结构结构结构结构、功效功效功效功效乃至乃至发生发生发生发生上相上相互亲密关联膜性结构细胞器总称。内膜系统为细胞提供了足互
2、亲密关联膜性结构细胞器总称。内膜系统为细胞提供了足够面积膜,使之完成各种主要生命活动。够面积膜,使之完成各种主要生命活动。内质网内质网内质网内质网高尔基复合体高尔基复合体高尔基复合体高尔基复合体溶酶体溶酶体溶酶体溶酶体过氧化物酶体过氧化物酶体过氧化物酶体过氧化物酶体uu线粒体线粒体线粒体线粒体内膜系统专业知识培训第3页p内膜系统分布于内膜系统分布于细胞质基质细胞质基质中。细胞质基质也称为胞质中。细胞质基质也称为胞质溶胶,是细胞质中除各种细胞器和内含物以外较为溶胶,是细胞质中除各种细胞器和内含物以外较为均质均质而半透明而半透明液体部分。液体部分。化学组成化学组成化学组成化学组成小分子小分子小分子
3、小分子:包含水、无机离子(:包含水、无机离子(:包含水、无机离子(:包含水、无机离子(K K K K+、NaNaNaNa+、CaCaCaCa2+2+2+2+等)等)等)等)脂类、糖类、氨基酸、核苷酸及其衍生物等。脂类、糖类、氨基酸、核苷酸及其衍生物等。脂类、糖类、氨基酸、核苷酸及其衍生物等。脂类、糖类、氨基酸、核苷酸及其衍生物等。大分子大分子大分子大分子:多糖、蛋白质、脂蛋白和:多糖、蛋白质、脂蛋白和:多糖、蛋白质、脂蛋白和:多糖、蛋白质、脂蛋白和RNARNARNARNA等。等。等。等。uu另外,细胞质基质中还含有大量另外,细胞质基质中还含有大量另外,细胞质基质中还含有大量另外,细胞质基质中还
4、含有大量酶酶酶酶,它们是大分子合成和代它们是大分子合成和代它们是大分子合成和代它们是大分子合成和代谢所必需。谢所必需。谢所必需。谢所必需。细胞质基质主要功效:离子环境、提供底物和反应场所。细胞质基质主要功效:离子环境、提供底物和反应场所。细胞质基质主要功效:离子环境、提供底物和反应场所。细胞质基质主要功效:离子环境、提供底物和反应场所。内膜系统专业知识培训第4页(Endoplasmic reticulum,ER)内膜系统专业知识培训第5页内质网遍布整个细胞质内质网遍布整个细胞质由喹啉蓝荧光染料染色细胞在荧光显微镜下显示内质网结构由喹啉蓝荧光染料染色细胞在荧光显微镜下显示内质网结构内膜系统专业知
5、识培训第6页经高锰酸钾技术处理后经高锰酸钾技术处理后细胞在细胞在TEMTEM下内质下内质网膜系统全貌性结构网膜系统全貌性结构内膜系统专业知识培训第7页微粒体微粒体microsome:应用超速分级分离方法,可从细胞匀浆中分离出直径在100nm左右球囊状封闭小泡。蛋白质2/3,脂类1/3酶:酶:30种,其中种,其中葡萄糖葡萄糖-6-磷酸酶磷酸酶,普遍存在于内质网,被认为是标志酶。内膜系统专业知识培训第8页核膜外层核膜外层核膜外层核膜外层 内质网内质网内质网内质网内质网内质网是由一层单位膜围成形是由一层单位膜围成形是由一层单位膜围成形是由一层单位膜围成形状大小不一样状大小不一样状大小不一样状大小不一
6、样小管小管小管小管,小泡小泡小泡小泡,扁扁扁扁囊状囊状囊状囊状结构,相互连接形成一个结构,相互连接形成一个结构,相互连接形成一个结构,相互连接形成一个连续网状膜系统连续网状膜系统连续网状膜系统连续网状膜系统。小管小管小泡小泡扁囊状扁囊状细胞膜细胞膜核膜核膜内质网内质网内质网内质网细胞膜细胞膜细胞膜细胞膜内质网内腔相互连通。内质网内腔相互连通。内膜系统专业知识培训第9页粗面内质网粗面内质网(RER):膜表面附着膜表面附着核糖体核糖体;形态多为板层状排列扁囊;形态多为板层状排列扁囊;多分布在分泌活动旺盛或分化较完善细胞内。多分布在分泌活动旺盛或分化较完善细胞内。滑面内质网滑面内质网(SER):膜表
7、面膜表面无核糖体无核糖体附着;附着;形态多为分枝小管或小泡;形态多为分枝小管或小泡;多分布在一些特化细胞中。多分布在一些特化细胞中。核糖体核糖体粗面内质网粗面内质网粗面内质网粗面内质网粗面内质网粗面内质网滑面内质网滑面内质网滑面内质网滑面内质网滑面内质网滑面内质网异型内质网片层结构内膜系统专业知识培训第10页粗面内质网功效粗面内质网功效粗面内质网功效粗面内质网功效1.1.1.1.粗面内质网与蛋白质合成粗面内质网与蛋白质合成粗面内质网与蛋白质合成粗面内质网与蛋白质合成粗面内质网最主要功效,即合成粗面内质网最主要功效,即合成粗面内质网最主要功效,即合成粗面内质网最主要功效,即合成外输性蛋白质外输性
8、蛋白质外输性蛋白质外输性蛋白质(分泌蛋白分泌蛋白分泌蛋白分泌蛋白)。)。)。)。蛋白质合成起始于细胞质基质中游离核糖体上,不过有些蛋白蛋白质合成起始于细胞质基质中游离核糖体上,不过有些蛋白蛋白质合成起始于细胞质基质中游离核糖体上,不过有些蛋白蛋白质合成起始于细胞质基质中游离核糖体上,不过有些蛋白质在合成开始很快后便转移附着于粗面内质网上合成,由附着质在合成开始很快后便转移附着于粗面内质网上合成,由附着质在合成开始很快后便转移附着于粗面内质网上合成,由附着质在合成开始很快后便转移附着于粗面内质网上合成,由附着型核糖体合成蛋白质有:型核糖体合成蛋白质有:型核糖体合成蛋白质有:型核糖体合成蛋白质有:
9、内膜系统专业知识培训第11页分泌蛋白分泌蛋白分泌蛋白分泌蛋白:如分泌到细胞外基质蛋白、消化酶、抗体等。:如分泌到细胞外基质蛋白、消化酶、抗体等。膜整合蛋白膜整合蛋白膜整合蛋白膜整合蛋白:如膜受体蛋白,膜抗原蛋白。:如膜受体蛋白,膜抗原蛋白。溶酶体蛋白溶酶体蛋白溶酶体蛋白溶酶体蛋白:即溶酶体中各种水解酶。:即溶酶体中各种水解酶。驻留蛋白驻留蛋白驻留蛋白驻留蛋白:一些可溶性蛋白质一些可溶性蛋白质,合成后进入细胞质中合成后进入细胞质中。内膜系统专业知识培训第12页G.Blobel 和和D.Sabatini于于1975 年提出了信号肽假说年提出了信号肽假说(Signal hypothesis),认为蛋
10、白质,认为蛋白质N端信号肽,指导蛋白质转至内质网上合成,端信号肽,指导蛋白质转至内质网上合成,所以获所以获1999年诺贝尔生理医学奖。年诺贝尔生理医学奖。蛋白质转移到内质网合成包括以下成份:蛋白质转移到内质网合成包括以下成份:1.信号肽信号肽(signal peptide),位于新合成肽链),位于新合成肽链N端,普通端,普通1630个氨基酸残个氨基酸残基,含有基,含有6-15个连续排列带正电荷非极性氨基酸,因为信号肽又是引导肽链进入内个连续排列带正电荷非极性氨基酸,因为信号肽又是引导肽链进入内质网腔一段序列,又称开始转移序列(质网腔一段序列,又称开始转移序列(start transfer se
11、quence););2.信号识别颗粒信号识别颗粒SRP(signal recognition particle)由)由6个多肽亚单位和个多肽亚单位和一个一个7S RNA组成。一端能与被翻译后信号肽结合,另一端结合于核糖体上,可使组成。一端能与被翻译后信号肽结合,另一端结合于核糖体上,可使翻译暂时终止。翻译暂时终止。3.SRP受体受体(SPR receptor),内质网膜整合蛋白,异二聚体,可与),内质网膜整合蛋白,异二聚体,可与SRP特异特异结合。结合。4.移位子移位子(translocation apparatus),ER膜上一个亲水通道。与蛋白质穿膜上一个亲水通道。与蛋白质穿膜转运相关。膜
12、转运相关。内膜系统专业知识培训第13页内质网腔内质网腔细胞质细胞质SRP受体受体信号识别颗粒信号识别颗粒 (SRP)核糖体结合蛋白核糖体结合蛋白tRNAAP核糖体核糖体mRNA信号肽信号肽A信号肽假说信号肽假说信号密码信号密码移位子内膜系统专业知识培训第14页蛋白质转入内质网合成过程:蛋白质转入内质网合成过程:蛋白质多肽链在细胞质基质中游离核糖体上蛋白质多肽链在细胞质基质中游离核糖体上起始合成起始合成信号肽与信号肽与SRPSRP结合结合SRPSRP与受体结合与受体结合SRPSRP解离、核糖体附着于内质网解离、核糖体附着于内质网肽链进入肽链进入内质网腔内质网腔信号肽酶切除信号肽信号肽酶切除信号肽
13、肽链继续延肽链继续延伸直至完成伸直至完成核糖体从内质网上解离。核糖体从内质网上解离。这种肽链边合成边向内质网腔转移方法,称这种肽链边合成边向内质网腔转移方法,称为协同翻译(为协同翻译(cotranslationcotranslation)。)。内膜系统专业知识培训第15页(二)、蛋白质修饰与加工(二)、蛋白质修饰与加工 包含糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等,其中包含糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等,其中最主要是最主要是糖基化糖基化,几乎全部内质网上合成蛋白质最终被,几乎全部内质网上合成蛋白质最终被糖基化。糖基化。内膜系统专业知识培训第16页多萜醇多萜醇焦磷酸焦磷酸1.1.1.1.粗面内
14、质网与蛋白质糖基化粗面内质网与蛋白质糖基化粗面内质网与蛋白质糖基化粗面内质网与蛋白质糖基化蛋白质糖基化:蛋白质糖基化:蛋白质糖基化:蛋白质糖基化:是指单糖或寡糖与蛋白质共价结合形成糖蛋白过程。主要是是指单糖或寡糖与蛋白质共价结合形成糖蛋白过程。主要是是指单糖或寡糖与蛋白质共价结合形成糖蛋白过程。主要是是指单糖或寡糖与蛋白质共价结合形成糖蛋白过程。主要是寡糖与蛋白质天冬酰胺侧链上氨基基团结合,也寡糖与蛋白质天冬酰胺侧链上氨基基团结合,也寡糖与蛋白质天冬酰胺侧链上氨基基团结合,也寡糖与蛋白质天冬酰胺侧链上氨基基团结合,也N-N-连接糖基化。连接糖基化。连接糖基化。连接糖基化。糖与蛋白质连糖与蛋白质
15、连糖与蛋白质连糖与蛋白质连接方式接方式接方式接方式N-N-N-N-连接寡糖蛋白:连接寡糖蛋白:连接寡糖蛋白:连接寡糖蛋白:从内质网开始,在高尔基体中完成从内质网开始,在高尔基体中完成从内质网开始,在高尔基体中完成从内质网开始,在高尔基体中完成O-O-O-O-连接寡糖蛋白:连接寡糖蛋白:连接寡糖蛋白:连接寡糖蛋白:发生在高尔基复合体内发生在高尔基复合体内发生在高尔基复合体内发生在高尔基复合体内,过程不清楚。过程不清楚。过程不清楚。过程不清楚。寡糖首先与寡糖首先与ERER膜中嵌膜中嵌入脂质分子磷酸多萜醇入脂质分子磷酸多萜醇连接,然后在糖基转移连接,然后在糖基转移酶催化下转移连接到酶催化下转移连接到
16、新合成蛋白质新合成蛋白质内膜系统专业知识培训第17页2、糖基化作用:、糖基化作用:使蛋白质能够抵抗水解消化酶降解,使蛋白质能够抵抗水解消化酶降解,保护作用保护作用;运输信号作用运输信号作用,可引导蛋白质包装形成运输小泡,可引导蛋白质包装形成运输小泡,使蛋白质靶向运输;使蛋白质靶向运输;糖基化形成细胞膜包被,在细胞膜糖基化形成细胞膜包被,在细胞膜保护、识别及保护、识别及通讯联络通讯联络等生命活动中发挥主要作用。等生命活动中发挥主要作用。内膜系统专业知识培训第18页滑面内质网功效滑面内质网功效滑面内质网功效滑面内质网功效滑面内质网滑面内质网滑面内质网滑面内质网功效功效功效功效在病理条件下,内质网受
17、到损伤或一些原因作用时,会发生在病理条件下,内质网受到损伤或一些原因作用时,会发生肿胀肿胀、肥大肥大和和一些物质累积一些物质累积。如。如病毒性肝炎:肝细胞脱水病毒性肝炎:肝细胞脱水rER上上核糖体脱落核糖体脱落ER萎缩和其它细胞成份一起造成肝细胞皱缩萎缩和其它细胞成份一起造成肝细胞皱缩1.1.1.1.脂类和类固醇激素合成脂类和类固醇激素合成脂类和类固醇激素合成脂类和类固醇激素合成2.2.2.2.糖原合成与分解糖原合成与分解糖原合成与分解糖原合成与分解3.3.3.3.解毒作用:肝细胞解毒作用:肝细胞解毒作用:肝细胞解毒作用:肝细胞4.4.4.4.其它作用其它作用:肌细胞肌细胞Ca2+储存场所,形
18、成肌质网储存场所,形成肌质网参加肌肉收缩;合成胆盐(胆汁主要成份,消化作用);参加肌肉收缩;合成胆盐(胆汁主要成份,消化作用);etc.内膜系统专业知识培训第19页1898意大利意大利-高尔基(高尔基(Camillo Golgi)-光镜光镜-猫头鹰猫头鹰-神经细胞神经细胞-网状结构,内网器网状结构,内网器(Golgi complex)内膜系统专业知识培训第20页电电镜镜扁平囊扁平囊成熟面成熟面小囊泡小囊泡大囊泡大囊泡形成面形成面反面高尔基网状结构反面高尔基网状结构高尔基中间膜囊高尔基中间膜囊顺面高尔基网状结构顺面高尔基网状结构内膜系统专业知识培训第21页扁扁 平平 囊囊呈盘状,呈盘状,3-10
19、层称层称高尔基堆高尔基堆扁平囊间距:扁平囊间距:20-30nm;囊腔宽:囊腔宽:6-15nm 凹面:凹面:成熟(反)面成熟(反)面凸凸 面:面:形成(顺)面;形成(顺)面;凸面:凸面:形成(顺)面;形成(顺)面;形成面膜厚:形成面膜厚:6nm ;成熟面膜厚:成熟面膜厚:8nm小小 囊囊 泡泡30-80nm球形小泡球形小泡膜厚:膜厚:6nm;囊腔内含:囊腔内含:中等电子密度物质中等电子密度物质泡内含物质:泡内含物质:低电子密度物质,较透明。低电子密度物质,较透明。来来 源:源:小囊泡融合。小囊泡融合。来来 源:源:由由rER芽生芽生而来。而来。大大 囊囊 泡泡100-500nm;膜厚:膜厚:8n
20、m;泡内含物质:泡内含物质:高电子密度物质,浓缩泡。高电子密度物质,浓缩泡。来来 源:源:扁平囊周围或局部球状膨扁平囊周围或局部球状膨突脱落形成。突脱落形成。凹凹 面:面:成熟(反)面成熟(反)面内膜系统专业知识培训第22页基本组分:脂类,基本组分:脂类,45%特征酶:特征酶:糖基转移酶糖基转移酶,参加,参加 糖蛋白和糖脂合成糖蛋白和糖脂合成其它酶:其它酶:NADH细胞色素细胞色素C还原酶和还原酶和NADPH细胞色素氧化还原酶;细胞色素氧化还原酶;磷酸酶(核苷酸酶、腺苷三磷酸酶、硫胺互焦磷酸酶);磷酸酶(核苷酸酶、腺苷三磷酸酶、硫胺互焦磷酸酶);参加磷脂合成转移酶;参加磷脂合成转移酶;磷脂酶磷
21、脂酶A1,A2;酪蛋白磷酸激酶;酪蛋白磷酸激酶;-甘露糖苷酶。甘露糖苷酶。内膜系统专业知识培训第23页3 3H H标识亮氨酸于豚鼠胰腺细胞标识亮氨酸于豚鼠胰腺细胞3分钟分钟20分钟分钟120分钟分钟(一)、高尔基复合体在细胞(一)、高尔基复合体在细胞分泌活动中起着主要分泌活动中起着主要运输运输作用;作用;蛋白质和细胞外基质都是经由蛋白质和细胞外基质都是经由高尔基复合体进行定向转送和高尔基复合体进行定向转送和运输。运输。在胰腺细胞中蛋白质在粗面内质网合成,然后从内质网运输到高尔基体,并形成份泌颗粒,最终经过胞吐作用分泌到细胞外内膜系统专业知识培训第24页1.1.1.1.参加糖蛋白加工和参加糖蛋白
22、加工和参加糖蛋白加工和参加糖蛋白加工和修饰修饰修饰修饰:糖链合成与糖基化糖链合成与糖基化糖链合成与糖基化糖链合成与糖基化N-N-连接连接寡糖链:在寡糖链:在rER腔内开始,在高尔基腔内开始,在高尔基体中完成。体中完成。O-O-连接连接寡糖链:在高尔基体中合成和完成寡糖链:在高尔基体中合成和完成糖蛋白:糖蛋白:3H标识甘露糖标识甘露糖(内质网内质网)3H标识半乳糖、唾液酸糖标识半乳糖、唾液酸糖(高尔基高尔基)3H标识标识N-乙酰乙酰胺基胺基葡萄葡萄糖(内糖(内质网和高尔基)质网和高尔基)高尔基复合体含有对于内质网起源蛋白质修饰加工,而且还是糖蛋白中多糖高尔基复合体含有对于内质网起源蛋白质修饰加工
23、,而且还是糖蛋白中多糖组分及分泌性多糖类合成场所。组分及分泌性多糖类合成场所。高尔基复合体对糖蛋白合成和修饰过程含有严格次序性。高尔基复合体对糖蛋白合成和修饰过程含有严格次序性。(二)高尔基复合体是(二)高尔基复合体是(二)高尔基复合体是(二)高尔基复合体是胞内物质加工合成胞内物质加工合成胞内物质加工合成胞内物质加工合成主要场所主要场所主要场所主要场所内膜系统专业知识培训第25页2.2.2.2.蛋白质加工蛋白质加工蛋白质加工蛋白质加工无活性前体物质无活性前体物质无活性前体物质无活性前体物质加工改造加工改造加工改造加工改造有生物活性物质(激素)有生物活性物质(激素)有生物活性物质(激素)有生物活
24、性物质(激素)多数情况下,从内质网合成后运输到高尔基体前体蛋白是没有生物活性蛋白原,如肽类激素、神经肽和水解酶等,在高尔基体中切除部分肽链形成有活性蛋白质或多肽,然后装入分泌小泡或分泌颗粒,分泌到细胞外。内膜系统专业知识培训第26页(三)胞内蛋白质分选和膜泡定向运输枢纽(三)胞内蛋白质分选和膜泡定向运输枢纽(三)胞内蛋白质分选和膜泡定向运输枢纽(三)胞内蛋白质分选和膜泡定向运输枢纽从内质网运输到高尔基体蛋白质各种多样,高尔基体对蛋从内质网运输到高尔基体蛋白质各种多样,高尔基体对蛋白质分类,依据是蛋白质上信号肽或信号斑。白质分类,依据是蛋白质上信号肽或信号斑。1 1、回输到内质网内质网驻留蛋白,
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