化学物质成份的鉴定方法省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

第四章第四章 化学物质成份判定方法化学物质成份判定方法第一节第一节 化学判定法化学判定法一、物理常数测定一、物理常数测定 分离取得化合物，首先判定属于无机物还是有机物。分离取得化合物，首先判定属于无机物还是有机物。结晶性化合物，则需测熔点和比较旋光度。液体测沸点，结晶性化合物，则需测熔点和比较旋光度。液体测沸点，比重，折光率等。比重，折光率等。1.1.熔点测定熔点测定 化合物在大气压力下两态达成平衡而共存时温度，即熔化合物在大气压力下两态达成平衡而共存时温度，即熔 点点(MP.)(MP.)。样品要求：干燥、纯度高。样品要求：干燥、纯度高。第1页v样品干燥样品干燥 a.a.常压干燥常压干燥 b.b.减压加热干燥减压加热干燥 c.c.干燥剂干燥干燥剂干燥 d.d.冷冻干燥冷冻干燥 e.e.红外干燥法红外干燥法 f.f.真空干燥器抽气法真空干燥器抽气法 第2页v熔点测定方法熔点测定方法 毛细管法：温度计毛细管法：温度计 毛细管毛细管 b b形管形管 浓硫酸浓硫酸 或甘油或甘油 显微熔点测定仪显微熔点测定仪 优点：优点：a.a.可测微量样品可测微量样品 b.b.可测高熔点样品可测高熔点样品 c.c.可观察样品加热过程中改变可观察样品加热过程中改变 第3页v熔点测定中一些问题熔点测定中一些问题 a.a.温度计较正温度计较正 b.b.熔点不敏锐熔点不敏锐 c.c.无显著熔点，易于分解物质无显著熔点，易于分解物质 d.d.没有固定熔点但有分解点，软化点没有固定熔点但有分解点，软化点 e.e.复熔现象复熔现象 第4页v有机化合物熔点与分子结构关系有机化合物熔点与分子结构关系 a.a.同系列化合物直链其熔点随分子量增加而增加同系列化合物直链其熔点随分子量增加而增加 b.b.烃类衍生物熔点比对应烃要高烃类衍生物熔点比对应烃要高 c.c.对称性高比对称性低熔点要高对称性高比对称性低熔点要高 d.d.取代苯中第一，第二类取代基各取代苯中第一，第二类取代基各1 1时，熔点次序时，熔点次序 为：对位为：对位 间位间位 邻位邻位 e.e.取代苯中两取代基为同一类取代基时取代苯中两取代基为同一类取代基时,熔点次序熔点次序 为：为：对位对位 邻位邻位 间位间位 f.f.氢键生成对熔点影响氢键生成对熔点影响 第5页2.2.沸点测定沸点测定 物质液气两态共存时温度称为液体化合物物质液气两态共存时温度称为液体化合物沸点，每种纯液体都有固定沸点。沸点，每种纯液体都有固定沸点。v 作用：判定化合物，判断其化合物纯度。作用：判定化合物，判断其化合物纯度。v 惯用方法：惯用方法：毛细管法毛细管法 蒸馏法蒸馏法 第6页 v沸点与分子结构关系沸点与分子结构关系 a.a.同系物化合物随同系物化合物随-CH2-CH2-增加而增加增加而增加 b.b.衍生物沸点比母体高，其中以羧酸为衍生物沸点比母体高，其中以羧酸为 最高。最高。c.c.分子对称性分子对称性 d.d.一样在顺反异构体中，顺式高，反式低。一样在顺反异构体中，顺式高，反式低。e.e.有机化合物中有缔合现象沸点升高有机化合物中有缔合现象沸点升高 f.f.分子内作用力大小分子内作用力大小 第7页3.3.比旋光度测定比旋光度测定 有机化合物结构不对称时，分子与它镜影有机化合物结构不对称时，分子与它镜影不能相互重合，而经过它平面偏振光需偏转一定不能相互重合，而经过它平面偏振光需偏转一定角度，即产生旋光现象。角度，即产生旋光现象。v影响旋光度原因：影响旋光度原因：a.a.样品本质样品本质 b.b.样品厚度样品厚度 c.c.样品浓度样品浓度 d.d.溶剂温度和波长。溶剂温度和波长。第8页4.4.比重测定比重测定 预计化合物分子结构复杂性，凡比重小于预计化合物分子结构复杂性，凡比重小于1.01.0化合物通常不会含有一个以上官能团，而含多官化合物通常不会含有一个以上官能团，而含多官能团化合物比重大于能团化合物比重大于1 1。v测定方法测定方法：a.a.比重瓶法比重瓶法 b.U b.U型比重计法型比重计法 c.c.比重天平法比重天平法 第9页v 比重一些规律比重一些规律:a.a.烃类比水轻烃类比水轻 b.b.原子被取代则比重增大原子被取代则比重增大 c.c.烷烷 烯烯 炔炔 d.d.缔合能力越强缔合能力越强,比重越大比重越大 e.e.多官能团取代普通比水重多官能团取代普通比水重 第10页5.5.折光率测定折光率测定v作用：判定化合物纯度，判断可能属于哪类化作用：判定化合物纯度，判断可能属于哪类化 合物。合物。v意义：表示光线在真空中与在被测物质中进行速意义：表示光线在真空中与在被测物质中进行速 度比值。度比值。v测定仪器：阿贝折光仪测定仪器：阿贝折光仪 第11页二、分子式测定二、分子式测定1.1.元素定性分析元素定性分析 确定有机物中元素成份，降低官能团测定步骤，缩小确定有机物中元素成份，降低官能团测定步骤，缩小分析范围，普通只测杂原子。试验室惯用钠熔法。分析范围，普通只测杂原子。试验室惯用钠熔法。2.2.元素定量分析元素定量分析 元素分析仪元素分析仪 普通分析普通分析C C，H H，N N。第12页 3.3.试验式计算试验式计算 依据元素定量分析数据，确定各元素组成比。依据元素定量分析数据，确定各元素组成比。原子比原子比=百分含量百分含量/原子量原子量 4.4.分子量测定分子量测定v 质谱分析（出现分子离子峰物质）质谱分析（出现分子离子峰物质）v 混合熔点降低法：混合熔点降低法：化合物乙与甲混熔，使甲熔点降低，熔点降低幅度化合物乙与甲混熔，使甲熔点降低，熔点降低幅度与乙摩尔浓度成正比。与乙摩尔浓度成正比。缺点：样品用量大，准确度差缺点：样品用量大，准确度差 第13页三、化合物功效基和分子骨架推定三、化合物功效基和分子骨架推定 依据该化合物缺氢原因（分子式确定时已知）依据该化合物缺氢原因（分子式确定时已知）推断出双键数或环数，并结合物理常数，化学定性推断出双键数或环数，并结合物理常数，化学定性试验，试验，UVUV，LRLR，NMRNMR，MSMS谱数据，综合分析，以确谱数据，综合分析，以确定化合物含有哪些功效基。定化合物含有哪些功效基。四、官能团检识四、官能团检识 采取红外光谱能够找到一些常见官能团。并采取红外光谱能够找到一些常见官能团。并参考有机定性分析。参考有机定性分析。第14页五五.衍生物制备衍生物制备1.1.制备衍生物目标制备衍生物目标 准确确定样品为何种化合物。准确确定样品为何种化合物。2.2.生成衍生物应具备条件生成衍生物应具备条件a.a.有固定熔点（有固定熔点（50-25050-250 C C之间且与样品最少相差之间且与样品最少相差5 5 C C）b.b.易于制备，产率高，易精制纯化，试剂价廉易得易于制备，产率高，易精制纯化，试剂价廉易得 c.c.其物理常数最好文件上有记载，有色谱光谱数据（若是有机其物理常数最好文件上有记载，有色谱光谱数据（若是有机物则有，未知物则无）物则有，未知物则无）第15页3.3.衍生物制备方法衍生物制备方法a.a.烯烃衍生物制备烯烃衍生物制备 b.b.芳烃衍生物制备芳烃衍生物制备 c.c.醇衍生物醇衍生物 d.d.酚类衍生物制备酚类衍生物制备 e.e.醛酮类衍生物醛酮类衍生物 f.f.糖类衍生物制备糖类衍生物制备 g.g.羧酸衍生物制备羧酸衍生物制备 h.h.酯类衍生物制酯类衍生物制备备 i.i.缩醛衍生物制备缩醛衍生物制备 j.j.胺类衍生物制备胺类衍生物制备 第16页v3 3，5-5-二硝基苯甲酸酯制备二硝基苯甲酸酯制备第17页第二节第二节 层析判定法层析判定法 一、纸层析一、纸层析 依据移动位置求出依据移动位置求出RfRf值，进行定性判定。值，进行定性判定。步骤步骤:a.a.滤纸选择滤纸选择 b.b.点样点样 c.c.展开展开 d.d.定性检定定性检定 第18页v植物中化学成份各种多样，很多含有特殊生理活性，而且结构还很复杂，所以植物化学植物化学成份结构判定成份结构判定一直是化学家感兴趣研究领域。v早期结构研究程序普通先采取各种化学方法将复杂分子降解为几个稳定碎片，然后经过一些官能团显色化学反应、理化常数测定、官能团显色化学反应、理化常数测定、元素分析或可经过合成证实简单化合物来推元素分析或可经过合成证实简单化合物来推测测这些碎片分子，最终按降解反应原理推到出原化合物可能结构。第19页第三节 仪器分析判定v因为科学技术进步，各种科学仪器创造和普及，尤其是因为紫外光谱（紫外光谱（UV）、红外光谱）、红外光谱（IR）、质谱（）、质谱（MS）、核磁共振谱）、核磁共振谱（NMR）等近代物理方法应用，是植物化学成份结构判定方法发生了革命性改变，并已成为植物化学成份结构判定常规伎俩。第20页结构研究程序v化合物纯度测定和判断v化合物类型初步判断v已知化合物结构推断v未知植物化学成份结构分析第21页一、化合物纯度测定和判断v纯度检验必要性植物化学成份结构准确判定必须建立在该成份分离纯化基础上，能够说样品纯度是能样品纯度是能否取得准确信息关键，不然可能得到混乱否取得准确信息关键，不然可能得到混乱甚至错误结论。甚至错误结论。纯度检验方法晶型 熔点 溶程 色泽色谱方法（薄层色谱和纸色谱）色谱方法（薄层色谱和纸色谱）第22页v色谱方法要求：最少选择在三种溶剂系统中展开详细操作过程：v首先在可见光或紫外光下观察，然后喷以适当显色剂或在碘缸中显色，若为单一斑点，可判断其为纯化合物；v对于个别情况，有时需要用正、反相色谱加以确认；v在条件允许情况下，也可利用气相色谱或气相色谱或高效液相色谱高效液相色谱来证实。第23页二、化合物类型初步判断v同科属（种）植物研究信息调研v样品在提取分离过程中行为v普通理化常数和性质酸碱行为、溶解行为、层析行为等v特殊显色反应碘化铋钾可检测生物碱第24页三、已知化合物结构推断v在实际工作中，判断化合物结构并不需要测定完并不需要测定完一个化合物全部波谱数据，一个化合物全部波谱数据，有些化合物尤其是已知化合物，在化合物结构类型初步判断基础上，结合文件调研，经过与标准品理化常数、性质及薄层对照检验或一些简单波谱（如红外光谱、紫外光谱数据）对照比较，即可做出判断。第25页四、未知植物化学成份结构分析v未知植物化学成份，需要经过波谱综合解析，还需要配适当当化学、生物方法（主要是降解）来进行结构研究。v一般地，要判断一个化合物准确结构，往往需要经过各种波谱数据及理化常数相互印证，概括起来能够从以下几个方面入手：第26页1、分子量、分子式确定v由分子式可计算不饱和度不饱和度，进而推测化合物大致类型，如是否为芳香化合物，是否含有双键等。v植物化学成份最可能分子量、分子式可利用元素元素分析、分析、质谱分子离子峰（质谱分子离子峰（M）或其同位素峰）或其同位素峰（M+1）、）、（M+2）相对强度）相对强度来得到。v另外，对于一些高极性或热不稳定化合物，需用软电离方式，才有可能得到其质谱分子离子峰。第27页分子离子峰分子离子峰molecular ion peak 分子电离一个电子形成离子所产生峰。分子电离一个电子形成离子所产生峰。分子离子质量与化合物分子量相等。分子离子质量与化合物分子量相等。有机化合物分子离子有机化合物分子离子峰稳定性次序：峰稳定性次序：芳香化合物共轭链烯芳香化合物共轭链烯烯烃脂环化合物直链烯烃脂环化合物直链烷烃酮胺酯醚烷烃酮胺酯醚酸支链烷烃醇酸支链烷烃醇第28页比如：比如：CH4 M=1612C+1H4=164=16 M13C+1H4=17 4=17 M+112C+2H+1H3=17 M+113C+2H+1H3=18 M+2同位素峰同位素峰分子离子峰分子离子峰同位素离子峰（同位素离子峰（M+1峰）峰）isotopic ion peak因为同位素存在，能够看到比分子离子峰大一个质量单位因为同位素存在，能够看到比分子离子峰大一个质量单位峰；有时还能够观察到峰；有时还能够观察到M+2，M+3。；。；1615m/z RA13.1121.0133.9149.2158516 100171.1第29页2、官能团、结构碎片或基本骨架推断v紫外光谱共轭体系、芳香结构v红外光谱提供许多官能团特征吸收v质谱提供分子结构中可能存在或可能失去分子片段v核磁共振谱提供较大信息量，反应出组成份子碳、氢骨架信息第30页3、测定分子平面结构v综合光谱解析及官能团定性、定量分析结果，结综合光谱解析及官能团定性、定量分析结果，结合文件调研，利用已确定结构单元，合文件调研，利用已确定结构单元，能够推断分子平面结构。v注意：由此推测得到化合物结构可能不止一个，应与已知、结构类似化合物波谱数据间相互印证，最终选择出最可能结构。有时还需做化学降解、衍生物制备或人工合成等化学沟通工作加以证实。第31页4、分子构型、构象主体结构推断和确定v分子构型和构象主要经过测定偶极偶合谱（NOE）、二维和三维核磁共振谱、CD谱和旋光色散谱（ORD）等来进行研究。v对于晶体化合物还能够用X射线衍射分析确定晶体结构。第32页第二节 结构研究主要方法v波谱分析法是当前植物化学成份结构判定主要方法，可分为：紫外-可见光谱法红外光谱法质谱法核磁共振谱法第33页紫外-可见光谱法v在植物化学成份结构测定中，UV-VIS谱通惯用于推断化谱通惯用于推断化合物结构类型，尤其是对分子中含有共轭双键、合物结构类型，尤其是对分子中含有共轭双键、,-不饱不饱和羰基结构及芳香体系化合物结构判定。和羰基结构及芳香体系化合物结构判定。v主要规律Woodword规则（预计取代共轭双烯max值）Woodword-Fieser规则（计算取代，不饱和羰基化合物max值）Scott规则（估算取代苯衍生物RC6H4COZmax值）物质紫外可见光谱显示是分子中生色基团和助色基特征，吸收峰波长物质紫外可见光谱显示是分子中生色基团和助色基特征，吸收峰波长与分子中基团种类，数目及其相互位置相关。与分子中基团种类，数目及其相互位置相关。第34页紫外-可见光谱法应用v-紫罗兰酮和-紫罗兰酮CH=CHCOCH3CH=CHCOCH3-紫罗兰酮max值用Woodword规则计算为227nm，-紫罗兰酮max值用Woodword规则计算为299nm。显然二者UV谱有显著区分，-紫罗兰酮因为双键共轭，其紫外吸收波长较-紫罗兰酮显著移到长波方向。第35页v另外在一些情况下，如香豆素类、黄酮类化合物，它们UV光谱在加入一些诊疗试剂加入一些诊疗试剂后可因分子结构中取代基类型、数目及位置不一样而发生改变，所以能够应用应用UV谱推断该类化合物精细结构。谱推断该类化合物精细结构。第36页比如芦丁甲醇溶液及加入各种诊疗试剂后UV谱以下：试剂甲醇甲醇钠三氯化铝乙酸钠max谱带2谱带1259272275271359410433393O-Glu-RhaOOHOHHOOHOACB芦丁化学结构第37页v甲醇钠是强碱，可使全部羟基解离，进而使谱带1和谱带2均发生显著红移；v三氯化铝可分别与B环邻二酚羟基、C环羰基和A环5位羟基形成配合物，也能使谱带1和谱带2均发生显著红移；v乙酸钠为弱碱，只能是酸性较强A环7位羟基和B环4位羟基解离，使谱带1和谱带2均发生显著红移，但若与甲醇钠。第38页红外光谱v红外光是电磁波一个形式，波长在0.751000m之间，在波谱图中通惯用波数表示，波数v与波长关系为：v（cm-1）=1/=h/cv通常在波谱分析中将红外光分为近红外、中红外和远红外三个波段，其中中红外区（4000400 cm-1）是有机化合物红外吸收主要范围。第39页v红外谱图按波数可分为6个区，其中波数大于波数大于1300 cm-1区域是区域是为官能官能团区，区，波数小于波数小于1300 cm-1区域是区域是为指指纹区。区。v从官能团区可找出该化合物存在官能团，而指纹区吸收则宜于用来与标准图谱或已知图谱进行比较，得出未知物与已知物结构相同或不一样确实切结论。第40页（一）40002500 cm-1（X-H伸缩振动区）v羟基吸收范围：36503200 cm-1游离游离羟基基仅存在于气态或低浓度非极性溶剂中，红外吸收出现在较高波数（36403610 cm-1），峰形尖锐。缔合合羟基基易形成氢键相连多聚体，键力常数（k）下降，红外吸收位置移向较低波数（3300 cm-1附近），峰形宽而钝。第41页v氨基氨基红外吸收与羟基类似，游离氨基红外吸收在35003300 cm-1范围，缔合后吸收位置降低约100 cm-1；伯胺有两个吸收峰，NH2有两个氢键；仲胺只有一个伸缩振动，只有一个吸收峰，其中芳香仲胺吸收峰比对应脂肪仲胺波数高；叔胺因氮上无氢，在这个区域无吸收。第42页v烃基不饱和碳（双键及苯环）碳氢伸缩振动频率大于3000 cm-1，饱和碳（除三元环外）碳氢伸缩振动频率低于3000 cm-1不饱和碳碳氢伸缩振动可见四个吸收峰，其中两个属于CH3，两个属于CH2，由这两组峰强度可大致判断CH3和CH2百分比。在进行未知物判定时，还可依据红外图谱3000 cm-1处附近是否有吸收峰来判别无机物和有机物，其中无机物无吸收。第43页（二）2500 cm-1（三键和积累双键伸展振动区）v在这个区域，包含作图未能扣除空气背景中二氧化碳二氧化碳（约2365 cm-1、2335 cm-1）吸收峰和其它很小吸收峰。吸收峰和其它很小吸收峰。v因为此区间内出现吸收较少，所以任何小吸收峰都任何小吸收峰都应引引发注注意，它意，它们都可能提供都可能提供结构信息。构信息。第44页（三）1500 cm-1（双键伸展振动区）v红外图谱中主要区域羰基：19001650 cm-1碳碳双键：16751600cm-1苯环：1450cm-1、1500cm-1、1580cm-1、1600cm-1杂芳环：v呋喃1600cm-1、1500cm-1、1400cm-1v吡啶1600cm-1、1570cm-1、1500cm-1、1435cm-1第45页（四）15001300 cm-1v苯环、杂芳环、硝基等吸收可能进入此区，该区域主要提供弯曲振动信息v甲基在约1380 cm-1和1460 cm-1同时有吸收，当前一吸收峰发生分岔时表示偕二甲基存在，偕三甲基红外吸收与偕二甲基相同。v亚甲基CH2仅在1470 cm-1处有吸收。第46页（五）1300910cm-1v全部单键伸缩振动频率、分子骨架振动频率、部分含氢基团弯曲振动和含重原子双键（P=O，P=S等）伸缩振动频率均在这个区域出现。第47页（六）910cm-1以下v苯环因取代而产生吸收（900650cm-1）是这个区域重要内容，是判断苯环取代位置主要依据；v其次，烯碳氢弯曲振动频率也处于本区及前一区，也可以根据此区信息判断双键取代类型。第48页v1、判断苯环取代类型单取代：两个峰，分别出现在770730cm-1，710690cm-1二取代：v邻位：单峰，出现在770735cm-1v间位：三个峰，分别出现在810750cm-1，725680cm-1，900860cm-1v对位：单峰，860800cm-1第49页v2、双键取代类型判别RCH=CH2：两个峰，分别出现在990cm-1和910cm-1（强）RCH=CHR：v顺式：一个峰，690cm-1（较弱）v反式：一个峰，960cm-1（较强）R2C=CH2：890cm-1R2C=CHR：840790cm-1第50页注意！v在解析解析红外谱时，要同时注意红外吸收峰位位置、强度和峰形置、强度和峰形，对于任意一个官能团来讲，因为存在伸缩振动和各种弯曲振动伸缩振动和各种弯曲振动，所以任何一个官能团会在红外图谱不一样区域显示出几个相关吸收峰。所以，只有当几处应该出现吸收峰地方都显示吸收峰时，方能得出该官能团存在结论。第51页质谱v质谱法（MS）灵敏度远远超出其它方法，测试样品用量在不停降低，而且分析速度快，可同含有分离功效色谱联用，是唯一能够确定分子式方法。第52页v质谱基本原理含有一定压力气态有机分子，在离子源中经过一定能量（70eV）电子轰击或离子分子反应电子轰击或离子分子反应等离子化方式，使样品分子失去一个电子产生正离子，还可裂解为一系列碎片离子，然后依据粒子质荷比（粒子质荷比（m/ze）不一样，）不一样，用磁场或磁场与电场等电磁方法将这些正离子进行分用磁场或磁场与电场等电磁方法将这些正离子进行分离和判定。离和判定。因为多电荷离子产生百分比比单电荷离子小多，通常z等于1，e为1个电子电荷是一个常数，这么，质谱就成为产生并称量离子装置。因为各化合物所形成离子质量以及各种离子相对强度因为各化合物所形成离子质量以及各种离子相对强度都是各化合物所特有，故可从质谱图形中确定分子量都是各化合物所特有，故可从质谱图形中确定分子量及其结构。及其结构。第53页核磁共振谱v核磁共振现象最早是在1946年观察到，大约从1960年以来被常规地应用于有机化合物结构判定；v20世纪70年代，伴随傅里叶变换核磁共振（FT-NMR）成为常规伎俩以后以及各种脉冲序列应用，使这个领域发展愈加快速；v能够说，核磁共振谱现已成为有机化合物结构判定中最活跃、最有利和不可缺乏一部分。第54页核磁共振氢谱（1H NMR）v核磁共振氢谱统计有机分子中各质子在外加磁场中受照射频率作用后所产生不一样共振频率（用化学位移表示）化学位移：普通以四甲基硅烷为内标，测定各质子共振频率与它相对距离，这个相对距离值就是化学位移，惯用表示。v1H NMR测定中经过化学位移、裂分情况以及积分曲线高度能够判断分子中1H类型、数目及相邻原子或原子团情况。第55页影响化学位移原因v化学位移是由氢核外电子对核屏蔽作用引发，由氢核外电子对核屏蔽作用引发，1H核因周围化学环境不一样，其外电子密度以及绕核旋转时产生磁屏其外电子密度以及绕核旋转时产生磁屏蔽效应也不一样。蔽效应也不一样。v所以，凡是能使氢核外电子云密度改变原因都能影响化学位移。取代基电负性磁各向异性共轭效应第56页不一样类型氢核化学位移大致范围烷基氢炔氢烯氢芳环及芳杂环氢醛基氢活泼氢类 型-CH3-CH2-CHR-CH（)-CH()(1)R为OH，OCOR，OR，XR为C=O，C=C，Ar CH=CH（OH，SH，NH）CHO0.81.211.51.21.8在上列数据基础上-H：+（24）-H：+（12）-H：+（12）-H：+（0.51）23 58 69 910 不定，加入重水后消失第57页核磁共振碳谱（13C NMR）v与1H NMR相比，13C NMR 能够取得相关有机分子骨架最直接信息，但测定灵敏度只有1H NMR1/6000，致使13C NMR 长久以来不能投入实际应用。v脉冲傅里叶变换核磁共振装置（pulse FT-NMR）出现和计算机引入基本处理了13C NMR 存在弊端，并使13C NMR 得到广泛应用，成为有机化学结构判定有力工具。第58页FT-NMR简单原理vFT-NMR装置采取强脉冲照射使分子中全部强脉冲照射使分子中全部13C核核同时发生共振，同时发生共振，生成在弛豫期弛豫期内表现为指数方式衰减正弦信号，在经傅里叶改变即成为正常NMR信号，伴随脉冲扫描次数增加及计算机累加计算，13C信号将不停得到增强，噪声则越来越弱。信号将不停得到增强，噪声则越来越弱。经过成千上万次扫描及累加计算，最终即可得到一张峰形良好13C NMR 谱。第59页13C信号化学位移v对碳谱而言，最主要信息是化学位移，13C NMR 谱与1H NMR 谱不一样，化学位移幅度较宽，约为220，信号之间极少重合，识别起来比较轻易。v影响13C信号化学位移原因：碳杂化诱导效应共轭效应分子内相互作用第60页v与1H NMR一样，13C信号化学位移也取决于周围化学环境及电子密度，改变某个13C核周围化学环境或电子密度，该13C信号即可发生位移；v常见13C信号化学位移有苯取代基位移、羟基苷化位移、酰化位移等，在结构研究中均含有主要意义。第61页第62页实例第63页