猪伪狂犬疫苗研究进展.pptx
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1、猪伪狂犬病毒猪伪狂犬病毒 (Pseudorabies virus)(Pseudorabies virus)n伪狂犬病毒又名猪疱疹病毒伪狂犬病毒又名猪疱疹病毒1型,属疱疹病毒甲型,属疱疹病毒甲亚科的成员。亚科的成员。n猪为病毒的原始宿主,并作为贮主,可感染其他猪为病毒的原始宿主,并作为贮主,可感染其他动物如马、牛、绵羊、山羊、犬、猫及多种野动物如马、牛、绵羊、山羊、犬、猫及多种野生动物,不感染人。生动物,不感染人。一、病毒特性一、病毒特性二、疾病的临床症状二、疾病的临床症状n妊娠母猪流产,产死胎和木乃伊胎,以产死妊娠母猪流产,产死胎和木乃伊胎,以产死胎为主。胎为主。n新生仔猪大量死亡、新生仔猪大
2、量死亡、15日龄以内仔猪死亡率日龄以内仔猪死亡率为为100%。n断奶仔猪发病死亡,发病率断奶仔猪发病死亡,发病率20-40%,死亡率,死亡率10-20%,主要表现为神经症状、拉稀、呕吐,主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。等。n母猪不发情、返情、屡配不孕等。母猪不发情、返情、屡配不孕等。n公猪不育、发生睾丸肿胀、萎缩,失去种公猪不育、发生睾丸肿胀、萎缩,失去种用能力。用能力。n育肥猪表现为慢性呼吸道症状、增重迟缓、育肥猪表现为慢性呼吸道症状、增重迟缓、饲料报酬降低、推迟上市的时间饲料报酬降低、推迟上市的时间 猪伪狂犬疫苗的研究进展n目前,疫苗接种是预防、控制甚至消灭猪伪狂犬病主要的措施之一。国内
3、外已研制出猪伪狂犬病的灭活疫苗、弱毒疫苗、基因缺失弱毒疫苗已经相对成熟,而病毒载体重组疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗尚处于实验室研究阶段。一、灭活疫苗n灭活疫苗是将猪伪狂犬病毒接种于鸡 胚或细胞,当病毒滴度达到要求时收获病毒,灭活后加入免疫佐剂,从而制成灭活疫苗。n1.灭活疫苗优点。安全性高,不会引起散毒,也不会带来潜伏感染的问题。n2.灭活疫苗缺点。灭活疫苗不能将内源性蛋白抗原提呈给免疫系统,因而不能诱导细胞毒 T 细胞反应(CTL)。疱疹病毒本身的免疫原性与毒力有一定的相关性,因此灭活疫苗的免疫 效果一般较差,并且灭活疫苗使用的免疫剂量较大,偶尔会发生过敏反应,故在生产上已经较少应用。二、自然
4、缺失弱毒活疫苗n弱毒活疫苗是将分离到的野毒株经非猪源细胞反复传代,或适应鸡胚,或加入致突变剂在高于一般的培养温度条件下,在细胞上反复传代而获得的疫苗,如匈牙利的Bartha 株、罗马尼亚的 Bucharest株、BUK 株、TK200 株、北 爱 尔兰的 NIA4 株、法国 Alfort-26 株、前苏联的 VGNK-I 株、保加利亚MK25 株、南斯拉夫的 Bkal68 株和Govacc 株等弱毒株。目前使用较多的是 Bartha、Buk 毒株。n我国目前广泛使用的 PR 弱毒冻干 疫 苗(Bartha-k61)是 一 种 gI gE 双基因缺失弱毒疫苗,由于该基因缺失而进一步阻断弱毒株回复
5、毒力的可能性,所以大大提高了这种弱毒苗的安全性。n1.自然缺失弱毒活疫苗的优点。弱毒苗具有良好的免疫原性,而且价格低廉,至今仍在伪狂犬病的防控中起着重要的作用。n2.自然缺失弱毒活疫苗的缺点。未经充分致弱的弱毒苗的毒力可能会返强而导致疾病的流行;弱毒疫苗可建立潜伏感染,并有可能散毒。三、基因工程疫苗n随着分子生物学的发展,猪伪狂犬病病毒的基因组结构、基因缺失对病毒生物学性质和免疫原性的影响得到了广泛研究,猪伪狂犬基因工程疫苗的研究得到更深入的发展。猪伪狂犬基因工程疫苗包括:基因工程缺失弱毒活疫苗、亚单位疫苗、核酸疫苗、重组病毒疫苗。(一)基因工程缺失弱毒活疫苗n猪伪狂犬基因缺失主要包括对与毒力
6、相关的基因如 TK、RR、gE、gl等基因的缺失以降低病毒毒力;对糖蛋白基因如 gG、gC、gD 等基因的缺失以引入选择标记或阻止感染性病毒的产生,从而致弱猪伪狂犬病毒,同时又保持其较强的免疫原性。基因工程缺失疫苗的研制始于20 世纪 80 年代初。1.第一代基因缺失疫苗。第一代基因缺失疫苗指缺失 PRV 一个主要的 毒力基因获得的疫苗。1984 年,Kit 等以 PRV BUK 为起始材料,并以 BUK 疫苗株为亲本,通过缺失TK(腺苷激酶)基因序列中的 148bp 片段,构建出PRV 的 TK 缺 失 株 PRV BUK-d13 株。试验证明,该疫苗对猪是安全 的,并能提供有效的保护,5
7、6周龄猪在免疫接种后能产生中和抗 体,在攻毒后能表现出再次免疫应答。Quint 等 对 PRV NIA-3 株 的US 区进行部分缺失(gE 基因缺失),构建的 PRV 突变株能明显降低 PRV 对小鼠和 10 周龄仔猪的毒力,可使免疫猪能抵抗强毒的致死攻击。但 该突变株对 3 日龄仔猪仍具有较强的毒力。TK 基因缺失疫苗不仅能较 好地免疫猪只,而且免疫猪后还可以通过 PCR 的方法将免疫接种猪与 自然感染猪区分开来。但是,由于 TK 基因属于酶蛋白基因,在体内不 能产生其相应的抗体,因此仅缺失 TK 基因不能用血清学方法区别开免 疫接种猪与自然感染猪,要将此区别开来必须缺失相应的糖蛋白基因。
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