![点击分享此内容可以赚币 分享](/master/images/share_but.png)
淀粉酶米氏常数测定.pptx
《淀粉酶米氏常数测定.pptx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《淀粉酶米氏常数测定.pptx(13页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、一、一、实验目的实验目的 l了解并掌握米氏常数的意义和测定方法二、二、实验原理实验原理 酶促反应v-S曲线推导出米氏方程为:米氏常数Km是酶的一个基本特征常数,它包含着酶与底物结合和解离的性质。特别是同一种酶能够作用于几种不同底物时,米氏常数Km往往可以反映出酶与各种底物的亲和力的强弱。测定Km和Vm,可通过作图法求得。最常用的Lineweaver-Burk双倒数作图法。这个方法是将米氏方程转化为倒数形式,即:以1/v对1/S作图,可得一条直线,所得直线的截距是1/Vm,斜率为Km/Vm。通过Lineweaver-Burk作图法作图后可方便的求出Km值。l试管l移液抢l秒表l吸耳球l恒温水浴锅
2、l7200型分光光度计。三三 仪器和试剂仪器和试剂三三 仪器和试剂仪器和试剂试剂试剂 (1)酶液:精确称取酶制剂0.1g(以大约2000 Ug计),先用少量40蒸馏水溶解、浸提。将上层液小心倾入500ml容量瓶内,沉淀再加水捣研。如此重复,最后全部移入容量瓶中,定容后摇匀,用四层纱布过滤,滤液供测试定用(2)原碘液 称取碘11 g,碘化钾(KI)22 g,先用少量蒸馏水使碘-碘化钾完全溶解,定容至500 mL,贮于棕色瓶内。(3)稀碘液 取原碘液2mL,加碘化钾20 g,用蒸馏水定容至500 mL贮于棕色瓶内。(4)4可溶性淀粉 精确称取可溶性淀粉4.000g(精确至0.001g),用少量蒸馏
3、水调匀。边搅拌边加入煮水70mL,加热煮沸至透明,冷却后定容至100 mL,此溶液现配现用。(5)0.02mLpH6.0磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液 称取磷酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O)4523g和柠檬酸(C6H8O7H2O)8.07g,用蒸馏水溶解,用酸度计或pH试纸校正pH,定容至1000 mI。(6)0.2moL/L HCl 取36%盐酸(饱和浓盐酸)0.86ml加入已加有少量蒸馏水的50ml容量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀即可。四、实验操作四、实验操作 1.1.淀粉浓度梯度吸光度淀粉浓度梯度吸光度 不同底物浓度(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%)的可溶性淀粉4
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 淀粉酶 常数 测定
![提示](https://www.zixin.com.cn/images/bang_tan.gif)
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【人****来】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【人****来】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。