miRNA-218、miRNA-21在Hp感染相关胃癌组织中的表达及临床意义.pdf
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1、医学分子生物学杂志,2024,21(3):259-263 J Med Mol Biol,2024,21(3):259-263DOI:10.3870/j.issn.1672-8009.2024.03.011资助项目:攀钢集团总医院科技研发项目,四川省科技计划项目(No.2022-JYJ-59)通讯作者:陈欣(电话:18096306871,E-mail:)This work wassupported by grants from the Technology R&D Project ofPanzhihua Iron and Steel Group General Hospital,Sichuan
2、ProvincialScience and Technology Plan Project(No.2022-JYJ-59)Corresponding author:CHEN Xin(Tel:86-18096306871,E-mail:)miRNA-218、miRNA-21 在 Hp 感染相关胃癌组织中的表达及临床意义邹玲1,张恒2,吴剑1,林伟1,陈欣1攀钢集团总医院1消化内科,2普通外科 四川省攀枝花市,617000【摘要】目的 探究微小 RNA-218(miR-218)、miR-21 在幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染相关胃癌组织中的表达及临床意义。方法 选
3、取接受手术切除的胃癌患者 104 例,分析 miR-218 和 miR-21 表达与 Hp 感染胃癌患者临床病理因素及术后复发的关系。结果Hp 阳性组患者胃癌组织中 miR-218 水平低于 Hp 阴性组,miR-21 水平、2 年复发率高于 Hp 阴性组(P均0.05);Hp 感染胃癌患者胃癌组织中 miR-218 水平低于癌旁组织,miR-21 水平高于癌旁组织(P均0.05);miR-218 和 miR-21 表达与患者分化程度、TNM 分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及无疾病进展生存率相关,对术后 2 年复发情况具有较高的预测价值。结论 miR-218 和 miR-21 水平在 Hp 感
4、染和无 Hp 感染的胃癌患者中存在差异表达,其异常表达与 Hp感染胃癌患者临床病理因素及预后存在关联。【关键词】微小 RNA-218;微小 RNA-21;幽门螺旋杆菌;感染;胃癌;复发【中图分类号】R735.2Expressions of miRNA-218 and miRNA-21 in Gastric Cancer Patientswith Helicobacter pylori Infection and Their Clinical SignificanceZOU Ling1,ZHANG Heng2,WU Jian1,LIN Wei1,CHEN Xin11Department of G
5、astroenterology,2Department of General Surgery,Panzhihua Group General Hospi-tal,Panzhihua,Sichuan,617000,China【Abstract】Objective To explore expressions of miRNA-218(miR-218)and miR-21 in gas-tric cancer related to Helicobacter pylori(Hp)infection and their clinical significance.MethodsA total of 1
6、04 patients with gastric cancer undergoing surgical resection were enrolled.The relation-ship between miR-218,miR-21 and clinicopathological factors and postoperative recurrence was an-alyzed.Results The expression Level of miR-218 was lower in the Hp-positive group than in theHp-negative group,whil
7、e the expression level of miR-21 and the 2-year recurrence rate were higherin the Hp-positive group(P0.05).The expression level of miR-218 was lower in the gastric canc-er tissues than in the para-carcinoma tissues,while the expression level of miR-21 was higher in thegastric cancer tissues(P0.05).T
8、he expression levels of miR-218 and miR-21 were correlated withthe differentiation degree,TNM staging,depth of tumor invasion,lymph node metastasis and progres-sion-free survival rate,which were of high predictive value for the 2-year recurrence situation after sur-gery.Conclusion The expression lev
9、els of miR-218 and miR-21 are different between gastric cancer pa-tients with or without Hp-infection.The abnormal expressions of miR-218 and miR-21 are related with theclinicopathological factors and prognosis of gastric cancer patients with Hp infection.【Key words】microRNA-218;microRNA-21;Helicoba
10、cter pylori;infection;gastric cancer;recurrence 胃癌是消化道恶性肿瘤中发病率最高的肿瘤疾病,其发病机制复杂,发病因素较多1-2。幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染是重要的胃癌发生影响因子,但 Hp 感染的具体诱病机制尚未完全阐明,大多认为是 Hp 感染引起的胃黏膜炎症反应,长期刺激下造成胃粘膜局部低氧,促进胃癌的发生发展3-4。但 Hp 感染是否还存在其他细胞内部相关分子调控途径尚不清楚,这也是 Hp 感染影响胃病发病的重点研究方向。微小 RNA(miR-NAs)是一类非编码 RNA 小分子链,可结合靶基因 mRNA
11、3非翻译区沉默其表达,从而参与细胞生长、凋亡、感染及癌症等病理生理过程5-6。作为胃癌组织 miRNAs 中的重要指标,miR-218 和 miR-21 与胃癌相关性的研究越来越多。Zhang 等7研究表明,miR-218 可能参与胃癌转移和上皮-间质转化过程。Cuellar-Gomez 等8研究显示,miR-21 在胃癌组织中表达异常增高,可作为胃癌诊断的潜在生物学标志物,并可判断患者病情。但以 miR-218和 miR-21 角度分析 Hp 感染致癌患者预后情况的研究较少。故本研究对 Hp 感染相关胃癌患者 miR-218 和 miR-21 表达情况,分析其表达与 Hp 感染胃癌患者临床病
12、理因素的关系及对术后复发的预测价值,为胃癌的临床干预提供参考。1 材料与方法1.1 研究对象本研究符合赫尔辛基宣言,选取 2018 年 3 月至 2021 年 3 月接受手术切除的胃癌患者 104 例,其中男性 60 例,女性 44 例;年龄 51 76 岁,平均年龄(61.9 8.1)岁。纳入标准:符合胃癌的诊断标准9;接受根治性切除术;年龄 40 75 岁。排除标准:术前未接受抗 Hp 感染治疗;合并其他感染疾病;肿瘤已发生远处转移;合并严重肝肾疾病;伴有心脑血管系统疾病;合并肠穿孔、肠梗阻、胃底食管静脉曲张者;精神疾病患者。采用13C呼气实验检测 Hp 感染情况,将患者分为 Hp 阳性组
13、和 Hp 阴性组。本研究已通过医院伦理委员会审批,患者均签署知情同意书。1.2 方法1.2.1标本采集留取患者术中切除的胃癌组织和癌旁组织(距癌 5 cm 处),置于-80 冰箱待测。1.2.2 实时荧光定量 PCR 检测 取出低温保存的胃组织剪碎,加入 Trizol 试剂研磨,12 000 r/min离心 5 min 去除细胞碎片,上清液中添加 Trizol 试剂提取组织中总 RNA,经反转录试剂盒合成 cD-NA,再添加 SYBR Green PCR Master Mix 试剂盒检测 miR-218 和 miR-21 表达水平。miR-218 上游引物 为 5-ACACTCCAGCTGGG
14、TTGTGCTTGATCTAA-3,下 游 引 物 为 5-CTCCAAGAAGCTTTTCTTCT-CTCG-310;miR-21 上 游 引 物 为 5-ACACTCC-AGCTGGGTAGCTTATCAGACTGA-3,下游引物为5-ACACTCCAGCTGGGTTGTGCTTGATCTAA-311。反应条件:95 2 min,95 45 s,60 30 s,72 30 s,共 40 个循环。miR-218 和 miR-21 表达水平的相对量采用 2-Ct值法表示。1.3 随访随访至 2023 年 3 月,通过门诊复查、电话及微信群形式随访,若病理活检发现癌细胞,胃周淋巴结转移或者远处转
15、移则定义为复发,将患者分为复发组和未复发组,并统计患者无疾病进展生存时间(从患者治疗开始到肿瘤进展、复发或死亡的时间)。1.4 统计学分析采用 SPSS 24.0 软件分析处理数据,正态分布的计量资料以均数 标准差(x s)表示,采用 t检验或单因素方差分析;计数资料以率(%)表示,采用 2检验;采用 Kaplan-Meier 法绘制 Hp 感染胃癌患者生存曲线,经 Log-Rank 2检验比较 miR-218 和 miR-21 表达水平与患者无疾病进展生存的关系;用受试者工作特征曲线(ROC)评价 miR-218和 miR-21 表达水平对 Hp 感染胃癌患者术后复发的预测价值。以 P0.0
16、5 为差异有统计学意义。2 结果2.1 Hp 阳性组和 Hp 阴性组患者临床资料的比较两组一般资料比较,差异均无统计学意义(P均 0.05)(表 1)。2.2Hp 阳性组和 Hp 阴性组胃癌组织中 miR-218、miR-21 及复发情况的比较 Hp 阳性组患者胃癌组织中 miR-218 水平低于Hp 阴性组,miR-21 水平、2 年复发率高于 Hp 阴性组(P均0.05)(表 2)。2.3 Hp 感染患者不同组织中 miR-218 和 miR-21 水平的比较 Hp 感染胃癌患者胃癌组织中 miR-218 水平低于癌旁组织,miR-21 水平高于癌旁组织(P均0.05)(表 3)。表 1
17、Hp 阳性组和 Hp 阴性组患者临床资料的比较临床资料Hp 阳性组(n=48)Hp 阴性组(n=56)t/2P年龄(岁)61.3 7.962.4 8.20.7210.473性别(例)男28320.0150.902女2024病程(月)13.6 3.214.5 3.51.2510.214062邹玲,等.miRNA-218、miRNA-21 在 Hp 感染相关胃癌组织中的表达及临床意义表 2 Hp 阳性组和 Hp 阴性组胃癌组织中 miR-218、miR-21 及复发情况的比较指标Hp 阳性组(n=48)Hp 阴性组(n=56)tPmiR-2180.32 0.090.79 0.1618.0440.0
18、01miR-214.32 1.242.78 0.827.5650.001复发是18(37.50%)7(12.50%)否30(62.50%)49(87.50%)8.8470.003表 3 Hp 感染患者不同组织中 miR-218 和 miR-21 水平的比较指标胃癌组织(n=48)癌旁组织(n=48)tPmiR-2180.32 0.091.17 0.2422.9750.001miR-214.32 1.241.62 0.1514.9760.0012.4 不同临床病理因素 Hp 感染胃癌患者胃癌组织中 miR-218 和 miR-21 水平的比较 低分化、TNM 分期期、肿瘤浸润深度 T3-T4、淋
19、巴结转移 N2-N3 患者 miR-218 水平低于中-高分化、TNM 分期-期、肿瘤浸润深度 T1-T2、淋巴结转移 N0-N1 患者,miR-21 水平高于中-高分化、TNM 分期-期、肿瘤浸润深度 T1-T2、淋巴结转移 N0-N1 患者(P均60290.31 0.094.46 1.36肿瘤位置幽门部260.34 0.111.4170.1634.41 1.180.5480.587贲门胃体部220.30 0.084.21 1.35肿瘤直径(cm)5270.34 0.111.6880.0984.15 1.041.2000.2365210.29 0.094.54 1.21分化程度低分化290.
20、15 0.0414.7330.0014.94 1.294.4260.001中-高分化190.58 0.153.37 1.05TNM 分期-期200.54 0.1413.2730.0013.00 0.956.1880.001期280.16 0.055.26 1.42肿瘤浸润深度T1-T2190.52 0.1212.6390.0013.14 0.925.8690.001T3-T4290.19 0.065.09 1.24淋巴结转移N0-N1180.60 0.1515.6310.0013.41 1.133.9500.001N2-N3300.15 0.044.87 1.302.5 不同复发情况 Hp 感
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