微小RNA-132在胰腺癌患者外周血中的表达及其临床意义.pdf
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1、77中国现代药物应用2024年4月第18卷第8期Chin J Mod Drug Appl,Apr 2024,Vol.18,No.8微小 RNA-132 在胰腺癌患者外周血中的表达及其 临床意义杨兴广邵珠祥杨继武艾可为张天亮【摘要】目的研究微小 RNA-132 在胰腺癌患者外周血中的表达和临床意义。方法选择 83 例胰腺癌患者作为观察组,另外选择接受治疗的 50 例胰腺炎患者和 50 例健康体检者作为对照组组 和对照组。所有研究对象均采用 Trizol 法提取细胞当中的微小 RNA-132,并通过反转录试剂盒反转录成 cDNA,根据实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)试剂盒说明书配制反应体
2、系进行扩增,计算 miR-132 的相对表达水平。对比三组微小 RNA-132 相对表达水平,分析微小 RNA-132 相对表达对胰腺癌的诊断价值。结果三组微小 RNA-132 相对表达水平对比,差异有统计学意义(P0.05);观察组外周血中的微小 RNA-132 相对表达水平(2.870.60)明显高于对照组组的(2.500.52)和对照组的(2.020.42),对照组高于对照组组,差异有统计学意义(P0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)分析可得,微小RNA-132诊断胰腺癌的最佳临界点为2.79,外周血的微小RNA-132相对表达水平达到2.79,其诊断胰腺癌的曲线下面积(AUC)为
3、0.907,95%CI=(0.864,0.949),敏感度为 79.50%,特异度为 90.00%,P0.05。结论胰腺癌患者外周血中的微小 RNA-132 有明显上调趋势,可将微小 RNA-132 当做是对胰腺癌患者进行潜在诊断的主要标记物。【关键词】微小 RNA-132;胰腺癌;外周血;表达;临床意义DOI:10.14164/11-5581/r.2024.08.020Expression of microRNA-132 in peripheral blood of patients with pancreatic cancer and its clinical significance Y
4、ANG Xing-guang,SHAO Zhu-xiang,YANG Ji-wu,et al.Department of General Surgery,First Affiliated Hospital of Dali University,Dali 671000,China【Abstract】Objective To study the expression of microRNA-132 in peripheral blood of patients with pancreatic cancer and its clinical significance.Methods 83 patie
5、nts with pancreatic cancer were selected as the observation group,and 50 patients with pancreatitis and 50 healthy subjects were selected as the control group and control group.All study subjects were extracted microRNA-132 from cells by Trizol method and reverse-transcribed into cDNA by reverse tra
6、nscription kit.A reaction system was prepared according to the instructions of the real-time quantitative polymerase chain reaction(RT-qPCR)kit for amplification,and the relative expression level of microRNA-132 was calculated.The relative expression levels of microRNA-132 in the three groups were c
7、ompared to analyze the diagnostic value of relative expression of micro RNA-132 for pancreatic cancer.Results (i)The relative expression level of microRNA-132 was compared among the three groups,and the difference was statistically significant(P0.05).The relative expression level of microRNA-132 in
8、peripheral blood of the observation group was(2.870.60),which was significantly higher than(2.500.52)of the control group and(2.020.42)of the control group;the control group was higher than the control group;the difference was statistically significant(P0.05).(ii)Receiver operating characteristic(RO
9、C)curve showed that the optimal threshold for the diagnosis of pancreatic cancer by micro RNA-132 was 2.79;the relative expression level of microRNA-132 in peripheral blood reached 2.79,and its area under the curve(AUC)for the diagnosis of pancreatic cancer was 0.907,95%CI=(0.864,0.949),with a sensi
10、tivity of 79.50%and a specificity of 90.00%,P0.05),有可比性。研究对象或家属均在 知情同意书 上签字。1.2纳入及排除标准1.2.1纳入标准观察组患者均接受手术治疗,且经病理检查确诊为胰腺癌;观察组术前未接受任何形式的抗肿瘤治疗;所有研究对象及其家属对本研究知情同意,通过伦理委员会的批准。1.2.2排除标准年龄 18 周岁;存在器官移植史;近期曾接受过糖皮质激素治疗或者存在服用免疫抑制剂类药物史。1.3方法1.3.1样本采集从患者静脉采集外周血样本,使用 EDTA 或肝素作为抗凝剂。采集后尽快处理以避免RNA 降解。1.3.2RNA 提取采用
11、Trizol 法提取细胞当中的微小RNA-132。具体为:将血液样本与细胞裂解液混合,通过离心分离血细胞与血浆。随后使用 RNA 提取试剂从细胞中分离出总 RNA,包括微小 RNA。1.3.3RNA 纯化通过纯化步骤去除可能干扰后续反应的杂质,如蛋白质、DNA 等。1.3.4逆转录使用引物将微小 RNA-132 逆转录为cDNA,以便进行后续的定量检测。1.3.5实时荧光定量 PCR设计针对微小 RNA-132的特异性引物,通过实时荧光定量 PCR 技术扩增并检测 cDNA 的数量,准确测定样本中微小 RNA-132 的表达水平。1.3.6数据分析将 PCR 结果转化为数字数据,相对表达量一般
12、采用 2-Ct的方法1.4观察指标1.4.1微小 RNA-132 相对表达水平对比三组研究对象的微小 RNA-132 相对表达水平差异。1.4.2微小 RNA-132 相对表达对胰腺癌的诊断价值 开展 ROC 曲线分析,统计微小 RNA-132 相对表达对胰腺癌的诊断价值。1.5统计学方法数据经 IBM SPSS Statistics 26.0 计算和验证。计量资料以均数 标准差(x-s)表示,采用 F 检验;绘制 ROC 曲线,分析外周血微小 RNA-132 相对表达对胰腺癌的诊断价值,并计算 AUC。以P0.05 代表差异有统计学意义。2结果2.1三组微小 RNA-132 相对表达水平对比
13、三组微小 RNA-132 相对表达水平对比,差异有统计学意义(P0.05);观察组外周血中的微小 RNA-132 相对表达水平明显高于对照组组和对照组,对照组高于对照组组,差异有统计学意义(P0.05)。见表 1。表 1三组微小 RNA-132 相对表达水平对比(x-s)组别例数微小 RNA-132观察组83 2.870.60ab对照组502.500.52a对照组502.020.42F39.3556 P0.05注:与对照组对比,aP0.05;与对照组对比,bP0.052.2微小 RNA-132 相对表达对胰腺癌的诊断价值分析ROC 曲线分析可得,微小 RNA-132 诊断胰腺癌的最佳临界点为
14、2.79,外周血的微小 RNA-132 相对表达水平达到 2.79,其诊断胰腺癌的 AUC 为 0.907,95%CI=(0.864,0.949),敏 感 度 为 79.50%,特 异 度 为90.00%,P0.05。见图 1。图 1微小 RNA-132 诊断胰腺癌的 ROC 曲线1-特异度RNA-132曲线来源参考线敏感度1.01.00.80.80.60.60.40.40.20.20.00.079中国现代药物应用2024年4月第18卷第8期Chin J Mod Drug Appl,Apr 2024,Vol.18,No.83讨论最近几年我国的胰腺癌患病率有逐年升高的趋势,如何能快速准确的对胰腺
15、癌患者进行诊断对于控制胰腺癌的发展具有至关重要的作用。胰腺癌属于消化系统肿瘤,这种癌症的恶变程度较高,预后极差,很多患者在最初发病时没有典型的临床症状,但随着病情的不断发展,在病症发展的中晚期就会存在明显的症状,此时需对患者采用有关的敏感抗癌药物进行治疗3。目前通过基础实验方法或生物信息学方法,对胰腺癌患者胰腺肿瘤中差异微小的 RNA 进行分析,对敏感抗癌药物的耐药性分子机理进行研究,有助于对患者胰腺癌尽早诊断和治疗。从当前现状进行分析,对早期胰腺癌患者尚缺乏可靠的诊断方法,很多患者早期没有明显的临床症状,即便有些症状表现的患者也对此并没有重视。医疗机构也要重视对胰腺癌和胰腺炎等相关病症的诊断
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